To date, there has been no employment of a magnetoelastic (ME) biosensor method to detect Salmonella enterica serovar Typhimurium in soil. The ME biosensor method needs to be investigated and modified for its successful performance. The filtration method, cation-exchange resin method, and combinations of both methods were employed for the extraction of S. Typhimurium from soil. The number of S. Typhimurium and the resonant frequency shift of the ME sensor were then compared using a brilliant green sulfa agar plate and an HP 8751A network analyzer. A blocking study was performed using bovine serum albumin (BSA), polyethylene glycol (PEG), and casein powder suspension. Finally, the modified ME biosensor method was performed to detect S. Typhimurium in soil. The number of S. Typhimurium was significantly decreased from 7.10 log CFU/soil to 4.45-4.72 log CFU/soil after introduction of the cation-exchange resin method. The greatest resonant frequency shift of the measurement sensor was found when employing centrifugation and filtration procedures. The resonant frequency shift of the PEG-blocked measurement sensor was $3,219{\pm}755Hz$, which was significantly greater than those of the BSA- and casein-blocked ME sensor. The optimum concentration of PEG was determined to be 1.0 mg/ml after considering the resonant shift and economic issue. Finally, the modified ME biosensor method was able to detect S. Typhimurium in soil in a dose-response manner. Although these modifications of the ME biosensor method sacrificed some advantages, such as cost, time effectiveness, and operator friendliness, this study demonstrated a novel approach of the ME biosensor method to detect S. Typhimurium in soil.
Escherichia coli O157:H7 and Salmonella ser. typhimurium are pathogens involved in food poisoning in numerous countries. This study aimed to obtain knowleges on the survival of E. coli O157:H7 KSC 109 and S. ser. typhimurium ATCC 14028 in fermentedmilk products which were on sale in Suwon Yakult supplier. To the final concentration of 103~104 cfu/$m\ell$ of E. coli O157:H7 KSC 109 or S. wer. typhimurium ATCC 14028 in the fermented milks, Metchnikoff, Ace, Yakult, Mastoni and Super 100 were inoculated with these pathogens and then were stored at 4$^{\circ}C$ and viable cells of these pathogens were periodically counted. The results showed that the survival of two pathogens differed in the different types of fermented milks tested. Number of suriviving E. coli O157:H7 KSC 109 and S. ser. typimurium ATCC 14028 cells (initial inoculum, 103~104 cfu/$m\ell$) were decreased to 101, 102 cfu/$m\ell$ in Ace after 100 hours, and were decreased gradually to 101 cfu/$m\ell$ in Yakult after 250 hours. In the other fermented milks, viable cells of E. coli O157:H7 KSC 109 was not drastically decreased but those of S. ser. typhimurium ATCC 14028 was decreased gradually to 102 (Mastoni), and to 101 cfu/$m\ell$ (Super 100) after 250 hours. It appeared that S. ser. typhimurium ATCC 14028 was more susceptible than E. coli O157:H7 KSC 109 at low pH. Vibale cells of E. coli O157:H7 KSC 109 was not drastically decreased in most of fermented milks tested except Ace and Yakult, but in general, S. ser. typhimurium ATCC 14028 was drastically decreased in most of the fermented milks. The major ingibition factor against these pathogens in the fermented milks during storage at 4$^{\circ}C$ appeared to be the acidity and the metabolites produced by the starters bacteria used in fermented milk products.
본 연구는 황련, 금은화, 그리고 백작약 혼합분말(1:1:1)의 메탄올 추출물(CLP1000)과, 이에 dioctahedral smectite를 혼합한 합제 (CLPS1000)의 살모넬라에 대한 항균효과를 평가하기 위해 수행되었다. CLP1000와 CLPS1000는, 0. 5mg/ml 농도에서 S. typhimurium에 대한 항균효과를 보이지 않았으나, 1.0 mg/ml의 농도에서는 S. typhimurium에 대한 항균활성이 관찰되었다. BALB/c 마우스를 이용한 살모넬라 감염시험에서 Smectite, CLP1000 그리고 CLPS1000을 각각 10 mg/ml 농도로 12일 동안 투여한 결과, 사망률이 각각 90%, 90% 그리고 70%을 보여, CLPS1000이 마우스 살모넬라증에 강력한 효과를 갖고 있는 것으로 나타났다.
