• Journal of Veterinary Science
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• 제24권3호
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• pp.37.1-37.14
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• 2023

Background: Toll-like receptor (TLR) agonists have been used as adjuvants to modulate immune responses in both animals and humans. Objectives: The objective of this study was to evaluate the combined effects of the TLR 4 agonist monophosphoryl lipid A (MPL) and the TLR 3 agonist polyinosinic:polycytidylic acid (Poly I:C) on equine peripheral blood mononuclear cells (PBMCs), monocyte-derived dendritic cells (MoDCs), and bone marrow-derived mesenchymal stromal cells (BM-MSCs). Methods: The PBMCs, MoDCs, and BM-MSCs collected from three mixed breed horses were treated with MPL, Poly I:C, and their combination. The mRNA expression of interferon gamma (IFN-γ), interleukin (IL)-1β, IL-4, IL-6, IL-8, IL-12p40, tumor necrosis factor alpha (TNF-α), vascular endothelial growth factor (VEGF), and monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) was determined using real-time polymerase chain reaction. Results: The combination of MPL and Poly I:C significantly upregulated immunomodulatory responses in equine cells/ without cytotoxicity. The combination induced greater mRNA expression of pro-inflammatory cytokines IFN-γ and IL-6 than MPL or Poly I:C stimulation alone in PBMCs. In addition, the combination induced significantly higher mRNA expression of IL-1β, IL-6, and IL-12p40 in MoDCs, and IL-8, MCP-1, and VEGF in BM-MSCs compared to stimulation with a single TLR agonist. Conclusions: The combination of MPL and Poly I:C can be used as a potential adjuvant candidate for vaccines to aid in preventing infectious diseases in horses.

• 대한한방종양학회지
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• 제5권1호
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• pp.137-150
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• 1999

Macrophage play a major role in host defence against infection and tumor development and this activity is regulated through the production of several mediators. In particular, the production of NO by macrophages mediates killing or growth inhibition of tumor cells, bacteria, fungi and parasites. However, over-expression of iNOS by various stimuli, resulting in over-production of NO, contributes to the pathogenesis of septic shock and some inflammator and auto-immune disease. Therefore, it would be valuable to develop potent and selective inhibitors of for potential therapeutic use. Thus the agent that supprees the expression of iNOS mRNA or enzyme protein will be usefull for the prevention of various diseases. We are intersted in identifying selective inhibitiors of iNOS which might be useful intreating inflammatory human diseases. In summary, we have demenstrated that scopoletin, isolated from Seman Armenicae and Radix Trichosanthis the production of NO induced by $IFN-\gammer$ plus LPS in RAW 264.7 macrophages, The mechanism for the inhibition of NO production was due to suppression of the expression of iNOS mRNA or enzyme protein.

• 대한의생명과학회지
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• 제16권4호
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• pp.359-363
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• 2010

The miniature pig is a very suitable donor species in xenotransplantation of human organs. Intestine ischemia/reperfusion (I/R) is associated with high morbidity and mortality. Endoplasmic reticulum (ER) stress and apoptosis has been associated with the onset of diverse diseases. Thus, we examined the effect of intestine I/R on the expression of ER stress and apotptosis related molecules. In the present study, I/R induced phosphorylation of protein kinase-like endoplasmic reticulum kinase (PERK), IRE, and ATF-4. I/R also increased the expression of the proapoptotic transcription factor CAAT/enhancer-binding protein homologous protein (CHOP). In addition, I/R decreased the expression of Bcl-2, but increased the expression of Bax, cleaved PARP, and cleaved caspase-3. Moreover, I/R increased splicing form of XBP-1 mRNA and the expression of caspase-6 and caspase-3 mRNA. In conclusion, intestine I/R induced ER stress and apoptosis in miniature pig.

• Applied Biological Chemistry
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• 제12권
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• pp.107-114
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• 1969

생장조절제(生長調節劑) GA. IAA, Kinetin, Uracil 및 MH로 Nicotiana Tobaccum var. Virginica를 처리(處理)하여 황변현상(黃變現象)을 관찰(觀察)하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1) 엽연초엽황변시(葉煙草葉黃變時) Chlorophyll 감소(減少)에 따라 Protein 및 RNA의 감소(減少)도 병행(倂行)하였다. 2) GA, IAA, 를 처리(處理)한 엽(葉)은 Protein 과 RNA 의 감소(減少)가 억제(抑制)되고 MA로 처리(處理)된 엽(葉)은 오히려 무처리엽(無處理葉)봐 그들 성분(成分)의 감소(減少)가 심(甚)하였다. 3) 연초엽황변시(煙草葉黃變時) Chlorophyll a/b 비율(比率)의 변동(變動)과 protein 및 RAN 함량(含量)의 변동(變動)과는 아무런 상관관계(相關關係)가 없는것 같았다.

