Bacillus sp. YBL-7 which had been isolated from ginseng root-rot suppressive soil was able to antagonize Fusarium solani causing ginseng root-rot by their antibiotic substance. In order to develop multifunctional antagonist on Bacillus sp. YBL-7 as a biocontrol agent against Fusarium salam', optimal conditions for protoplast transformation system of Bacillus sp.YBL-7 by the vector plasmid pE194 were investigated. The protoplasts of Bacillus sp. YBL-7 were obtained at best efficiency by treatment with 200${\mu}g$/ml of lysozyme in the pH 7.0 of SMM buffer for 90 minutes at $40^{\circ}C$. The cell wall of the protoplast was regenerated on the agar plate containing 1.2% agar and 0.7 M mannitol. Under the best condition for protoplast formation and regeneration, the optimal transformation was achieved with 40% polyethylene glycol (M.W. 4000) treatment for 10minutes. The vector plasmid pE194 showed the best transformation frequency at 5$\mu$g/ml of final concentration. The pE194 was very stable over 80% in the transformants.
Kim, Byung-Yong;Bae, Mun-Hyung;Ahn, Jae-Hyung;Weon, Hang-Yeon;Kim, Sung-Il;Kim, Wan-Kyu;Oh, Dong-Chan;Song, Jaekyeong
The Korean Journal of Pesticide Science
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v.18
no.4
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pp.396-403
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2014
Ginseng (Panax ginseng C. A. Meyer) is an economically valuable pharmaceutical crop in Korea. In order to find promising biocontrol agents for soil-borne fungal pathogens which infect ginseng roots, we have isolated actinomycete, BK185 from soil. The isolate was investigated for the antifungal activity against to ginseng rot pathogens prior to testing genetic and chemical properties. The strain was identified as Streptomyces sp. using phylogenetic analysis based on 16S rRNA gene sequence. The most closely related species was S. sporoclivatus and S. geldanamycininus with high similarities (>99%). The isolate, BK185 showed positive reaction for PCR detection targeting biosynthetic gene clusters of PKS (Type-I polyketide synthase) and NRPS (Non-ribosomal polypeptide synthetase) genes. Major metabolite from the BK185 was analyzed by The LC/MS and identified to geldamycin, which was known to contained broad antibacterial, antifungal or anticancer activities. The results provide evidences that the strain, BK185 can be promising biocontrol agent for ginseng organic farming.
Kim, Byung-Yong;Ahn, Jae-Hyung;Weon, Hang-Yeon;Song, Jaekyeong;Kim, Sung-Il;Kim, Wan-Gyu
The Korean Journal of Pesticide Science
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v.16
no.4
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pp.357-363
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2012
Ginseng (Panax ginseng C. A. Meyer) is an economically important crop in Korea. While the consumption of the crop is gradually increasing, the yield is decreasing due to the injury of continuous cultivation or infection of soil-borne fungal pathogens such as Cylindrocarpon destructans, Fusarium solani, Rhizoctonia solani and Sclerotinia nivalis. In order to find promising biocontrol agents, we have isolated 439 soil bacteria from ginseng cultivated soil and tested their antifungal activities against ginseng rot pathogens. Among them, 3 strains were finally selected and tested for the elucidation of their genetic and biochemical properties. They were identified as Bacillus amyloliquefaciens using phylogenetic analysis based on 16S rRNA gene sequences. Moreover, all selected strains showed positive reaction for PCR detection targeting biosynthetic gene sequences of iturin A and surfactin. The results provided promising evidences that the bacterial strains isolated from ginseng cultivated soil can be novel biocontrol agents for ginseng cultivaion.
