The development of a protocol for high efficiency of embryogenic callus separation, maintenance and plant regeneration from the seeds of zoysiagrass cv. Zenith was studied. Embryogenic callus ratio is absolutely determined by genotype, but by adding high concentration of copper into medium, changing light condition and maintaining callus on initial induction medium for 8∼10 weeks, embryogenic callus can be easily distinguished and its growth can be promoted. There were significant differences among selected callus lines (each from one seed) according to their growth rates and regeneration percentages. Callus pre-treatment with activated charcoal inhibited callus growth, increased the level of precocious germination during culture and promoted shoot cluster formation after transfer to regeneration medium. For long-term callus maintenance, N6AA medium was better than MS medium, because the former inhibited non-embryogenic callus formation and kept vigor of embryogenic callus. The best callus lines Z-(5) has been successfully used for transformation and somaclonal variation selection in our laboratory.
This study was camed out in order to establish plant regeneration via seed-derived callus of perennialryegrass.Varietal difference in callus growth and plant regeneration was obvious between two cultivars of perennialryegrass. "Reveille" showed a relatively high capacity for plant regeneration. The MS medium was superiorto SH or Bj in callus formation and plant regeneration. The highest regeneration frequency (60%) from calluswas obtained in presence of 5 mg/ l 2,4-D and 1 mg/ t kinetin. Regeneration response varied among calluscultures initiated from the same cultivar. Regeneration frequency was the most effective in 6 weeks-old calliafter initiation and lost their regeneration capacity gradually over a period of 12 weeks.(Key words : Perennial ryegrass (Lolium perenne L.), Plant regeneration)e L.), Plant regeneration)
켄터키 블루그래스의 종자배양에서 캘러스 형성 및 식물체 재분화 체계를 확립하기 위하여 배지조성 및 배양조건 등에 따른 배양효율의 차이를 'Kenblue'를 공시품종으로 사용하여 수행한 실험의 결과를 요약하면 다음과 같다. 성숙종자로부터 캘러스 유도를 위한 생장조절제로는 2 mg/L 2,4-D와 0.2 mg/L BAP 조합이 가장 효과적이었으며, 유도된 캘러스로부터 식물체 재분화를 위해서는 1 mg/L NAA와 5mg/L kinetin 조합이 가장 효과적이었다. 캘러스 유도시 암상태에서 배양하는 것이 약한 광 상태에서 배양하는 것보다 효과적이었으며, 캘러스 유도와 식물체 재분화에 있어 기본배지로 N6 배지나 B5 배지보다 MS 배지를 사용하는 것이 식물체 재분화에 효과적이었다. 배지 내에 첨가되는 탄소원으로는 maltose가 sucrose 보다 효과적이었다.
Quantitative trait loci (QTLs), which were related to the ability of callus induction and plant regeneration in seed culture of rice, were analyzed using a mapping population from a cross between the rice cultivars 'Samgang' (tongil type) and 'Nagdong' (japonica). A tongil type rice cultivar, 'Samgang' showed lower frequency (20%) of plant regeneration than that (35%) of japonica rice, 'Nagdong'. Transgressive segregations were observed for the ability of callus induction and plant regeneration from the seed-derived calli of 58 doubled haploid (DH) lines. The ability of plant regeneration of 58 doubled haploid lines showed a continuous distribution with comparatively wide range (10.0 to 66.7%) of variation. Composite interval mapping analysis was used to identify the QTLs controlling callus induction and plant regeneration ability. Four significant QTLs, qCWS6, qCWS8, qCWS9 and qCWS11, associated with callus weight per seed were detected on chromosomes 6, 8, 9, and 11 with LOD values of 3.30, 2.60, 2.70 and 2.43, explaining 36% of the total phenotypic variation. Three significant QTLs, qPR1, qPR6, and qPR11, for the ability of plant regeneration were located on chromosome 1, 6, and 11 at LOD score of 2.25, 2.15 and 2.55, accounting for 24 % of the total phenotypic variation. The present study should be useful for improving the efficiency of plant regeneration in tissue culture of indica rice by means of marker-assisted selection.
Jeon, Woong Bae;Lee, Man Bo;Kim, Dae Yeon;Hong, Min Jeong;Lee, Yong Jin;Seo, Yong Weon
한국육종학회지
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제42권4호
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pp.351-356
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2010
Brachypodium distachyon is rapidly emerged in biological study and has been currently used as a model system for genetics and functional studies for crop improvement and biofuel production. Phosphinothricin (PPT) has been widely used as a selectable agent, which raises ammonium content and induces toxicity in non-transformed plant cells. However PPT selection is not much effective on Brachypodium callus consequently reducing transformation efficiency. In order to identify the efficient conditions of PPT selection, calli obtained from mature seeds of Brachypodium (PI 254867) were cultured on the callus inducing medium (CIM) or regeneration medium (ReM) containing serial dilutions of the PPT (0, 2, 5, 10, and 15 mg/l) in dark or light condition. Callus growth and ammonium content of each treatment were measured 2 weeks after the treatment. Although callus growth and ammonium content did not show much difference in CIM, slow callus growth and increased ammonium accumulation were found in ReM. No significant difference of ammonium accumulation in response to PPT was found between dark and light conditions. In order to identify major factors affecting increased ammonium accumulation, callus was cultured on the media in combined with phytohormones (2,4-D or kinetin) and carbon sources (sucrose or maltose) containing with PPT (5 mg/l). The highest ammonium content in callus was found in the kinetin and maltose media.
