• 식물병연구
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• 제20권4호
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• pp.270-274
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• 2014

본 연구의 목적은 신갈나무에서 참나무시들음병 병원균인 Raffaelea quercus-mongolicae의 지역별 균주와 기타 Raffaelea 속 근연종의 병원성을 평가하는 것이다. 이 연구에서는 신갈나무에 다양한 균주를 접종한 후, 변재부 내 변색정도로 각 균주의 병원성을 판단하였다. 그 결과 변색부의 평균 측면 확산 정도는 국내에서 분리한 Raffaelea quercus-mongolicae 병원균(8.69 cm)이 일본 병원균(7.51 cm)이나 기타 Raffaelea 속 근연종(3.35 cm)의 평균보다 높았고, 국내 지역별 Raffaelea quercusmongolicae 균주간에는 변색부 측면 확산정도가 4.71-14.90 cm로 병원성의 차이를 보였다. 균주간의 변색부 면적 확산정도는 $1.57-8.42cm^2$로 서로 다른 병원성의 차이를 보였으며, 가장 높은 병원성은 강원도에서 분리한 YY와 전라북도에서 분리한 wj43에서 나타났다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제40권1호
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• pp.66-69
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• 2012

Raffaelea quercus-mongolicae에 대한 항균작용을 하는 미생물을 분리하기 위하여 200개의 균주를 분리하였으며 이 중 SG 1-9, 1-12와 SG 2-8, 2-10, 2-17 5개의 균주에서 항균활성을 확인하였다. 5개의 균주는 확인을 위하여 16S rDNA 염기서열 분석을 하였으며, SG 1-9는 Streptomyces cinnamoneus와 98%의 homology가 SG 1-12는 Burkholderia cepacia와 98% homology가 같은 것으로 나타났다. 또한 SG 2-8은 Streptomyces fradiae와 99%의 homology를 SG 2-10은 Staphylococcus epidermidis와 97%를 SG 2-17은 Staphylococcus epidermidis와 99%의 homology를 나타내었다. 위 5개의 균주 중 활성이 가장 강한 SG 2-17의 유기용매추출물과 단백질추출물을 분리하여 활성을 조사하였으며 유기용매추출물에서 강한 활성을 확인하였다. 3개의 유기용매 중 benzene 추출물이 가장 높은 Raffaelea quercus-mongolicae의 균사성장을 억제하였다.

• Mycobiology
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• 제42권2호
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• pp.210-214
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• 2014

In Korea, mass mortality of Quercus mongolica trees has become obvious since 2004. Raffaelea quercus-mongolicae is believed to be a causal fungus contributing the mortality. To evaluate the pathogenicity of the fungus to the trees, the fungus was multiple- and single-inoculated to the seedlings and twigs of the mature trees, respectively. In both the inoculations, the fungus was reisolated from more than 50% of inoculated twigs and seedlings. In the single inoculations, proportions of the transverse area of non-conductive sapwood at inoculation points and vertical lengths of discoloration expanded from the points were significantly different between the inoculation treatment and the control. In the multiple inoculations, no mortality was confirmed among the seedlings examined. These results showed that R. quercus-mongolicae can colonize sapwood, contribute to sapwood discoloration and disrupt sap flows around inoculation sites of Q. mongolica, although the pathogenicity of the fungus was not proven.

• 식물병연구
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• 제16권3호
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• pp.219-223
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• 2010

최근 신갈나무를 중심으로한 참나무과 나무에 시들음병 피해가 증가하고 있다. 한국과 일본에서 분리한 38개의 시들음병 균주(Raffaelea quercus-mongolicae, R. quercivora)에 대해 $\beta$-tubulin 유전자 염기서열 분석과 RAPD 분석을 이용해 유전적 특성을 조사하였다. $\beta$-tubulin 유전자 염기서열을 이용한 cluster 분석결과 시들음병 균주들은 4개의 그룹으로 나뉘었으며, cluster 2와 4에는 1균주를 제외하고 모두 일본균주가 속해 있었다. RAPD 분석결과 시들음병 균주들은 3개의 그룹으로 나뉘었으며, 한국균주와 일본균주는 쉽게 구별되었다. $\beta$-tubulin 유전자 염기서열 분석과 RAPD 분석결과 한국균주와 일본균주는 상당히 다른 유전적 특성을 가지고 있었다.

