The internal transcribed spacer (ITS) regions including the 3'-end of 18S rRNA gene, 5.8S rRNA gene and the 5'-end of the 28S rRNA gene of Rhizopus spp. were amplified by PCR and analyzed by DNASIS program. Length polymorphism of these region ranged from 564 bp in R. oryzae to 789bp in R. stolonifer. The length and sequence of 5.8S was very conserved with $154{\sim}155\;bp$. The sequence of ITS2 was more variable than that of ITS1. The base substitution rates were ranged from 0 to 0.6069 per site, and higher rate was found in R. stolonifer. In general, transition was usually more frequent than transversion. On the basis of sequencing results, four groups were clustered with value of 61.9% similarity; R. oryzae, R. micros pores, R. homothallicus, and R. stolonifer groups.
The fungal morphologies and pellet sizes were controlled in acetophenone reduction by Rhizopus oryzae. The acetophenone conversion and (S)-phenylethanol enantiomeric excesses (e.e.) reached the peak after 72 h of incubation when using pellets with 0.54 mm diameter, which showed an excellent performance compared with suspended mycelia, clumps, and pellets with 0.65 or 0.75 mm diameter. Furthermore, nano-sized acetophenone was used as a substrate to improve the performances of biotransformation work. The results showed that the conversion of nanometric acetophenone and (S)-phenylethanol e.e. reached the maximum (both >99%) after 32 h of incubation when using 0.54 mm diameter pellets, at least 24 h in advance of the control group. On the other hand, Tween 80 and 1, 2-propylene glycol showed low or no toxicity to cells. In conclusion, pellets and acetophenone nanoemulsions synergistically result in superior performances of acetophenone reduction.
Huang, Li-Ping;Bo Jin;Paul Lant;Xianliang Qiao;Jingwen Chen;Wence Sun
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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제9권4호
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pp.245-251
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2004
The fungal species of Rhizopus oryzae 2062 has the capacity to carry out a single stage fermentation process for lactic acid production from potato starch wastewater. Starch hydrolysis, reducing sugar accumulation, biomass formation, and lactic acid production were affected with variations in pH, temperature, and starch source and concentration. A growth condition with starch concentration approximately 20 g/ L at pH 6.0 and 30$^{\circ}C$ was favourable for starch fermentation, resulting in a lactic acid yield of 78.3%∼85.5% associated with 1.5∼2.0 g/L fungal biomass produced in 36 h of fermentation.
한국전통누룩의 규격화 및 품질향상을 위한 일환으로 액화효소 및 당화효소, 산, 향기성분 등의 생성능이 우수한 누룩 곰팡이 10균주를 선별한 후, 약간의 효소학적 특성과 각 균주의 동정을 실시하였다. 액화력의 경우 Aspergillus sp. 및 Rhizopus sp.균주는 배양시간에 상관없이 양호하였으나, Penicillium sp.균주는 생밀기울 배지에서 30일간 배양시 액화력이 급격히 감소하였다. 또한 당화력의 경우 Rhizopus sp.을 제외한 대부분의 균주가 배양시간이 경과할수록 효소활성이 감소하는 경향을 보였으나, Aspergillus sp. 17-2, 17-6균주 및 Rhizopus sp. 18-1 균주는 배양시간이 경과할수록 높은 효소활성을 보였다. 이들 균주가 생산하는 액화효소의 반응 안정온도 범위는 20~6$0^{\circ}C$정도였으며, 반응 안정pH 범위는 3~11정도로 비교적 광범위하였으나 Penicillium sp.의 두 균주와 Rhizopus sp.균주는 산성 영역에서 낮은 활성을 나타내었다. 또한, 당화효소의 반응 최적온도는 Penicillium sp. 7-1균주가 45$^{\circ}C$, Rhizopus sp. 18-1균주가 4$0^{\circ}C$, 그 외 8균주는 5$0^{\circ}C$였으며, 반응 최적pH는 모두 5로 나타났다. Glucoamylase의 활성을 지표로 한 각 선별균주의 생전분 분해력은 전체적으로 낮은 결과를 보였다. 한편, 선별균주 가운데 효소, 향기성분, 산 생성능이 양호한 5균주 (3-6, 12-1, 17-6, 7-7, 18-1)의 동정결과, Aspergillus sp. 3-6 및 Aspergillus sp. 17-6 균주는 Aspergillus oryzae NR3-6 및 Aspergiltus oryzae NR17-6으로, Aspergillus sp. 12-1균주는 Aspergillus penicilloides NR12-1로, Penicillium sp. 7-7 균주는 Penicillium expanum NR7-7로, Rhizopus sp. 18-1균주는 Rhizopus oryzae NR18-1로 동정되었다. 종간과속간의 혼합배양을 실시하여 간이누룩의 효소 생성능을 측정한 결과, 단일배양의 경우보다 혼합배양이 우수하였다. 이와 같은 결과들을 바탕으로 다양한 혼합균주를 사용함으로써 고품질의 전통주류 생산이 가능하다고 사료된다.