In an effort to optimize tissue culture conditions for genetic transformation of orchardgrass (Dactylis glomerata L.), an efficient and high-frequency plant regeneration system from seed-derived calli was established. Embryogenic calli induced on MS medium containing 3mg/L 2,4-D and 0.1mg/L BA had significantly improved regeneration ability. Plant regeneration rate was 92% when embryogenic calli were cultured on N6 medium supplemented with 1mg/L 2,4-D and 3mg/L BA. Among three kinds of medium, MS and N6 medium were optimal for embryogenic callus induction and plant regeneration, respectively. Ho difference in callus induction frequency was observed among four cultivars of orchardgrass, however, "Roughrider" cultivar showed higher regenerability with the frequency of 61%. Addition of maltose to the regeneration medium as a carbon source dramatically increased regeneration frequency up to 69%. A short tissue culture period and high-frequency regeneration system would be beneficial for molecular breeding of orchardgrass through genetic transformation.
Orchardgrass의 종자배양에서 캘러스형성과 식물체 재분화에 적합한 조건을구명하기 위하여 품종간의 차이와 배지조성 및 생장조절물질의 조성 등에 대한 일련의 실험을 수행한 바, 공시품종중 "Amba"의 식물체 재분화율이 가장 높았고, $N_6$ 배지가 MS, $B_5$ 배지보다 종자에서 형성된 캘러스 생체중이 무거웠으며, 식물체 재분화율도 높게 나타났다. 또한 3 mg/L의 dicamba가 첨가된 배지에서 형성된 캘러스를 재분화배지에 이식하였을 때 식물체 재분화율이 30%로 가장 높게 나타났다.
벼의 종자배양에서 식물체 재분화 능력을 향상시키기 위하여 2 mg/L의 2,4-D와 여러 가지 농도의 copper (0~5.0mg/L)가 첨가된 MS배지에 종자배양 한 바 캘러스 생장정도는 copper 농도에 따라 다르게 나타났는데 특히, 2.5 mg/L의 copper가 첨가된 배지에서 가장 양호하였다. 그리고 캘러스 형성률과 copper 농도 간에는 유의성 있는 차이가 인정되지 않았다. 식물체 재분화 배지에 2.5 mg/L의 copper의 첨가는 Indica 품종들의 식물체 재분화 효율을 크게 향상시켰다. Copper가 첨가되지 않은 N$_{6}$배지에서 Indica 6품종의 평균재분화율은 2.4%이었으나, copper가 첨가된 배지에서 27.4%로 높게 나타났다.
This study was conducted to determine the optimal concentrations of plant hormones (2,4-D, picloram, dicamba, NAA, kinetin) and the suitable explants among seeds, hypocotyl, and cotyledons on calls formation and plant regeneration of stevia(Stevia rebaudiana Bertoni). The frequency of cellus formation was higher in the young leaf-explants then the older ones, and in the seeds then the hypocotyls and cotyledons on MS medium with 1mg/L 2,4-D. After transfer of seed-derived stevia callus producing embryogenic callus on plant-regeneration medium, the frequency of plant regeneration from callus was 23.8% in MS medium with 1mg/L NAA and 3mg/L kinetin.
티모시의 4가지 품종을 이용하여 성숙종자로 부터 캘러스 유도 및 식물체 재분화 효율을 조사하였다. 4주 동안 배양한 종자로부터 캘러스 유도율은 Colt, Chair, Richmond, Hokuo 순으로 캘러스 유도율을 보였고, 식물체로의 재분화 또한 캘러스 유도율과 같은 Colt > Chair > Richmond > Hokuo 순으로 나타났다. 기본 배지의 종류에 따른 배양 효율의 차이는 품종별 차이는 있으나 MS 배지가, 식물체 재분화는 N6 배지와 MS 배지가 SH 배지에 비해 효과적이었다. 전체적으로는 캘러스 유도율이 높은 품종이 식물체 재분화율도 높은 경향을 나타내었다. 본 연구를 통하여 밝혀진 캘러스 유도와 식물체 재분화율이 우수한 Colt 품종은 유용유전자 도입을 통한 신품종 개발에 유용하게 이용될 수 있을 것이다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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