CCCTC-binding factor (CTCF), a zinc finger protein, is a transcription factor and regulator of chromatin structure. Forebrain excitatory neuron-specific CTCF deficiency contributes to inflammation via enhanced transcription of inflammation-related genes in the cortex and hippocampus. However, little is known about the long-term effect of CTCF deficiency on postnatal neurons, astrocytes, or microglia in the hippocampus of adult mice. To address this, we knocked out the Ctcf gene in forebrain glutamatergic neurons (Ctcf cKO) by crossing Ctcf-floxed mice with Camk2a-Cre mice and examined the hippocampi of 7.5-10-month-old male mice using immunofluorescence microscopy. We found obvious neuronal cell death and reactive gliosis in the hippocampal cornu ammonis (CA)1 in 7.5-10-month-old cKO mice. Prominent rod-shaped microglia that participate in immune surveillance were observed in the stratum pyramidale and radiatum layer, indicating a potential increase in inflammatory mediators released by hippocampal neurons. Although neuronal loss was not observed in CA3, and dentate gyrus (DG) CTCF depletion induced a significant increase in the number of microglia in the stratum oriens of CA3 and reactive microgliosis and astrogliosis in the molecular layer and hilus of the DG in 7.5-10-month-old cKO mice. These results suggest that long-term Ctcf deletion from forebrain excitatory neurons may contribute to reactive gliosis induced by neuronal damage and consequent neuronal loss in the hippocampal CA1, DG, and CA3 in sequence over 7 months of age.
Kim, Taewoo;Jeon, Jeha;Park, Jin-Sun;Park, Yeongwon;Kim, Jooeui;Noh, Haneul;Kim, Hee-Sun;Seo, Hyemyung
Biomolecules & Therapeutics
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v.29
no.5
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pp.483-491
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2021
Parkinson's disease (PD) is a neurodegenerative disorder that involves the loss of dopaminergic neurons in the substantia nigra (SN). Matrix metalloproteinases-8 (MMP-8), neutrophil collagenase, is a functional player in the progressive pathology of various inflammatory disorders. In this study, we administered an MMP-8 inhibitor (MMP-8i) in Leucine-rich repeat kinase 2 (LRRK2) G2019S transgenic mice, to determine the effects of MMP-8i on PD pathology. We observed a significant increase of ionized calcium-binding adapter molecule 1 (Iba1)-positive activated microglia in the striatum of LRRK2 G2019S mice compared to normal control mice, indicating enhanced neuro-inflammatory responses. The increased number of Iba1-positive activated microglia in LRRK2 G2019S PD mice was down-regulated by systemic administration of MMP-8i. Interestingly, this LRRK2 G2019S PD mice showed significantly reduced size of cell body area of tyrosine hydroxylase (TH) positive neurons in SN region and MMP-8i significantly recovered cellular atrophy shown in PD model indicating distinct neuro-protective effects of MMP-8i. Furthermore, MMP-8i administration markedly improved behavioral abnormalities of motor balancing coordination in rota-rod test in LRRK2 G2019S mice. These data suggest that MMP-8i attenuates the pathological symptoms of PD through anti-inflammatory processes.
Jegadeesh Raman;Young-Joon Ko;Jeong-Seon Kim;Da-Hye Kim;Soo-Jin Kim
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.34
no.3
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pp.710-724
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2024
Flavobacterium can synthesize xanthophyll, particularly the pigment zeaxanthin, which has significant economic value in nutrition and pharmaceuticals. Recently, the use of carotenoid biosynthesis by bacteria and yeast fermentation technology has shown to be very efficient and offers significant advantages in large-scale production, cost-effectiveness, and safety. In the present study, JSWR-1 strain capable of producing xanthophyll pigment was isolated from a freshwater reservoir in Wanju-gun, Republic of Korea. Based on the morphological, physiological, and molecular characteristics, JSWR-1 classified as belonging to the Flavobacterium species. The bacterium is strictly aerobic, Gram-negative, rod-shaped, and psychrophilic. The completed genome sequence of the strain Flavobacterium sp. JSWR-1 is predicted to be a single circular 3,425,829-bp chromosome with a G+C content of 35.2% and 2,941 protein-coding genes. The optimization of carotenoid production was achieved by small-scale cultivation, resulting in zeaxanthin being identified as the predominant carotenoid pigment. The enhancement of zeaxanthin biosynthesis by applying different light-irradiation, variations in pH and temperature, and adding carbon and nitrogen supplies to the growth medium. A significant increase in intracellular zeaxanthin concentrations was also recorded during fed-batch fermentation achieving a maximum of 16.69 ± 0.71 mg/l, corresponding to a product yield of 4.05 ± 0.15 mg zeaxanthin per gram cell dry weight. Batch and fed-batch culture extracts exhibit significant antioxidant activity. The results demonstrated that the JSWR-1 strain can potentially serve as a source for zeaxanthin biosynthesis.