Non-typhoidal Salmonella serovars remain a potential threat to human health and many animals including beef cattle, broiler chickens, and pigs which possible sources of non-typhoidal salmonellosis in human. In this study, the cecal contents of slaughtered pigs were examined for Salmonella serovar prevalence. The characteristics of the isolates, including antimicrobial resistance patterns and virulence genes, were studied along with the reference strain S typhimurium ATCC 13311. Out of 640 sample, 137 Salmonella(21.4%) were isolated and their serovar were identified S typhimurium 83 strains(60.6%), S agona 10 strains(7.3%), S schwarzengrund 4 strains(2.9%), S derby 4 strains(2.9%), S ayinde 1 strains(0.7%), and untypable 35 strains(25.5%). All 83 S typhimurium strains(100%) were multi-drug resistance to at least 7 antibiotics, and 20 strains(24.1%) of 83 isolates were R-type ACSSuT. Examination of virulent gene by PCR revealed that 73 S typimurium field isolates(88%) have a invA gene and 24 strains(28.9%) have a spvC gene. Consequently, S typhimurium infection in slaughtered pigs was relatively to appear high prevalence in their herds which suggested that it should be necessary for herd health monitoring and surveillance.
S. typhimurium의 세포내생존을 가능케하는 유전자가 다른 세균에서도 존재하는지를 조사하기 위해 8주의 세균주를 사용하였다. phoP-PhoQ operon은 세포내 환경의 자극을 인지하고 그 환경의 적응에 관여하는 유전자의 유전자표현을 조절한다고 알려져 있다. S. typhimurium의 phoP region의 514 basepairs EcoRV DNA fragment를 probe로 dot blot hybridization을 실시하였다. K. pneumoniae, P. aeruginosa, S. marscescens, E. cloacae, S. typhimurium의 phoP/phoQ gene과 유사한 DNA sequence를 가지지 않았으며 E. coli, S. dysenteriae, E. cloacae에서는 세포내 생존가능세균이 아님에도 불구하고 positive signal을 나타내었다. 이상의 결과에서 S. typhimurium외의 세포내 생존가능세균에는 phoP/PhoQ operon이 없다는 것을 알게 되었고 세포내 생존이 가능하지는 않지만 S. typhimurium과 계통발생학적으로 가까운 세균주에서 phoP/phoQ operon이 발견되었다. L. monocytogenes의 세포내 생존에는 phoP/phoQ에 의존하지 않는 어떤 다론 기전이 존재할 것으로 사료된다.
살모넬라는 음식과 식수에서 흔히 나오는 중요한 병원체로 세계 곳곳에서 급성 위장염과 같은 감염증을 일으키며, 일반적으로 인간의 혈청형 임상종으로는 Salmonella enterica의 혈청형인 S. Typhimurium과 S. Enteritidis가 있다. 일반적인 검출 방법으로 살모넬라를 기본으로 하여 선택적인 배양으로 샘플을 수집하였고 살모넬라를 일으키는 군체의 특징을 생화학과 혈청학상인 테스트를 하였으나 이러한 방법들은 일반적으로 시간이 걸리고 높은 감도를 보이지 않았다. 최근, 등온증폭반응법과 real-time PCR법을 이용하여 높은 감도, 특이성으로 현재 병원성 박테리아에 빠르게 수행할 수 있게 되었다. 본 연구에서는 등온증폭반응과 real-time PCR법을 사용하여 S. Typhimurium과 S. Enteritidis의 검출하였다. 선택적인 타겟 유전자로, invA를 살모넬라종의 염기서열에 특이적으로 임의복제 하였다. 등온증폭반응과 real-time PCR은 살모넬라종으로부터 임의의 염기서열을 증폭하여 검출하였고, invA는 S. Typhimurium과 S. Enteritidis의 두 가지 종을 모두 검출하였다. 이러한 등온증폭반응과 real-time PCR법으로 S.Typhimurium과 S. Enteritidis의 검출 가능성을 보였으며, 살모넬라 종에 대한 특이성, 민감성을 갖춘 유용한 검출방법을 제시하였다.