• 식물병연구
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• 제20권4호
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• pp.295-298
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• 2014

참나무 시들음병(병원균 Raffaelea quercus-mongolicae)은 2004년 국내에 처음 발견되어 그 피해가 증가하고 있는 추세이다. 이번 연구에서는 참나무 시들음병 방제를 위한 나무주사용 살균제를 선발하기 위해 실내시험과 포장시험을 실시하였다. 실내검정에서는 10종의 살균제와 1종의 항생제를 이용하여 국내균주 R. quercus-mongolicae와 일본균주 R. quercivora에 대한 생육억제효과를 조사하였다. 국내균주에 대해서는 chlorothalonil, benomyl, propiconazole 순으로 생육억제효과가 높게 나타났으며, 일본균주에 대해서는 propiconazole, benomyl, bitertanol 순으로 나타났다. 국내균주와 일본균주에 대하여 실내 항균효과가 우수하였던 약제 중 침투이행성이 우수한 propiconazole을 이용하여 약제방제 포장시험을 실시하였다. 그 결과 나무주사 처리 당해 연도 방제효과는 87.5%, 처리 다음 연도 방제효과는 66.7%까지 나타나 약제처리 효과는 적어도 1년 이상이었다.

• Mycobiology
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• 제48권6호
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• pp.484-494
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• 2020

Oak wilt disease caused by Raffaelea quercus-mongolicae has emerged obviously in Korea. We selected antifungal isolates against R. quercus-mongolicae among 368 endophytic fungal isolates from different parts of oak and pine trees. The experiment was conducted in the primary and secondary screenings by dual culture test. The antifungal activity of the selected isolates was assessed in culture filtrate test based on the inhibition rates in mycelial growth, sporulation, and spore germination of oak wilt fungus. Five isolates, E089, E199, E282, E409 and E415, showed strong antifungal activity in culture filtrate test, and their antifungal activity decreased on the culture media supplemented with heated culture filtrate. Higher mycelial growth inhibitions on the unheated media were recorded in E409 (Colletotrichum acutatum), E089 (Daldinia childiae), E415 (Alternaria alternata) and E199 (Daldinia childiae) with the inhibition rates of 79.0%, 70.1%, 68.9% and 64.5%, respectively. These isolates also had the higher sporulation inhibitions on unheated media with the rates of 96.8%, 84.2%, 82.8% and 80.5%, respectively. The spore germination of the oak wilt fungus was completely inhibited by E282 (Nectria balsamea) on both unheated and heated media. These results showed that a higher number of potent antifungal isolates against oak wilt fungus was isolated from the petiole compared to the other parts. This study could contribute to the development of biological control approaches for the management of oak wilt disease caused by R. quercus-mongolicae.

• 한국균학회지
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• 제38권1호
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• pp.62-68
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• 2010

국내 참나무시들음병 병원균인 Raffaelea quercus-mongolicae에 대한 버섯 균주들의 길항 특성을 대치배양을 통해 조사하였다. 총 158개의 시험 균주 중 33개의 균주는 병원균에 대해 단기간 (6~7일) 및 장기간(27~31일) 길항력이 전혀 없었으며, 96개의 균주는 길항력이 미약하거나 길항력이 장기적으로 지속되지 못했다. 이와 달리 29개의 균주는 단기간 및 장기간 길항력이 각각 $\geq$ R+와 $\geq$ R로 타 시험 균주에 비해 높게 나타났으며, 이들과 같이 R. quercus-mongolicae에 대해 길항력을 갖는 균주들은 활엽수(참나무류 포함)나 침엽수 등 발생 기주가 서로 다른 다양한 서식지에서 살아가는 버섯 균종들의 균주임을 알 수 있었다. 참나무시들음병 피해목을 버섯 재배용 자원으로 활용하기 위해 이에 적합한 7개의 길항 균주를 다음과 같이 선발하였다; 붉은덕다리버섯(KFRI 914), 치마버섯(KFRI 832), 구름버섯(KFRI 100), 덕다리버섯(KFRI 654), 간버섯(KFRI 588), 표고(KFRI 269, 764).