Rhizopus oryzae KSD-815 was isolated from nuruk that has been used to make Korean traditional wines. This study was performed to investigate the effect of cultures of R. oryzae KSD-815 on cardiovascular disorders and cancer metastasis. Firstly, these cultures were sequentially fractionationed with n-hexane (TAHe), ethylacetate (TAE), n-butanol (TAB), and $H_2O$ (TAW). The TAE inhibited the activity of angiotensin-converting enzyme (ACE) and TAB suppressed platelet aggregation in vitro. TAE and TAB inhibited cell motility of human breast cancer cells. Furthermore, TAW interrupted the formation of neovasculature and tube-like structure, and down-regulated the expression of angiogenic factors, basic fibroblast growth factor (bFGF), tumor necrosis factor-$\alpha$ (TNF-$\alpha$), and hypoxia-inducible factor-$1{\alpha}$ (HIF-$1{\alpha}$) in breast cancer cells. These results indicated that cultures of R. oryzae KSD-815 display the inhibitory activities on hypertension, platelet aggregation, and metastasis, and suggest that these cultures might be further probed for the purposes as therapeutic agents or dietary supplements.
거미줄곰팡이인 R. oryzae N174를 이용한 액체종국 배양기술을 개발하기 위해, 밀기울 농도별(0, 5, 10, 15 및 20%)로 액체종국을 제조하여 이들의 품질 특성을 조사하였다. 배지에 밀기울 첨가량이 많을수록 균사체량이 많아졌을 뿐 아니라 산도, 아미노산도가 증가하는 특성을 보였다. 또한, 밀기울을 5% 첨가한 군에서 ${\alpha}$-amylase와 glucoamylase의 활성도가 높았으며 acidic protease의 경우에는 15% 밀기울 첨가 배지에서 활성도가 높았다. 배양시간 별(0, 24, 48, 72 및 96 hrs) 효소 활성은 48~72시간에 효소활성이 가장 높은 것으로 나타났다. R. oryzae N174 액체종국 최적조건은 5~15% 밀기울 배지에서 48~72시간 배양이 최적조건이었다. 이를 토대로 밀기울 액체종국을 제조하여 저장온도와 저장 기간을 달리하여 저장한 후, 밀누룩 제조시 종국으로서 적합한지를 구명하고자 하였다. 제조된 밀누룩의 효소 활성뿐만 아니라 pH, 산도 및 환원당 함량을 비교 분석한 결과, 저장온도와 상관없이 하루 정도 저장한 액체종국을 사용하여 만든 밀누룩에서 높은 수치를 보였다. 저장조건에 따른 형태학적 변화를 살펴본 결과, 저장된 액체종국에서 균사체의 생육과 포자의 생성유무에 따라 밀누룩의 효소 활성에 영향을 미칠 것이라는 예상과는 달리 각 효소의 활성과 균사체의 생장, 포자의 생성과는 큰 차이가 보이지 않았다.