본 연구는 E. coli와 S. typhimurium을 대상으로 orthophenylphenol 20%를 함유한 훈증소독제, Fumagari OPP$^{(R)}$의 살균효과를 평가하기 위해 수행되었다. 예비 시험에서, E. coli와 S. typhimurium의 현탁액 균수는 모두 $4.0{\times}10^8CFU/mL$이었으며, 모든 훈증소독제에 노출시킨 담체의 균수는 모두 평판배지법과 여과법으로 배양한 시험균주 현탁액의 균수의 50%보다 많았다. 또한, 대조 담체로부터 회복된 E. coli와 S. typhimurium 균수는 모두 $3.4{\times}10^6CFU/mL$이었다. 훈증소독제의 살균효과 시험에서는, 훈증소독제를 처리한 담체의 E. coli와 S. typhimurium의 감소 균수는 각각 5.64와 5.26 logCFU/mL로 나타났다. 이상의 결과로부터, 훈증소독제, Fumagari OPP$^{(R)}$은 E. coli와 S. typhimurium에 대해 효과적인 살균력을 갖는 것으로 확인되었으며, 병원성 세균에 오염된 식품재료 및 주방용품의 소독에 적용할 수 있을 것으로 사료된다.
후춧가루에 존재하는 식중독 균을 저감화시키기 위한 방법으로 UV-C와 mild heat를 병합 처리 가능성을 타진하였다. Escherichia coli O157:H7 (ATCC 35150)와 Salmonella Typhimurium (ATCC 19585)를 후춧가루에 각각 $10^6$, $10^7CFU/g$ 수준으로 인위접종하여 $2.32W/cm^2$의 UV-C와 $60^{\circ}C$의 mild heat을 10분에서 70분 동안 처리하였다. 그 후 미생물 분석 및 후춧가루의 품질변화를 측정하였다. UV-C를 단독으로 70분 동안 처리했을 때 E. coli O157:H7과 S. Typhimurium는 각각 1.89, 2.24 log CFU/g 수준으로 감소하였지만, UV-C와 mild heat을 70분 동안 병합처리 했을 때는 각각 2.46, 5.70 log CFU/g으로 감소하였다. E. coli O157:H7 보다는 S. Typhimurium의 저감효과가 더 컸다. 색도는 모든 처리구에서 유의적인 차이가 없는 것으로 나타났다. 따라서 UV-C와 mild heat 병합처리는 후춧가루에 존재하는 식중독 균을 사멸시키는 데 효과적이기 때문에 산업적인 살균처리 기술로 활용될 수 있을 것으로 판단되었다.
The present study was undertaken to estimate the antibacterial effect of Mume Fructus water extract (MFWE) against murine salmonellosis. At MFWE concentrations ranging from 25 to 100 ${\mu}g/ml$, the antibacterial effect was not showed on Salmonella typhimurium (S. typhimurium). On the other hand, bacteria without MFWE had a tendency to proliferate up to 8 h after incubation. Oral administration of MFWE at the dose of 40 mg/ml showed a therapeutic effect for S. typhimurium infected BALB/c mice. The mortality of MFWE-treated mice was 80% at 12 days, while that of MFWE-untreated mice was 100% at 9 days after a lethal dose of S. typhimurium infection. The results of our study strongly indicate that MFWE has potential as an effective of salmonellosis.
The antimicrobial properties of extracts of Prunus mume were tested on Salmonella paratyphimurium and S. typhimurium. First, the Prumus mume was extracted with methanol at several temperatures, and then fractionation of the methanol extracts from Prunus mume was carried out by using petroleum ether, chloroform, ethyl acetate or butanol. Secondly, absorption column chromatoraphy (using a Diaion HP 20) was conducted to eliminate some water soluble materials that might inhibit the antimicrobial activity of some extracts. The antimicrobial activitry of each of the Prunus mume extracts was determined using a paper disc method against several food-borne pathogens, The growth inhibition curve was determine using butanol extracts of Prunus mume against Salmonella typhimurium. The extraction temperature did not have any significant effect on the yield of the extract or on the level of antimicrobial activity. The butanol extract of Prunus mume showed strong antimicrobial activity against Salmonella paratyphimurium and S. typhimurium; a 1,000 ppm of butanol extract of Prunus mume retared the growth of S. typhimurium up to 36 hours. (Korean J Nutrition 35(9) : 926~931, 2002)
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[게시일 2004년 10월 1일]
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