Objective : In 1960's Bonghan Kim's team found BongHan(BH) ducts which were presumed as acupuncture meridians and BH corpuscles. They asserted Bonghan theory and SanAl theory which was involved in cell division and cell restoration. However, many other experiments which had been operated to demonstrate and find the existence of BH ducts had failed because of the secret of blue stain drugs. During the last several years, BongHan theory has been revived through experimental researches to find the anatomical structures of BH ducts and corpuscles by Soh's Biomedical Physics Lab. Soh's research team used the staining with Janus Green B, Alcian blue, nanoparticles and Acridine Orange. We used DAPI staining to find the existence of BH ducts and the corpuscles and to observe nuclear arrangement. Methods : We used japan white rabbits as experimental animals. BH ducts and corpuscles were stained with DAPI. The nucleus configuration in BH ducts stained with DAPI were observed with microscope. Results : In this study, we found thread like structures in silver white color distinguished from the blood vessels, nerves and lymph vessels. These thread like vessels in the linear duct shape were connected to same colored mass in the ball shape. Thread like structures we found could be separated easily from the surrounding other organ mass. The nuclei of the thread like structure in DAPI staining, are about 10${\sim}$20${\mu}m$ length, in rod shape and linear arrangement. Conclusion : We concluded that the thread like structure we found was same vessel reported by Soh's research team, BongHan ducts and corpuscle.
Park, Kyoung-Joo;Cho, Kyoung-Sook;Kim, Jeong-Bo;Lee, Min-Gyu;Lee, Byung-Hun;Hong, Young-Ki;Kim, Joong-Kyun
Environmental Engineering Research
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v.10
no.5
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pp.213-226
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2005
To treat wastewater efficiently by a one-step process of nitrogen removal, a new bacterial strain producing $N_2$ gas from ${NH_4}^+$ under an aerobic condition was isolated and identified. The cell was motile and a Gram-negative rod, and usually occurred in pairs. By 16S-rDNA analysis, the isolated strain was identified as Enterobacter asburiae with 96% similarity. The isolate showed that the capacity of $N_2$ production under an oxic condition was approximately three times higher than that under an anoxic condition. Thus, the consumption of ${NH_4}^+$ by the isolate was significantly different in the metabolism of $N_2$ production under the two different environmental conditions. The optimal conditions of the immobilized isolate for $N_2$ production were found to be pH 7.0, $30^{\circ}C$ and C/N ratio 5, respectively. Under all the optimum reaction conditions, $N_2$ production by the immobilized isolate resulted in reduction of ORP with both the consumption of DO and the drop of pH. The removal efficiencies of $COD_{Cr}$, and TN were 56.1 and 60.9%, respectively. The removal rates of $COD_{Cr}$, and TN were the highest for the first 2.5 hrs with the removal $COD_{Cr}/TN$ ratios of 32.1, and afterwards the rates decreased as reaction proceeded. For application of the immobilized isolate to a practical process of ammonium removal, a continuous operation was executed with a synthetic medium of a low C/N ratio. The continuous bioreactor system exhibited a satisfactory performance at 12.1 hrs of HRT, in which the effluent concentrations of ${NH_4}^+$-N was measured to be 15.4 mg/L with its removal efficiency of 56.0%. The maximum removal rate of ${NH_4}^+$-N reached 1.6 mg ${NH_4}^+$-N/L/hr at 12.1 hrs of HRT(with N loading rate of $0.08\;Kg-N/m^3$-carrier/d). As a result, the application of the immobilized isolate appears a viable alternative to the nitrification-denitrification processes.
ZnO thin films are of considerable interest because they can be customized by various coating technologies to have high electrical conductivity and high visible light transmittance. Therefore, ZnO thin films can be applied to various optoelectronic device applications such as transparent conducting thin films, solar cells and displays. In this study, ZnO rod and thin films are fabricated using aqueous chemical bath deposition (CBD), which is a low-cost method at low temperatures, and environmentally friendly. To investigate the structural, electrical and optical properties of ZnO for the presence of citrate ion, which can significantly affect crystal form of ZnO, various amounts of the citrate ion are added to the aqueous CBD ZnO reaction bath. As a result, ZnO crystals show a nanorod form without citrate, but a continuous thin film when citrate is above a certain concentration. In addition, as the citrate concentration increases, the electrical conductivity of the ZnO thin films increases, and is almost unchanged above a certain citrate concentration. Cu(In,Ga)Se2 (CIGS) solar cell substrates are used to evaluate whether aqueous CBD ZnO thin films can be applicable to real devices. The performance of aqueous CBD ZnO thin films shows performance similar to that of a sputter-deposited ZnO:Al thin film as top transparent electrodes of CIGS solar cells.
