Deer antler velvet is widely used in traditional medicine for its anti-aging, antioxidant, and immunity-enhancing effects. However, few studies have reported on the discovery of probiotic strains for deer antler fermentation to increase functional ingredient absorption. This study evaluated the ability of probiotic lactic acid bacteria to enhance the concentrations of bioactive molecules (e.g., sialic acid and gamma-aminobutyric acid [GABA]) in extracts of deer antler velvet. Seventeen strains of Lactobacillus spp. that were isolated from kimchi and infant feces, including L. sakei, L. rhamnosus, L. brevis, and L. plantarum, and those that improved the life span of Caenorhabditis elegans were selected for evaluation. Of the 17 strains, 2 (L. rhamnosus LFR20-004 and L. sakei LFR20-007) were selected based on data showing that these strains increased both the sialic acid and GABA contents of deer antler extract after fermentation for 2 d and significantly improved the life span of C. elegans. Co-fermentation with both strains further increased the concentrations of sialic acid, GABA, and metabolites such as short-chain fatty acids and amino acids. We evaluated the biological effects of the fermented antler velvet (FAV) on the antibacterial immune response in C. elegans by assessing worm survival after pathogen infection. The survival of the C. elegans conditioned with FAV for 24h was significantly higher compared with that of the control worm group fed only normal feed (non-pathogenic E. coli OP50) exposed to E. coli O157:H7, Salmonella typhi, and Listeria monocytogenes. To evaluate the protective effects of FAV on immune response, cyclophosphamide (Cy), an immune-suppressing agent was treated to in vitro and in vivo. We found that FAV significantly restored viability of mice splenocytes and immune promoting-related cytokines (interleukin [IL]-6, IL-10, inducible nitric oxide synthase [iNOS], interferon [IFN]-γ, and tumor necrosis factor [TNF]-α) were activated compared to non-fermented deer antlers. This finding indicated the protective effect of FAV against Cy-induced cell death and immunosuppressed mice. Taken together, our study suggests that immune-promoting antler velvet can be produced through fermentation using L. rhamnosus LFR20-004 and L. sakei LFR20-007.
Objective: This experiment aimed to explore the protective action of dietary supplementation with isoquinoline alkaloids (IA) from Macleaya cordata on lipopolysaccharide (LPS)-induced liver injury in broilers. Methods: Total 216 healthy broilers were selected in a 21-d trial and assigned randomly to the following 3 treatments: control (CON) group, LPS group, and LPS+IA group. The CON and LPS groups were provided with a basal diet, whereas the LPS+IA group received the basal diet supplemented with 0.6 mg/kg Macleaya cordata IA. Broilers in LPS and LPS+IA groups were intraperitoneally injected with LPS (1 mg/kg body weight) at 17, 19, and 21 days of age, while those in CON group were injected with equivalent amount of saline solution. Results: Results showed LPS injection caused systemic and liver inflammation in broilers, inhibited immune function, and ultimately lead to liver injury. By contrast, supplementation of IA ameliorated LPS-induced adverse change in serum parameters, boosted immunity in LPS+IA group. Furthermore, IA suppressed the elevation of hepatic inflammatory cytokines and caspases levels induced by LPS, as well as the expressions of genes related to the toll-like receptor 4 (TLR4)/myeloid differentiation primary response 88 (MyD88)/nuclear factor-kappa B (NF-κB) pathway. Conclusion: Dietary inclusion of 0.6 mg/kg Macleaya cordata IA could enhance immune function of body and inhibit liver damage via inactivating TLR4/MyD88/NF-κB signaling pathway in broilers.
IL-10 is an important anti-inflammatory cytokine that can inhibit the production of many pro-inflammatory cytokines. Both human and animal studies have shown that pro-inflammatory cytokines play an important role in pneumonia and other inflammatory lung diseases. In the present study, IL-10 knockout(KO) and wild-type mice were infected with Corynebacterium kutscheri to determine whether the severity of pathogenesis and whether protective immunity could be altered in the absence of IL-10. The survival rate was significantly lower in IL-10 KO mice than wild-type mice. The number of neutrophils in bronchoalveolar lavage fluid and blood were found to be higher in IL-10 KO mice than wild-type mice. IL-10 KO mice showed greater neutrophil infiltration, excessive inflammation, and weight-loss compared with wild-type mice. Furthermore, upregulation of IFN-$\gamma$ in bronchoalveolar lavage fluid, and upregulation of MIP-$1{\alpha}$ and IP-10 mRNA in the lungs of IL-10 KO mice compared with wild-type mice after C. kutscheri infection were observed. These results suggest that IL-10 plays an important role in the anti-inflammatory properties against C. kutscheri infection, and that lack of IL-10 leads to a more severe pulmonary inflammatory response. This increased susceptibility to C. kutscheri pneumonia is at least in part caused by IL-10 deficiency and severe recruitment of neutrophils.