In the 1970s and 1980s, during the nascent phase of ginseng disease research, efforts concentrated on isolating and identifying pathogens. Subsequently, their physiological ecology and pathogenesis characteristics were scrutinized. This led to the establishment of a comprehensive control approach for safeguarding major aerial part diseases like Alternaria blight, anthracnose, and Phytophthora blight, along with underground part diseases such as Rhizoctonia seedling damping-off, Pythium seedling damping-off, and Sclerotinia white rot. In the 1980s, the sunshade was changed from traditional rice straw to polyethylene (PE) net. From 1987 to 1989, focused research aimed at enhancing disease control methods. Notably, the introduction of a four-layer woven P.E. light-shading net minimized rainwater leakage, curbing Alternaria blight occurrence. Since 1990, identification of the bacterial soft stem rot pathogen facilitated the establishment of a flower stem removal method to mitigate outbreaks. Concurrently, efforts were directed towards identifying root rot pathogens causing continuous crop failure, employing soil fumigation and filling methods for sustainable crop land use. In 2000, adapting to rapid climate changes became imperative, prompting modifications and supplements to control methods. New approaches were devised, including a crop protection agent method for Alternaria stem blight triggered by excessive rainfall during sprouting and a control method for gray mold disease. A comprehensive plan to enhance control methods for Rhizoctonia seedling damping-off and Rhizoctonia damping-off was also devised. Over the past 50 years, the initial emphasis was on understanding the causes and control of ginseng diseases, followed by refining established control methods. Drawing on these findings, future ginseng cultivation and disease control methods should be innovatively developed to proactively address evolving factors such as climate fluctuations, diminishing cultivation areas, escalating labor costs, and heightened consumer safety awareness.
One of the physiological disease, sudden wiliting of Yushin variety suggested that low sunlight, excessive nitrogen application, and highly reduced soil condions either singly or combined, might be possible causes of the disorder. Some visual symptom of sudden wilting are discoloration of leaves, development of nodal roots above the soil surface, total root rot, and lodging. Those observations led to the hypothesis that suffocation of root tissues was a direct cause of the wilting. The oxygen transport characteristics of Yushin, IR262 and Tongil were examined by two methods. First, Soil-cultured plants of the three varieties were subjected to paraffin treatment to decrease the oxygen supply from the air to root tissues through the soil-water system, liquid paraffin was applied to the water surface in the pots at panicle formation stage. In this experiment, sudden wilting was observed of Yushin and IR262 at about a week after the treatment, but Tongil remained green and healthy. Wilting-resistant variety Tongil had higher oxygen release, whereas the susceptible Yushin and IR262 had lower oxygen release. Second, the number and size of the air spaces in each internode were investigated in the 5th internode from the top, all three varieties have a similar number of air spaces, although the air spaces of Thongil were larger. In the 4th internode, Tongil had plenty air spaces, Yushin and one of the Yushin's parents IR262 had scanty or none. The observations indicated that the ability of Yushin and IR262 for oxygen transport is very limited compared with that of Tongil. The limited oxygen supply due to poor development of air space in internode of rice plants may cause suffocation of root tissues, weaken metabolic activity of the tissues, and induce root rot, subsequently inducing sudden wilting and lodging under unfavorable weather, soil and cultural conditions.
The objective of this study was to determine the effects of substrate water content and electrical conductivity (EC) on the incidence of brown fruit stem and blossom end rot in glasshouse sweet pepper (Capsicum annuum cv. Special). Three levels of water content and EC had been treated since the first fruit reached 3cm in diameter: that is, 49 (low), 65 (medium), and 86% (high) for water content, and 2.4 (low), 4.2 (medium) and $6.3dS{\cdot}m^{-1}$(high) for EC. Shoot growth was reduced with decreasing water content, and it was lower in both high and low EC treatments than medium EC treatment. Fruit weight at harvest was greater in both medium and hish water content treatments than low water content treatment (158g vs 146g). High EC reduced fruit weight compared to or low EC treatments. The incidence of brown fruit stem increased with increasing water content and with decreasing EC. The highest incidence was shown in the high water content/low EC treatment (38%), which was considerably higher than 2.4% of the low water content/high EC treatment. Blossom end rot occurred in general in the low water content and/or high EC conditions. These results indicated that substrate water content and EC should be controlled differently according to the growth stage, to reduce the incidence of blossom end rot and brown fruit stem in glasshouse sweet pepper. First, to reduce blossom end rot incidence, water content should be maintained high (86%) and EC low ($2.4dS{\cdot}m^{-1}$) until Sweets after fruit set. Secondly, to reduce brown fruit stem incidence, water content should be maintained low (49%) and EC high ($6.3dS{\cdot}m^{-1}$), especially after completion of fruit growth.
