• 제목/요약/키워드: RP HPLC

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국내 사용 농약을 대상으로 한 HPLC 방법에 의한 옥탄올/물 분배계수 추정법의 적용성 검토 (Applicability of the HPLC Method for the Estimation of Octanol/water Partition Coefficient to Pesticides of Domestic Use)

  • 김균;권진욱;김용화
    • Environmental Analysis Health and Toxicology
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    • 제16권4호
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    • pp.189-196
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    • 2001
  • Octanol/water partition coefficients of 52 chemicals were calculated using RP-HPLC estimation method and predicted by computer program, PCHEM. The result showed relationship between literature values and RP-HPLC observed values (relative coefficient r$^2$=0.916), but the relationship of PCHEM values with literature values was lower than RP-HPLC value (relative coefficient r$^2$=0.795). The average difference in partition coefficient between the RP-HPLC method and flask-shaking method was log Kow=0.54, while the average difference between the values predicted form the computer program and flask- shaking method was log Kow = 0.36 Compared to octanol/water partition coefficients by 3 methods (Flask-shaking, RP-HPLC, computer prediction), the octanol/water partition coefficient values based on the flask-shaking method were very similar to the literature values, while the octanol/water partition coefficient values by RP-HPLC method without to consider the dead time, and computer prediction values did not significantly differ with the literature values.

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RP-HPLC법에 의한 무우의 매운 성분인 4-methylthio-3-butenyl isothiocyanate의 분리 및 정제 (Purification of 4-Methylthio-3-butenyl isothiocyanate the Pungent Principle in Radish Roots by RP-HPLC)

  • 김미리;이혜수
    • 한국식품조리과학회지
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    • 제2권2호
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    • pp.16-20
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    • 1986
  • 무우 속의 매운 맛 성분을 용매추출법 ($CCl_4$,사용)으로 분리하여 RP-HPLC법에 의해 정제한 후에 관능검사에 의해 pungency test를 하고, UV spectrum분석, GC/MC 분석을 수행한 결과 4-methylthio-3-butenyl isothiocyanate 임을 확인하였다. RP-HPLC에서 mobile Phase로 70% acetonitrile을 사용하였는데, 정제된 4-methylthio-3-butenyl isothiocfanate는 단일 peak로 분리되어 나왔고 이때의 retention time은 5.2분이였다. 아울러 RP-TLC에서 Rf치는 0.9이었다.

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이온교환 카트리지와 RP-HPLC를 이용한 난백 단백질의 확인 (Identification of Proteins in Egg White Using Ion Exchange Cartridge and RP-HPLC)

  • 김현문;김아름;이창수;김인호
    • Korean Chemical Engineering Research
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    • 제50권4호
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    • pp.713-717
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    • 2012
  • 난백에 있는 40여 가지의 단백질의 기능적 특성에 대한 연구가 폭 넓게 진행되고 있지만, 그 특성이 모두 확인되지 않았다. 난백에서 순수하면서 변성되지 않은 단백질을 분리하는 방법을 연구하기 위해 본 연구에서는 난백 중 함량이 많은 lysozyme, ovotransferrin, ovalbumin을 분리했다. 난백에서 단백질을 다른 분리 방법보다 선택적으로 분리가 가능한 이온 교환 크로마토그래피를 이용했다. 그리고 분리된 단백질을 동정하기 위해서 Reversed-phase HPLC (RP-HPLC)를 사용했다. 이온 교환 크로마토그래피에서 HI Trap ion exchange cartridge (GE Healthcare, USA)를 사용했고, 그 중에서 양이온 교환 수지 SP (완충용액 pH 8.0, pH 5.2)와 음이온 교환 수지 Q (완충용액 pH 8.0)로 난백 단백질을 분리하였다. 분리한 난백 단백질들의 동정용 RP-HPLC에서는 C18 컬럼(Phenomenex, USA)을 사용했고 등용매 용리에서 이동상으로 acetonitrile (ACN)/distilled water (DW)/trifluoroacetic acid (TFA)의 부피비를 50/50/0.1로 사용했다. 이온 교환 크로마토그래피에 의해 각 단계에서 분리된 용출용액을 RP-HPLC으로 분석한 크로마토그램과 표준시료의 크로마토그램의 체류시간을 비교하여 난백에 포함된 ovotransferrin, ovalbumin, lysozyme이 순차적으로 용출됨을 알았다.