Proceedings of the Korean Society of Embryo Transfer Conference
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2002.11a
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pp.95-95
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2002
Human embryonic stem (hES) cells can be induced to differentiate into tyrosine hydroxylase expressing (TH+) cells that may serve as an alternative for cell replacement therapy for Parkinson's disease (PD). To examine in vitro differentiation of hES (MB03, registered in NIH) cells into TH+ cells, hES cells were induced to differentiate according to the 4-/4+ protocol using retinoic acid (RA), ascorbic acid (AA), and/or lithium chloride (LiCl) followed by culture in N2 medium for 14 days, during which time the differentiation occurs. Immunocytochemical stainings of the cells revealed that approximately 21.1% of cells treated with RA plus AA expressed TH protein that is higher than the ratio of TH+ cells seen in any other treatment groups (RA, RA+LiCl or RA+AA+LiCl). In order to see the differentiation pattern in vivo and the ability of in vitro differentiation-induced cells in easing symptomatic motor function of PD animal model, cells (2 $\times$ 10$^{5}$ cells/2${mu}ell$) undergone 4-/4+ protocol using RA plus AA without any further treatment were transplanted into unilateral striatum of MPTP-lesioned PD animal model (C57BL/6). Following the surgery, motor behavior of the animals was examined by measuring the retention time on an accelerating rotar-rod far next 10 weeks. No significant differences in retention time of the animals were noticed until 2 weeks post-graft; however, it increased markedly at 6 weeks and 10 weeks time point after the surgery. Immunohistochemical studies confirmed that a reasonable number of TH+ cells were found at the graft site as well as other remote sites, showing the migrating nature of embryonic stem cells. These results suggest that in viかo differentiated hES cells relieve symptomatic motor behavior of PD animal model and should be considered as a promising alternative for the treatment of PD.
Aromatic hydrocarbons which are not easily degraded by microorganisms can be accumulated in the conlaminated environment for a long lime, producing toxic effects on wild lives and humans. However, the sublethal concentrations of the chemicals induce the synthesis of stress-shock proteins in the cells and increase the adaptability of the organisms to the environmental stresses. In this study, therefore, the cells of Psezido~nonus sp. DJ- 12 treated with catechol at various concentrations were inveshgated for their survival, biodegtadability of catechol, production of stress-shock proteins, and cytological changes. The organisms were capable of degrading catechol at the range of 0.5 to 1.0 mM concentration wilhin 6 hours incubation, but they were killed by $10^2$-10$^3$ celllinl at 3 mM or higel- concentration without any catechol degradation. These cells treated with catechol begm lo produce DnaK and GroEL at 1 mM and 0.5 mM. respectively. Pseudumonas sp. DJ-12 treated with 10 mM catechol for I hour exhihiled some punctuated pores on the cell wall and contortion of the rod shape. The cells treated with he sublethal concentration of catechol showed the increased tolerance for suvival when exposed to the lethal concentration, and such tolerant effects were functioned crossly among benzoate, 4-chlorobenzoate, 'and catechol.
To improve biopolymer productivity and properties of Bacillus strains, protoplast fusion was performed between biopolymer producing Bacillus subtilis K-1 and lactose utilizing Bacillus coagulans. The results were as follows; Protoplasts mixed in fusion fluid containing 33% PEG 6000, 1% PVP and 10 mM $CaCl_2$ were reacted for 5 min at $37^{\circ}C$ and then centrifused protoplasts were directly overlaid on the selective media containing $100\;{\mu}g/ml$ antibiotics and incubated for 3 days. At this conditions, the frequency of protoplast fusion was generally in the range of $4.6{\times}10^{-5}\;to\;1.8{\times}10^{-7}$ in ratio. Segregation ratio was observed between 1 to 6% indicating genetic stability of all the fusants. Fusants growth were also observed on the media contained amino acid and antibiotics as required marked materials. DNA contents of the selected fusants were 1.6 to 2.7 times more than that of parent strains. With observation by TEM microscopy, spherical protoplasts were first released from the swollen parental cells and then contracted to fuse in the process of fusion. And fused cells were observed representative vesicle. Originally, the parental cells were observed as in the morphology of thick-walled and double membrane-surrounded rod shape with TEM microscopy.
A bacterium which has high enzymatic activities such as amylase, cellulase and protease was isolated from Korean traditional soybean food, doenjang. The isolated bacterium was identified to Bacillus subtilis HS25 by the test of morphological and biochemical properties according to Bergey's Manual of Systematic Bacteriology and API 50 CHL kit, and by the 16S rDNA sequence. The isolated B. subtilis HS25 had a potent antibacterial activity against food born causative or pathogenic bacteria. B. subtilis HS25 is endospore forming cell and contained flagella and abundant viscous material at the out layer of cell wall. It was rod type bacterium $(0.5{\sim}0.8{\times}3{\sim}5{\mu}m)$ having biochemical characteristics such as gram staining(+), catalase(+), oxidase(-) and hydrolysis of esculin(+). The optimal medium compositions for production of antibacterial substance in the B. subtilis HS25 were 1% of soluble starch, 0.5% of yeast extract, 0.5% of peptone and 0.05% of MgCl$_2{\cdot}6H_{2}O$. The optimum temperature and pH of the growth of the B. subtilis HS25 was 35$^{\circ}C$ and pH 7.5, respectively. The antibacterial activity was more high in neutral to a little alkaline pH (6.5-10.5) than in acidic pH. The optimal shaking speed to grow and to produce antibacterial substance of the B. subtilis HS25 was 160${\sim}$200 rpm. The optimal culture time for antibacterial activities of the bacterium were shown to be in the range of 12-36 hr.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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