The swine leukocyte antigen class II molecules are possibly associated with the induction of protective immunity. The study described here was to investigate the relationship between polymorphisms in exon 2 of the swine DQA gene and piglet diarrhea. This study was carried out on 425 suckling piglets from three purebred pig strains (Large White, Landrace and Duroc). The genetic diversity of exon 2 in swine DQA was detected by PCR-SSCP and sequencing analysis, eight unique SSCP patterns (AB, BB, BC, CC, CD, BD, BE and DD) representing five specific allele (A to E) sequences were detected. Sequence analysis revealed 21 nucleotide variable sites and resulting in 12 amino acid substitutions in the populations. A moderate level polymorphism and significant deviations from Hardy-Weinberg equilibrium of the genotypes distribution were observed in the populations (p<0.01). The association analysis indicated that there was a statistically significant difference in the score of piglet diarrhea between different genotypes, individuals with genotype CC showed a lower diarrhea score than genotypes AB ($0.98{\pm}0.09$), BB ($0.85{\pm}0.77$) and BC ($1.25{\pm}0.23$) (p<0.05), and significantly low than genotype BE ($1.19{\pm}0.19$) (p<0.01), CC genotype may be a most resistance genotype for piglet diarrhea.
Hop, Huynh Tan;Reyes, Alisha Wehdnesday Bernardo;Simborio, Hannah Leah Tadeja;Arayan, Lauren Togonon;Min, Won Gi;Lee, Hu Jang;Lee, Jin Ju;Chang, Hong Hee;Kim, Suk
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.26
no.1
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pp.190-196
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2016
In this study, the Brucella abortus ohr gene coding for an organic hydroperoxide resistance protein (Ohr) was cloned into a maltose fusion protein expression system (pMAL), inserted into Escherichia coli, and purified, and its immunogenicity was evaluated by western blot analysis using Brucella-positive mouse sera. The purified recombinant Ohr (rOhr) was treated with adjuvant and injected intraperitoneally into BALB/c mice. A protective immune response analysis revealed that rOhr induced a significant increase in both the IgG1 and IgG2a titers, and IgG2a reached a higher level than IgG1 after the second and third immunizations. Additionally, immunization with rOhr induced high production of IFN-γ as well as proinflammatory cytokines such as TNF, MCP-1, IL-12p70, and IL-6, but a lesser amount of IL-10, suggesting that rOhr predominantly elicited a cell-mediated immune response. In addition, immunization with rOhr caused a significantly higher degree of protection against a virulent B. abortus infection compared with a positive control group consisting of mice immunized with maltose-binding protein. These findings showed that B. abortus rOhr was able to induce both humoral and cell-mediated immunity in mice, which suggested that this recombinant protein could be a potential vaccine candidate for animal brucellosis.
Park, Sang-Tae;Kim, Kyoung-Eun;Na, Kwang-Min;Kim, Young-Hwa;Kim, Tae-Yoon
BMB Reports
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v.40
no.4
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pp.486-493
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2007
Atopic dermatitis (AD) is a chronic inflammatory skin disease and the pathogenesis of AD is associated with the release of various cytokines/chemokines due to activated $Th_2$ immune responses. Synthetic oligodeoxynucleotides (ODNs) containing unmethylated CpG dinucleotide in the context of particular base sequence (CpG motifs) are known to have the immunostimulatory activities in mice and to convert from Th2 to Th1 immune responses in AD. We aimed to investigate that CpG ODN, especially phosphodiester form, can stimulate the protective immunity in NC/Nga mice with AD. We isolated BMDCs from NC/Nga mice and then, cultured with GM-CSF and IL-4 for 6 days, and treated for 2 days by either phosphorothioate ODN or phosphodiester ODN. CpG ODN-treated DCs resulted in more production of IL-12. When CpG ODN-treated DCs were intravenously injected into the NC/Nga mice, the NC/Nga mice with CpG ODN-treated DCs showed significant improvement of AD symptoms and decrease of IgE level. Histopathologically, the NC/Nga mice skin with CpG ODN-treated DCs showed the decreased IL-4 and TARC expression comparing with non-injected mice. These results may suggest that phosphodiester CpG ODN-treated DCs might function as a potent adjuvant for AD in a mouse model.
Female BALB/c mice weighing 18~20g were immunized by three injections of $1{\times}10^6$ Naegleria iowleri trophozoites intraperitoneally at the interval of one week 6 times for the pregnant mice and 3 times for the offspring mice. One week after immunization the mice were challenged intranasally with N. fcwleri trophozoites $5{\times}10^4$ under secobarbital anesthesia. Experimental primary amoebic meningoencephalitis developed between day 7 and 16 after infection. All mice were dead due to amoebic meningoencephalitis in all experimental groups except in the offspring born to non-immune mothers. Mean of survival time, which is the duration of survival of mice from infection to death, was delayed in the groups of mice born to immune mothers, immune mice born to immune mothers. Active or passive protective immunity against N. fowleri infection was demonstrated in the ismunized mice and mice born to immune mothers. But the effectiveness of immunization was greatly impaired in terms of mortality in the immune mice born to immune mothers when N. fowulsri was infected intranasally.