RP-HPLC를 이용한 혈액에 포함된 펩타이드의 분리 (Isolation of Peptides from Human Blood by RP-HPLC)

  • 노경호;이승기
    • KSBB Journal
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    • 제17권3호
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    • pp.261-265
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    • 2002
  • 생리활성을 가지는 펩타이드에 관한 연구는 각종 질환의 진단, 예방 및 치료약으로서의 응용 가능성이 매우 높아서 현재 많은 연구가 진행 중이다. 펩타이드를 RP-HPLC에 의해 정량, 정성분석 함으로 다양한 연구 분야로의 확대를 모색해 볼 수 있다. 혈액 속에 있는 적혈구내의 펩타이드를 분리하기 위해 0.75% TFA가 포함된 물과 아세토나이트릴을 이동상과 선형적 구배용매 조성을 이용한 실험결과, 펩타이드의 peak 분리도는 상당히 우수하였다. 혈액을 채취한 날짜의 경과에 따라서 새로운 생리활성 물질이 만들어짐을 확인할 수 있었다. 이와 같은 현상은 적혈구내의 세포들이 산소를 계속적으로 소비함으로써 산소 부족현상 때문에 발생하는 것으로 알려져 있고 구조적 변화를 나타내는 생리활성 펩타이드를 정성적으로 확인함으로써 좀더 의학적인 분야로의 연구를 수 행할 수 있게 될 것이다.

RP-HPLC에서 Buffer와 메탄올의 조성에 의한 Mononucleotides 체류인자의 조절 (Modification of Retention Factor of Mononucleotides by Compositions of Buffers and Methanol in RP-HPLC)

  • 강덕희;이주원;노경호
    • KSBB Journal
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    • 제15권5호
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    • pp.452-457
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    • 2000
  • Buffer의 특성에 맞는 체류인자에 관한 모텔식을 얻기 위 해서는 buffer 9} 양이온의 농도에 관한 관련식을 실험으로 결 정해야 한다 또한 model 식에서 비이온과 음이온의 체류인 자를 나타내는 ko와 k의 값이 일정한 경향을 나타내고 있기 때문에 buffer의 농도와 modifier의 농도를 동시에 고려한 model 식이 가능하게 된다. 본 연구에서 제안한 모델식을 이용하여 임의의 buffer의 농도에 따른 시료의 체류시간을 예측할 수 있다. 이러한 모텔식을 이용하여 buffer를 이 용한 RP-HPLC의 분석 및 분리조건을 예측할 수 있고 시행 오차적인 방법보다 빠른 시간 내에 최적의 분석 및 분리조건 을 얻을 수 있다

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달걀 단백질 분석을 위한 HPLC 연구 (HPLC Study for Egg White Analysis)

  • 전영주;이은;김인호
    • KSBB Journal
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    • 제22권2호
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    • pp.119-122
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    • 2007
  • RP-HPLC에서 주요 변수인 이동상의 조성과 컬럼의 종류를 변화시켜 난백 단백질을 실험하였다. C4, C8 C18 컬럼을 비교 실험하여 C18 컬럼에서 가장 많은 피크를 보여 C18 컬럼을 선택하였다. 등용매 용리에서 ACN : water의 조성이 50 : 50에서 가장 많은 피크를 보여 이 결과를 토대로 기울기 용리를 하여 실험하였다. 기울기 용리에서 얻어진 4가지 피크를 확인하기 위하여 단일성분인 lysozyme와 ovalbumin의 체류시간을 측정하여 확인하였고 논문을 통해 2가지 피크를 예측할 수 있었다.

Evaluation of Haemagglutinin Content by RP-HPLC to Generate Pandemic Influenza Vaccine

  • Kang, Hyunkyung;Roh, Hang Sik;Song, Hyemin;Lee, Kwangmoon;Chung, Seung-Tae;Ban, Sang-ja;Mo, In Pil;An, Beum-Soo;Ahn, Chi-Young
    • Toxicological Research
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    • 제32권4호
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    • pp.269-274
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    • 2016
  • The potency of influenza vaccine is determined based on its hemagglutinin (HA) content. In general, single radial immunodiffusion (SRID) assay has been utilized as the standard method to measure HA content. However, preparation of reagents for SRID such as antigen and antibody takes approximately 2~3 months, which causes delays in the development of influenza vaccine. Therefore, quantification of HA content by other alternative methods is required. In this study, we measured HA contents of H1N1 antigen and H1N1 influenza vaccine by reverse phase-high performance liquid chromatography (RP-HPLC) methods. The presence of HA1 and HA2 was investigated by silver staining and Western blot assay. In addition, accuracy and repeatability of HA measurement by RP-HPLC were evaluated. Comparison of HA concentration by SRID and RP-HPLC revealed a precise correlation between the two methods. Our results suggest that RP-HPLC assay can replace SRID in the event of a pandemic flu outbreak for rapid vaccine development.