• Journal of Forest and Environmental Science
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• 제33권4호
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• pp.342-347
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• 2017

Since the first report of the oak wilt disease at 2004 in Korea, the disease distributed over Korean peninsula and are still giving severe damages. The management of oak wilt disease in Korea has mainly focused on the control of insect vector, Platypus koryoensis. Neverthless the effective method for evaluating the pathogenicity of the pathogen, Raffaelea quercus-mongolicae (Rqm), and for screening chemical or biological agents with strong inhibitory activity against the pathogen, is absolutely necessary, an reliable method is not available so far. This study was conducted to develop the effective method for evaluating the pathogenicity of Rqm in oak trees. The culture suspensions of Rqm were artificially injected to the saplings of Quercus acutissima by using ChemJet tree injector. Three months after treatments, the treated saplings were cut and dipped into 1% fuchsin acid solution. There were significant differences in non-conductive area (%), discoloration area (%) and vertical discoloration length between the pathogen-injected and distilled water-injected control treatments. These results indicated that the pathogen is the causal agent for the dysfunction of water conductive tissue, which will finally result in wilt symptom. Re-isolation of the pathogen and PCR detection using specific primers for the pathogen also confirmed the presence of Rqm in the sapwood chips of the pathogen-injected saplings. These observations would be greatly applied to other related researches for evaluating the pathogenicity of tree wilt pathogens and biocontrol efficacy of the selected antagonistic microorganisms, in case that the wilt symptom is not easily shown by artificial inoculation of the causal agent.

• 한국균학회지
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• 제40권4호
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• pp.288-291
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• 2012

한국에서 발병하는 참나무시들음병은 암브로시아 곤충인 Platypus koryoensis.에 의해 전반되는 Raffaelea quercus-mongolicae 균류에 의해 발생한다. 이 병의 전파를 방지하기 위해 참나무시들음병 감염목을 벌채 후 비닐막을 씌워 훈증하고 벌채장소에 3년 이상 방치시키고 있다. 본 연구는 이런 훈증처리된 감염목에 존재하는 균류에 대한 정보를 얻고자 수행하였다. 천안 태조산 지역 두 곳에서 훈증처리된 감염목을 채집하고 진균을 분리하여 99개 균주를 얻었다. 분리 균주를 형태적 특성과 translation elongation factor 1-alpha 유전자와 ITS rDNA region 염기서열에 의거한 분자적 방법으로 동정한 결과 Hypocrea, Trichoderma, Penicillium 속에 속하는 종들이 확인되었다. 이중 Trichoderma 속에 속하는 종이 주요 균류이었다. 조사결과 병원균인 R. quercus-mongolicae와 매개충인 P. koryoensis는 검출되지 않았다. 본 연구결과는 훈증 처리한 참나무시들음병 감염목이 3년 이상 되면 더 이상의 피해를 유발할 위험요소가 없다는 과학적 증거를 제시한다.

• Journal of Forest and Environmental Science
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• 제34권5호
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• pp.376-381
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• 2018

For the control of oak wilt caused by Raffaelea quercus-mongolicae, an antifungal microorganism, Streptomyces blastmyceticus, was used as a potential agent. Culture suspension of S. blastmyceticus was injected into Quercus mongolicae in the research forest of Kangwon National University by $ChemJet^{(R)}$ trunk injection and Macro-infusion at root flare injection. $Alamo^{(R)}$ (a.i., propiconazole 14.5%), a fungicide currently used for the control of oak wilt in USA, was also treated by both methods to compare the efficacy. For preventive efficacy, culture suspension of the pathogen was inoculated at 1 month after injection of either agent. Tested trees were cut at 3 months after treatment, stained with 1% Fuchsin acid, and then non-conductive area (NCA) and re-isolation frequency (RIF) of oak wilt fungus were compared among treatments. While NCA was the highest as 47.3% in pathogen only treatment, it was the lowest as 16.0% in sterilized water treatment by Macro-infusion. NCAs of Alamo treatment by Macro-infusion and ChemJet injection were 25.3% and 32.1%, respectively. NCA of S.blastmyceticus treatment by ChemJet injection was 32.3%, similar with Alamo treatment's by ChemJet injection. All treatments by either injection method showed significantly lower NCA compared to the pathogen only treatment. These results indicate that S. blastmyceticus injection shows the preventive efficacy against oak wilt disease by suppressing the growth of pathogen injected. NCA of Macro-infusion injection of sterilized water was lower as 16.0%, compared to 21.3% of ChemJet injection. It means that Macro-infusion is more effective in translocation of sterilized water than ChemJet injection by even distribution. RIF from wood discs of treated trees showed high in pathogen only treatment, but relatively low in S. blastmyceticus treatment. RIF results were correlated with NCA results. From the above results, it was confirmed that S. blastmyceticus showed preventive efficacy against oak wilt disease by ChemJet trunk or Macro-infusion at root flare injection.