Jo, Mi-Yeong;Son, Sang-Gyu;Kim, Lee-Cheong;Kim, Jin-U;O, Myeong-Ju;Jeong, Seong-Ju;Park, Su-Il
Journal of fish pathology
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v.16
no.3
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pp.175-181
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2003
VSNC is a viral disease causing significant economic losses in cultured carp Ciprinus carpio L. in Korea. Carps were immunized with prepared vaccines against VSNCV and examined specific and nonspecific immune responses. Carps were injected by O.2㎖ of formalin-killed vaccine (FKV), heat-killed vaccine (HKV) or E-MEM, respectively and dealt with boost with same way two weeks later. The lysozyme activity of serum and chemiluminescent reponses of head-kidney leucocytes showed increased responses during 2-7 days post-first injection (pfi) and post-boost (pb) in the vaccinated fish, and then decreased to the level of control. As measured by ELISA, vaccinated groups showed a significant increase in VSNCV-specific serum antibodies between 2 weeks pfi and 6weeks pb with a peak at 2 weeks pb. Results of the virus challenge showed that the fish vaccinated with FKV have induced protective immunity, while HKV injection hardly provided protection.
Plasma concentrations of Vitamins E and A were measured in 15 non-insulin dependent Korean female subjects and 15 age-matched normal subjects using reversed-phase high-performance liquid chromatography. No differences were found in plasma Vitamin E concentrations between the 2 groups. Plasma Vitamin A concentrations were higher in subjects with non-insulin dependent diabetes melitus (NIDDM). The effects were evaluated of 4 weeks of daily supplementation of 400 mg Vitamin E on plasma levels of these two vitamins. In addition, the effects were observed for Vitamin E supplementation on oxidative stress and immune-related compound productions in non-insulin dependent diabetic patients and control subjects. After treatment with Vitamin E, plasma Vitamin E concentrations were significantly elevated in both groups. Basal plasma thiobarbituric acid reactive substances (TBABS) were identical, and a decreased level of TBARS caused by Vitamin E was observed only in the diabetic group (0.02739$\pm$0.0024 versus 0.01814$\pm$0.0008 nmols malondialdehyde equivalents/dl plasma ; p<0.05). The basal and after-treatment levels of immunoglobulins A, G, M were identical in control and diabetic groups, indicating that Vitamin E did not appear to alter gross humoral responses in this study. However, elevation of Complement 3 ($C_3$) was noticed due to Vitamin E supplementation, revealing a possible effect of vitamin E on one aspect of humoral immunity, Furthermore, an increase in prostaglandin E_2 ($PGE_2$) levels in diabetic patients was normalized by Vitamin E supplementation. This suggests indirectly that the depressed cell-mediated response due to elevated $PGE_2$ could be normalized. For the definitive antioxidant intake recommendations for prevention and treatment of adverse effects of non-insulin dependent diabetes, evidence from intervention trials like this study should be collected. The present data suggests that Vitamin E may oxen some protective effects against oxidative damage and might have beneficial effects of partial immune-stimulation.
Choi, Sangho;Jeong, Hang Jin;Ju, Young Ran;Gill, Byoungchul;Hwang, Kyu-Jam;Lee, Jeongmin
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.24
no.12
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pp.1728-1735
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2014
Scrub typhus, caused by infection with Orientia tsutsugamushi, is a mite-borne zoonotic disease endemic to the Asian-Pacific region. In Korea, the incidence of this disease has increased with climate changes, and over 10,000 cases of infection were reported in 2013. Although this infection is treatable with antibiotics such as doxycycline and azithromycin, an effective prophylactic vaccine against O. tsutsugamushi would be more desirable for preventing scrub typhus in endemic areas. In this study, we investigated the 56-kDa type-specific antigen (TSA56), which is a major outer membrane protein of O. tsutsugamushi, as a vaccine candidate. Intranasal immunization of recombinant TSA56 (rec56) induced a higher level of TSA56-specific IgG than that induced by intramuscular immunization of tsa56-expressing DNA (p56). Both types of immunization induced a cell-mediated immune response to TSA56, as demonstrated by the splenic cell proliferation assay. Mice immunized with p56, followed by rec56 plus heat-labile enterotoxin B subunit from E. coli, had a stronger protection from a homologous challenge with the O. tsutsugamushi Boryong strain than with other combinations. Our preliminary results suggest that an effective human vaccine for scrub typhus can include either recombinant TSA56 protein or tsa56-expressing DNA, and provide the basis for further studies to optimize vaccine performance using additional antigens or different adjuvants.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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