• 한국양식학회지
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• 제19권3호
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• pp.157-165
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• 2006

우리나라 주요 담수 어종인 미꾸라지를 ecotoxicogenomic 연구 모델 어류로 개발하기 위한 연구의 일환으로 본 어종이 고온 스트레스 자극에 노출되었을때 야기되는 산화성 스트레스를 검출하고자 항산화 효소(antioxidant enzyme; AOE) 유전자의 발현 양상을 분석하였다. 주요 항산화 효소인 superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), glutathione-S-transferase (GST) 및 glutathione peroxidases (GPXs)의 transcript들을 특이적으로 정량화할 수 있는 semi-quantitative RT-PCR, real-time PCR 또는 northern blot분석을 통해 $23^{\circ}C$에서 $32^{\circ}C$까지 설정된 실험어의 간 조직내 AOE유전자들의 mRNA level을 분석하였다. 고온에 노출되었을 때 본 어종의 AOE들은 일반적으로 증가된 유전자 발현 양상을 나타내었고, 특히 SOD (2배)와 plasma GPX (3배) 유전자가 가장 유의적인 mRNA 증가를 나타내었다. GST의 경우 상대적으로 적은 증가량을 나타내었고 CAT의 경우 고온자극에 반응하지 않았다. 본 어종은 $29^{\circ}C$ 이상에서 AOE 유전자의 발현 증가를 나타내었고 $32^{\circ}C$에 노출되었을 때 1일째부터 SOD와 plasma GPX mRNA의 증가가 관찰되었다.

• 생명과학회지
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• 제28권6호
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• pp.733-737
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• 2018

박과 작물에 함유되어 있는 tetracyclic triterpene 성분 중 하나인 쿠쿠르비타신(cucurbitacin)-I는 대장암, 유방암, 간암세포에서의 항종양 활성이 밝혀져 있으나 난소암에서의 쿠쿠르비타신-I의 역할은 보고된 바 없다. CD44는 세포막에 존재하는 당단백질로 생체 내 리간드인 glycosaminoglycan hyaluronic acid를 통해 세포 외부 매트릭스와 다른 세포와의 접촉을 매개한다. 최근 연구에 의해 CD44의 발현이 난소암세포의 증식 및 세포 부착과 침윤을 증가시키는 주요 원인이라는 것이 보고되었다. 이러한 결과는 CD44의 발현을 억제함으로써 난소암의 진행을 조절할 수 있음을 시사하고 있다. 본 연구에서는 쿠쿠르비타신-I가 난소암세포의 CD44의 발현을 억제할 수 있는 지의 여부를 조사하였다. 인간의 난소암 세포인 SKOV-3를 이용한 MTS assay를 수행한 결과, 쿠쿠르비타신-I는 100 nM이상의 농도에서 세포독성을 나타내었다. 세포독성을 나타내지 않는 농도의 쿠쿠르비타신-I를 SKOV-3 세포에 처리하여 Western blot 분석과 qRT-PCR을 수행한 결과, 쿠쿠르비타신-I에 의해 CD44의 단백질과 mRNA의 발현이 유의적으로 감소되는 것을 확인하였다. 또한 쿠쿠르비타신-I에 의한 CD44의 발현 억제가 $NF-{\kappa}B$와 AP-1의 인산화 감소에 기인하고 있음을 밝혔다. 이러한 결과는 쿠쿠르비타신-I가 CD44 발현을 억제하는 기능을 가지며, 이는 난소암 치료에 도움을 줄 수 있는 제재로서 쿠쿠르비타신-I의 가능성을 제시하는 것이다.

• 식물병연구
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• 제17권2호
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• pp.211-215
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• 2011

모자이크증상을 나타내는 열무로부터 Cucumber mosaic virus의 한 계통을 분리하고 특성을 조사하였다. Vigna unguiculata, Chenopodium amaranticolor and Gomphrena globosa에서 분리 바이러스의 기주반응과 dsRNA 분석, RT-PCR 검정, PCR-RFLP, 혈청학적 분석을 통하여 CMV의 한 계통임을 확인하였다. 이 CMV 계통을 다양한 지표식물에 접종하였을 때, Nicotiana benthamiana와 N. glutinosa, N. tabacum, 고추, 오이 그리고 멜론에서는 전형적인 강한 모자이크 병징이 나타났으나, 열무, 배추, 적갓은 매우 약한 병징을 나타내는 특징을 보였다. 새롭게 분리된 CMV 계통은 가지과, 박과 및 배추과 등 광범위한 작물에 감염성을 나타내었으며, 배추과에서의 감염성 차이를 근거로 Gn-CMV로 명명하였다. Double-stranded (ds) RNA를 분리한 분석에서 Gn-CMV는 기 보고된 CMV 계통과 마찬가지로 3.3, 3.0, 그리고 2.2 kb의 독립된 게놈으로 구성되어 있었으며, SDS-PAGE와 Western blotting 분석으로 통하여 28 kDa의 외피단백질을 확인할 수 있었다. RT-PCR로 얻어진 증폭산물을 Cac8I, ClaI and MspI을 이용한 PCR-RFLP를 통하여 CMV subgroup I 임을 확인할 수 있었다.

