This work focused on screening and characterizing antibiotic-producing actinomycetes to develop new antibiotics that can overcome the growing resistance of disease-causing microbes. One-hundred actinomycetes strains were isolated from soil samples from Chungcheongbuk-do, Korea using various kinds of actinomycetes isolation media, including a starch casein agar medium and potato dextrose agar (PDA). Among them, strain BCNU 1030 was determined to show strong antimicrobial activity against methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA). Biochemical, physiological, and 16S rRNA sequence analyses indicated that strain BCNU 1030 belonged to the genus Streptomyces. Strain BCNU 1030 exhibited antibiotic activity against a wide range of bacteria, especially methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA). The minimum inhibitory concentration (MIC) of BCNU 1030 dichloromethane extract was determined to be $0.78\;{\mu}g/ml$ for MRSA CCARM 3090. Therefore, Streptomyces sp. BCNU 1030 has potential for anti-MRSA drug development.
The screening of the microorganisms degrading chlorinated organic compounds such as PCP (pentachlorophenol) and TCE (trichloroethylene) was conducted with soil and industrial wastewater contaminated with various chlorinated organic compounds. Isolates (GP5, GP19) capable of degrading PCP and isolates (GA6, GA15) capable of degrading TCE were identified as Acetobactor sp., Pseudomonas sp., Arthrobacer sp., Xanthomonas sp. and named Acetobacter sp. GP5, Pseudomonas sp. GP19, Arthrobacer sp. GA6 and Xanthomoas sp. GA15, respectively. The microbial augmentation, OC17 formulated with the mixture of bacteria including isolates (4 strains) degrading chlorinated organic compounds and isolates (Acinetobacter sp. KN11, Neisseria sp. GN13) degrading aromatic hydrocarbons. Characteristics of microbial augmentation OC-17 showed cell mass of $2.8{\times}10^9CFU/g$, bulk density of $0.299g/cm^3$ and water content of 26.8%. In the experiment with an artificial wastewater containing PCP (500 mg/l), degradation efficiency of the microbial augmentation OC17 was 87% during incubation of 65 hours. The degradation efficiency of TCE (300 uM) by microbial augmentation OC17 was 90% during incubation of 50 hours. In a continuous culture experiment, analysis of the biodegradation of organic compounds by microbial augmentation OC17 in industry wastewater containing chlorinated hydrocarbons showed that the removal rate of COD was 91% during incubation of 10 days. These results indicate that it is possible to apply the microbial augmentation OC17 to industrial wastewaters containing chlorinated organic compounds.
Perchlorate (${ClO_4}^-$) is an emerging contaminant found in surface water and soil/groundwater. Microbial removal of perchlorate is the method of choice since perchlorate-reducing bacteria (PRB) can reduce perchlorate to harmless end-products. A previous study [3] showed experimental evidence of autotrophic perchlorate removal using elemental sulfur granules and activated sludge. The granular sulfur is a relatively inexpensive electron donor, and activated sludge is easily available from a wastewater treatment plant. A batch test was performed in this study to further investigate the effect of various environmental parameters on the perchlorate degradation by sludge microorganisms when elemental sulfur was used as electron donor. Results of the batch test suggest optimum conditions for autotrophic perchlorate degradation by sludge microorganisms. The results also show that sulfur-oxidizing PRB enriched from activated sludge removed perchlorate better than activated sludge. Taken together, this study suggests that autotrophic perchlorate removal using elemental sulfur and activated sludge can be improved by employing optimized environmental conditions and enrichment culture.
Kim, Young-Hwa;Do, Sanghyun;So, Hyunseung;Been, Junwon;Sung, Haechan;Ji, Sungchan;Son, Myunghwa;Ahn, Yeonghee
Journal of Life Science
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v.27
no.4
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pp.435-441
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2017
Perchlorate ($ClO_4^-$) is an emerging contaminant detected in soil, groundwater, and surface water. Previous study revealed bacterial community in the enrichment culture tdegraded perchlorate using elemental sulfur as an electron donor. Quantitative and qualitative molecular methods were employed in this study to investigate archaeal community in the enrichment culture. Real-time qPCR showed that archaeal 16S rRNA gene copy number in the culture was about 1.5% of bacterial 16S rRNA gene copy number. This suggested that less archaea were adapted to the environment of the enrichment culture and bacteria were dominant. DGGE banding pattern revealed that archaeal community profile of the enrichment culture was different from that of the activated sludge used as an inoculum for the enrichment culture. The most dominant DGGE band of the enrichment culture was affiliated with Methanococci. Further research is necessary to investigate metabolic role of the dominant archaeal population to better understand microbial community in the perchlorate-reducing enrichment culture.