The study aimed to evaluate the probiotic properties, antioxidant activity and fermentative capacity of Acremonium charticola and Rhizopus oryzae isolated from the Indonesian fermented dried cassava, with particular application on poultry. A. charticola inhibited the growth of Escherichia coli and Aspergillus flavus. A. charticola and R. oryzae grew in potato dextrose agar (PDA) adjusted to pH 3 and 8 or in PDA supplemented with bile salt up to 0.8%. After soaking for 8 hr, the survival rate of A. charticola in the simulated gastric juice (pH 2) and bile solutions (2% bile salt) was lower than that of R. oryzae. A. charticola and R. oryzae exhibited strong antioxidant activities. Compared to unfermented cassava pulp (control), the fibre content of cassava pulp tended to be lower after fermentation with A. charticola for 14 days. The populations of A. charticola and R. oryzae were significantly higher in fermented cassava pulp than in unfermented one. Coliform was higher in cassava pulp fermented with R. oryzae or A. charticola + R. oryzae compared to control after 7 days of fermentation, however, the bacteria were not different between A. charticola-fermented cassava pulp and control. Lactic acid bacteria (LAB) were higher in A. charticola- and R. oryzae-fermented cassava pulp than those in control, however, no difference of LAB was observed between A. charticola + R. oryzae-fermented cassava pulp and control. In conclusion, A. charticola exhibited antibacterial, antifungal and antioxidant activity, gastrointestinal persistence and fermentative capacity that may be beneficial for poultry industry.
본 연구에서는 시판누룩에서 분리한 Rhizopus oryzae CCS01로 쌀누룩을 제조하고 이를 이용하여 쌀-밀 막걸리 제조하였다. 쌀누룩은 시판누룩보다 ${\alpha}$-amylase 활성은 약 1.8-2.4배 정도 높게 나타났다. 쌀과 밀의 비율이 4:6일 때 알코올 생성량은 12.4% 있었으며, 전체적인 기호도면에서 가장 우수하였다. 시판누룩(산성, 진주 및 송학)으로 제조한 쌀-밀 막걸리의 pH는 발효가 진행됨에 따라 감소하였으나, 쌀누룩으로 제조한 쌀-밀 막걸리의 pH는 증가하였다. 한편 산도 및 당도, 알코올 함량은 발효가 진행됨에 따라 증가하였다. 특히 발효 종기 알코올 함량은 쌀누룩으로 제조한 쌀-밀 막걸리가 12.0%로 시판 누룩으로 제조한 막걸리보다 높게 나타났다.
토양등으로부터 생전분 분해효소 생산능이 있는 409주의 곰팡이와 62주의 세균 및 2주의 방선균을 분리하고 이들 중에서 7-BU 균주를 선정하여 동정하고 밀기울을 기본배지로 한 효소 생산조건 및 생전분을 이용한 알코올 발효 실험 등을 실시하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 생전분 분해효소 생산능이 강하다고 인정된 7-BU 균주는 Rhizopus oryzae로 동정되었다 2. 7-BU 균주의 효소생산 최적온도는 3$0^{\circ}C$이고 pH는 4.0이었으며 배양 72시간 후에 최고의 역가를 보였고 밀기울 배지에 옥수수전분을 0.5% 첨가하였을 때 효소생산이 더욱 촉진되었다. 3. 조효소액에 의한 각종 생전분의 가수분해율은 반응 4일에 쌀전분 89.2%, 옥수수전분 85%, 고구마전분 82%, 감자전분 36%이었고 쌀가루는 86%, 옥수수가루 81%. 고구마가루 79%, 감자가루 30%이었다. 4. 옥수수가루, 쌀가루, 고구마가루와 감자가루를 원료로 하여 조효소액과 효모를 첨가한 후 알코올 발효 실험을 한 결과 담금 4일 후 쌀가루구 9.4%, 옥수수가루구 9.0%, 고구마가루구 8. 1%, 감자가루구 5.4%의 에탄을 생성을 보였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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