• 한국식품위생안전성학회지
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• 제35권6호
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• pp.535-543
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• 2020

유전적 조절, 유전자 발현 그리고 환경적 단서, 화학적 신호에 대응하는 표현형 변이에서 세포 RNA는 ubiquitous 역할 이외에도 세포 외 RNA(exRNA)라 하는 새로운 형태의 RNA는 추후 연구의 방향을 제시한다. exRNA는 membrane vesicles 또는 세포 외 소포체(EV)로 알려진 membrane blebs를 통해 세포 외부로 운반된다. EV의 형성은 원핵생물, 진핵생물, 고세균을 포함한 모든 미생물군에 우세하게 보존되어있다. 본 리뷰는 세균 유래 exRNA에 관해 세가지 주제에 초점을 두었다. exRNA의 발견과 박테리아 유전자 배열에 대한 외부 RNA의 영향, b. exRNA의 분비기작을 통한 방출, c. 다른 그람음성 및 그람양성균에 의해 분비되는 exRNA로 고안될 수 있는 응용 가능분야이다. 본 리뷰에서 장내 미생물군의 probiotics 및 후성유전학적 규제에서 본 exRNA와 exRNA마커와 같은 EV파생 응용프로그램에 대한 의견을 제공할 것이다.

• Reproductive and Developmental Biology
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• 제36권4호
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• pp.237-241
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• 2012

Embryonic genome activation (EGA) is the first major transition that occurs after fertilization, and entails a dramatic reprogramming of gene expression that is essential for continued development. Although it has been suggested that EGA in porcine embryos starts at the four-cell stage, recent evidence indicates that EGA may commence even earlier; however, the molecular details of EGA remain incompletely understood. The RNA polymerase II of eukaryotes transcribes mRNAs and most small nuclear RNAs. The largest subunit of RNA polymerase II can become phosphorylated in the C-terminal domain. The unphosphorylated form of the RNA polymerase II largest subunit C-terminal domain (IIa) plays a role in initiation of transcription, and the phosphorylated form (IIo) is required for transcriptional elongation and mRNA splicing. In the present study, we explored the nuclear translocation, nuclear localization, and phosphorylation dynamics of the RNA polymerase II C-terminal domain in immature pig oocytes, mature oocytes, two-, four-, and eight-cell embryos, and the morula and blastocyst. To this end, we used antibodies specific for the IIa and IIo forms of RNA polymerase II to stain the proteins. Unphosphorylated RNA polymerase II stained strongly in the nuclei of germinal vesicle oocytes, whereas the phosphorylated form of the enzyme was confined to the chromatin of prophase I oocytes. After fertilization, both unphosphorylated and phosphorylated RNA polymerase II began to accumulate in the nuclei of early stage one-cell embryos, and this pattern was maintained through to the blastocyst stage. The results suggest that both porcine oocytes and early embryos are transcriptionally competent, and that transcription of embryonic genes during the first three cell cycles parallels expression of phosphorylated RNA polymerase II.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제31권3호
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• pp.211-215
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• 2003

고함량 RMh 효모인 Saccharomyces cerevisiae MTY62를 당밀과 com steep liquor를 공급하는 유가배양에서, 세포농도는 45g-DCW/L 이하, RNA 함량은 140mg/g-cell 로 얻어졌다. 이는 균체증식과 RMh축적에 당밀 내에 존재하는 저해물질 때문으로 생각되어 이를 제거하기 위해 다양한 당밀 전처리제의 효과를 조사하였다. 당밀로부터 금속이온 제거 효과는 Na2HPO4와 EDTA를 혼합 처리했을 때 $Ca^{++}$ 는 90% 이상 $Cu^{++}$ 는 약 80% 제거하는 결과를 나타내었고, Na2HPO4와 EDTA, IonClear BigBead 등의 3가지를 혼합 처리했을 때는 $Ca^{++}$ , $Cu^{++}$ 둘 다 90% 이상 제거되는 결과를 나타내었다. Na2HPO4+EDTA처리 당밀의 경우세포내 invertase활성을 크게 증가시켰다. 전처리 당밀로 회분배양한 결과, 세포농도는 18.6g-DCW/L, RNA농도는 3127mg/l, 최대비증식속도($\mu_{max}$ )는 0.459 $h^{-1}$ , 환원당 비소모속도(g-sugar/g-cell$.$h)는 1.28로,대조구에 비해 각각 10%, 17%, 47%, 36%로 증가한 값을 보였다.