The cellular responses of soil-borne bacterium, Pseudomonas sp. HK-6 to explosive 2,4,6-trinitrotoluene (TNT) were examined. Two stress shock proteins (SSPs), approximately 70-kDa DnaK and a 60-kDa GroEL were found in HK-6 cells in response to TNT. Analyses of SDS-PAGE and Western blot using anti-DnaK and GroEL revealed that SSPs were induced in HK-6 cells exposed to 0.5 M of TNT far 6-12 hrs. The maximum induction of proteins was achieved at 8-hr incubation point after HK-6 cells'exposure to TNT. Similar SSPs were found to be induced in HK-6 cells by heat shock (shift of temperature, from $30^{\circ}C$ to $42^{\circ}C$) or cold shock (shift of temperature,$30^{\circ}C$ to $4^{\circ}C$).2D-PAGE of soluble protein tractions from the culture of Pseudomonas sp. HX-6 exposed to TNT demonstrated that approximately 450 spots were observed on the silver stained gels ranging from pH 3 to pH 10. Among them, 12 spots significantly induced and expressed in response to TNT were selected and analyzed. Approximately 60-kDa protein, which was assumed highly expressed on the gel, was used for amino acid sequencing. N-terminal microsequencing with in-gel digestion showed that N-terminal sequence of the TNT-induced protein, <$^1XXAKDVKFGDSARKKML^17$, shared extensive similarity with $^1XXAKDVKFGDSARKKML^17$, N-terminal sequence of (P48216) GroEL of Pseudomonas putida.
Thirty three strains of bacteria were isolated from the wastewater and soil contaminated a chemical softener, nrganopolysiloxane. Of these, five strains which showed higher activities for removal this chemical were finally selected for further study. By five strains the 2,500 mgll chemical softener was removed 65.2-67.9% at $37^{\circ}C$ for 5 days by shaking. The pH optimum for growth of W3721, S3712, and S3723 strain were at around pH 7.0-7.5, and W2811, and W2823 strain were at pH 6.5-7.0, respectively. The temperature optimum for growth of W3712 strain was at $37^{\circ}C$ and the other four strains were at TEX>$30^{\circ}C$. The optimal pH and temperature for removal by W3712 strain was initial pH 7.0 and $37^{\circ}C$ respechvely. The W3712 strain was identified and named as Corynebacterium pseudodiphtheriticum W3712 based on its morphological and physiological characteristics.
Park, Joon-Seok;Lee, Noh-Sup;In, Byung-Hoon;Namkoong, Wan;Hwang, Eui-Young
Journal of the Korea Organic Resources Recycling Association
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v.9
no.3
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pp.77-87
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2001
Composting is a cost-effective and environmentally-sound technology to treat soils contaminated with hazardous organic pollutants. Pollutants to be treated are as follows: explosives, phenolic compounds, PAHs, petroleum hydrocarbons, pesticides, and etc. Composting systems are windrow, static pile, and in-vessel. Design and operational parameters of composting are aeration modes, temperature, moisture content, nutrient supplement, amendment added, and etc. Appropriate oxygen concentration of composting for contaminated soils are 5~15%, while some compounds are degraded well at the low $O_2$ concentration of 2~5%. The most diverse microorganisms live in the temperature of $25{\sim}40^{\circ}$. 50~90% of the soil field capacity is the moisture content not to make a problem in composting. Assuming a bacterial chemical equation is $C_{60}H_{87}O_{23}N_{12}P$, theoretical C : N : P from bacterial chemical portion is approximately 20 : 5 : 1. It should be noted that the ratio does not apply to the total organic carbon measured in a waste because not all carbon metabolized by bacteria is synthesized to new cellular material. Initial C/N ratio of 25~40 is optimum. It is more economical to recycle soils or composts than to add commercial microbes.