RP-HPLC법에 의한 무우의 4-methylthio-3-butenyl isothiocyanate의 정량 (Quantitative Determination of 4-methylthio-3-butenyl isothiocyanate in Radish Root by RP-HPLC)

  • 김미리;이혜수
    • 한국식품과학회지
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    • 제18권6호
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    • pp.475-478
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    • 1986
  • RP-HPLC방법에 의해 무우 속에 존재하는 MTBI의 함량을 정량적으로 측정 해 본 결과 10n moles/ml와 120 nmoles/ml사이에서 좋은 직선적인 상관관계(r=0.9997)를 나타내었으며, 편리하고 정확(오차 5%내외)하며 재현성(recovery 99%)이 높았다. 또, MTBI는 알카리용액 중에서는 서서히 분해되었으나 산성용액 중에서는 매우 빠르게 분해되었으며, 이 결과는 231nm에서 UV흡광도가 서서히 감소하는 결과와도 일치하였다. 한편, MTBI는 유기용매(65% acetenitrile)에서 비교적 안정하였다. 또한. 한국산 생무우 중에 함유된 MTBI는 최적추출조건을 PH8.5에서 1분내에 분석하였을때 $210\sim420{\mu}moles/100g$ 정도이었다.

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Quantitative Speciation of Selenium in Human Blood Serum and Urine with AE- RP- and AF-HPLC-ICP/MS

  • Jeong, Ji-Sun;Lee, Jonghae;Pak, Yong-Nam
    • Bulletin of the Korean Chemical Society
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    • 제34권12호
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    • pp.3817-3824
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    • 2013
  • Various separation modes in HPLC, such as anion exchange (AE), reversed-phase (RP), and affinity (AF) chromatography were examined for the separation of selenium species in human blood serum and urine. While RP- and AE-HPLC were mainly used for the separation of small molecular selenium species, double column AF-HPLC achieved the separation of selenoproteins in blood serum efficiently. Further, the effluent of AF-HPLC was enzymatically hydrolyzed and then analyzed with RP HPLC for selenoamino acid study. The versatility of the hybrid technique makes the in-depth study of selenium species possible. For quantification, post column isotope dilution (ID) with $^{78}Se$ spike was performed. ORC ICP/MS (octapole reaction cell inductively coupled plasma/mass spectrometry) was used with 4 mL $min^{-1}$ Hydrogen as reaction gas. In urine sample, inorganic selenium and SeCys were identified. In blood serum, selenoproteins GPx, SelP and SeAlb were detected and quantified. The concentration for GPx, SelP and SeAlb was $22.8{\pm}3.4\;ng\;g^{-1}$, $45.2{\pm}1.7\;ng\;g^{-1}$, and $16.1{\pm}2.2\;ng\;g^{-1}$, respectively when $^{80}Se/^{78}Se$ was used. The sum of these selenoproteins ($84.1{\pm}4.4\;ng\;g^{-1}$) agrees well with the total selenium concentration measured with the ID method of $87.0{\pm}3.0\;ng\;g^{-1}$. Enzymatic hydrolysis of each selenium proteins revealed that SeCys is the major amino acid for all three proteins and SeMet is contained in SeAlb only.

RP-HPLC를 이용한 감초에서 liquiritin, glycyrrhizic acid, glabridin의 분리 (Separation of liquiritin, glycyrrhizic acid and glabridin from licorice by RP-HPLC)

  • 전명래;염홍원;노경호
    • 분석과학
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    • 제21권2호
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    • pp.102-108
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    • 2008
  • 역상고성능액상크로마토그래피(RP-HPLC)를사용하여감초에포함된 liquiritin (LQ), glycyrrhizic acid (GA)과 glabridin을 분석하였다. 이동상의 조성에 대한 실험을 수행한 실험결과에 의하면, 최적화된 이동상은 메탄올-물 이성분계이다. 이동상의 유량은 1 mL/min으로 일정하였고, 초기 8분동안에 35/65 (MeOH/water, v/v%)에서 80/20으로 구배용매조성법을 적용하였고, 그 이후에는 80/20으로 유지하였다. LQ과 GA의 농도는 0.2 mg/mL에서 1.0 mg/mL까지, glabridin의 농도는 0.01 mg/mL에서 0.2 mg/mL의 범위에서 선형성을 보였고, 상대 표준편차는 0.90%(n=5) 보다 낮았다. 개발된 방법을 사용하여 감초에 포함된위의세가지성분의정량분석을성공적으로수행하였다. 평균수율은 LQ가 80.79%, GA가 89.71%, glabridin이 72.50%이었다.