For the genetic multipurpose of antagonistic abilities of Pseudomom etutzeri YPL-1 aganist Fusarium solani causing root rot of many important crops by genetic engineering, optimal conditions for transformation of P-stutzeri YPL-1 by pKT230 were investigated. Maxium frequency of the transformation was achieved when cells were harvested at early exponential growth phase. The highest transformation efficiency was obtained when the competent cells were exposed to chilled transformation buffer containing 20 mM RbCI, 100 mM $CaCl_2$ and added l${\mu}g$/ml of plasmid DNA. The pH optimum for transformation was 6.5. When the bacterial cells that were incubated during 60 minutes for the competence were brought in contact with plasmid DNA, the transformations were obtained in the best frequency. It was formed that transformation frequency was 2 ~$6 \times 10^{-6}$ under the optimal conditions.
Croping pattern, fertilizer application, Soil chemical characteristics, plant nutritional condition and growth status were investigated in three major vinyl house farms near Yesan. Croping pattern changed from tomato to pumpkin due to tomato diseases such as wilting and blossom-end rot. Wilting seemed to be closely related with high EC, nitrogen and root cyst nematodes. Calcium deficiency seemed to be due to high potassium, EC in soil and high uptake of iron. Chinese cabbages in summer showed poor growth (80% inhibition) due to high EC(1.8mmho/cm) and easily got wenny root disease that might due to high phosphorus (1055ppm) in soil. Summer radish showed poor growth (50% inhibition) due to high EC(1.6mmho/cm), K and Mg resulting in base imbalance. Farmers used 5 kinds of compound fertilizer as basal application and one without P for top dressing. Urea and KCL were used for top dressing. Heavy application of livestock manure and chemical fertilizer for every crop made eutrophic even in subsoil.
- To investigate the possibility of genetic development for a multi-purpose strain of Bacillus subtilis YBL-7 against Fusat-iurn solani causing root rot of many impotant corps, the plasmid pGU66 inserting urease gene of Bacillus pasteurii had been introduced into Bacillus subtilis YBL-7 by PEG-induced protoplast (PIP) transformation system. Protoplasts of B. subtilis YBL-7 were prepared by treating the cells with lysozyme (200 $\mu g$/ml) in hypertonic buffer (SMMP). The highest transformation frequency was achieved when cells of the strain with lysozyme at $42^{\circ}C$ for 90 minutes. Optimal transformation was obtained using polyethylene glycol (MW 4000) at final concentration of 30% (V/V). The transformation frequency was increased proportionally to 1.2 $\mu g$ of plasmid DNA. At best condition, the transformation frequency (transformants/ regenerants/$\mu g$ of DNA) for pGU66 was appoximately $4 \times 10^{-3}$. Also, the urease gene was strongly expressed in the transformants of B. subtilis YBL-7 and maintained steadily. The antifungal ability of transformant was very similar to that of B. ssubtilis YBL-7.
Journal of the Korean Institute of Landscape Architecture
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v.28
no.4
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pp.9-20
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2000
The purpose of thus paper is to provide the knowledge on preparing for the planting soil and planting method, and maintenance at the reclaimed seaside. Based on the collected data from the field work, the soil environment, the growth of height, inter-node, tree ring and roots of the two species had been analyzed. The determinant of soil factors, affecting the growth of trees, turned out to be six elements such as soil hardness, soil acidity, potassium, calcium, magnesium and total nitrogen. Because the variances of both growth of tree height and tree ring are greater than that of root, the growth characteristics of ground parts of the species by the individual tree species is more dynamical than those of underground parts. From the mean difference test the growth of height, root between Pinus thunbergii and Zelkova serrata, have been turned out to be statistically significant at 5 percent level. Pinus thunbergii is a sapling, so it grows faster than Zelkova serrata while Pinus thunbergii has better roots system than Zelkova serrata. From the correlation analysis, it showed the very strong correlation between tree height growth and potassim, while the lowest correlation coefficient was between soil hardness and potassim as 0.744. From the multiple regression analysis, both soil hardness and magnesium affect to the tree growth, soil hardness and potassium to the tree growth, potassium and calcium to the rot growth, respectively. Using this research results, we can be use the planting plan including revegetation, construction and maintenance of the reclaimed seaside. In the future, the planting method including the ground preparation and tree species selection for the reclaimed seaside should be accompanied in advanced through the soil survey and relevant analysis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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