AH alkalophilic Bacillus SP. AIk-7, isolated from soil, produced ethylene. The characteristics of this microorganism is the ability to grow well under the alkaline condition, at pH 10.3. This strain is similar to Bacillus alkalophilus in terms of morphological, physiological and biological characteristics. In observation of relationship of cell growth and ethylene production according to incubation times, the ethylene synthesis mostly occur from the late exponential phase to the death phase of growth. The purpose of this paper is to study the effects of various substrates on the biosynthesis of ethylene in the intact cell and the cell-free system by the Bacillus sp. AIk-7. In both intact cell and cell-free extract, optimum conditions for ethylene production was achieved at pH 10.3 and 3$0^{\circ}C$. Ethylene was effectively produced from L-Met and 1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid (ACC). In this case, ACC as the substrate on ethylene production were two fold higher than L-met at each concentration of substrates. On the other hand, the cell-free ethylene-forming system was used as a tool for the elucidation of the biochemical reaction involved in the formation of ethylene by Bacillus sp. AIk-7. Ethylene production in the cell-free system required the presence of manganese and cobalt ion to be stimulated a little. The result obtained in this work suggests that L-met and ACC may be a precursor more directly related to bacterial ethylene production than any other substrates tested.
Journal of Korean Society of Environmental Engineers
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v.31
no.2
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pp.125-131
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2009
Reductive dechlorination of polychlorinated dibenzo-p-dioxins (PCDDs) and its toxicity change were predicted by the linear free energy relationship (LFER) model to assess the zero-valent iron (ZVI) and anaerobic dechlorinating bacteria (ADB) as electron donors in PCDDs dechlorination. Reductive dechlorination of PCDDs involves 256 reactions linking 76 congeners with highly variable toxicities, so is challenging to assess the overall effect of this process on the environmental impact of PCDD contamination. The Gibbs free energies of PCDDs in aqueous solution were updated to density functional theory (DFT) calculation level from thermodynamic results of literatures. All of dechlorination kinetics of PCDDs was evaluated from the linear correlation between the experimental dechlorination kinetics of PCDDs and the calculated thermodynamics of PCDDs. As a result, it was predicted that over 100 years would be taken for the complete dechlorination of octachlorinated dibenzo-p-dioxin (OCDD) to non-chlorinated compound (dibenzo-p-dioxin, DD), and the toxic equivalent quantity (TEQ) of PCDDs could increase to 10 times larger from initial TEQ with the dechlorination process. The results imply that the single reductive dechlorination using ZVI or ADB is not suitable for the treatment strategy of PCDDs contaminated soil, sediment and fly ash. This LFER approach is applicable for the prediction of dechlorination process for organohalogen compounds and for the assessment of electron donating system for treatment strategies.
In this work we have investigated the production of catalase from Bacillus sp. strains, which were screened and identified from soil. These strains were cultivated in shaking flasks with tryptic soy broth (TSB) at $30^{\circ}C$ and 200 rpm. Effects of the temperature and pH on the stability of the native catalase and whole cell viability were studied in the temperature range of $25-60^{\circ}C$ and the pH range of 7-13. Korean natural zeolite was added to culture medium and mixed with microorganisms for 24 hours. The native catalase maintained its activity over $50^{\circ}C$. The enzyme acitiviy of the catalase from Bacillus flexus BKBChE-3 was highest among the Bacillus sp. strains studied. Bacillus flexus BKBChE-3 and immobilized Bacillus cells have survived under extreme conditions of over $50^{\circ}C$ and pH 12. 60 mL of 10.5 mM $H_2O_2$ solution were entirely removed within 1 hour with catalase produced from Bacillus sp. on the flask. When Bacillus cells were immobilized on Korean natural zeolite, colony forming unit of Bacillus flexus BKBChE-3 was increased and high efficiency of hydrogen peroxide removal was observed.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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