Silveira Erica Duarte;Rodrigues Julio Carlyle Macedo;Cabral Glaucia Barbosa;Leite Juliana de Almeida;Costa Sidnei Souza;Carneiro Vera Tavares de Campos
Journal of Plant Biotechnology
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v.5
no.2
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pp.87-93
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2003
Brachiaria (Poaceae) is the most important forage genus for cattle production in Brazil. The genetic breeding of this genus is limited by the incompatibility among species, differences in ploidy level and the natural cloning of plants by apomixis (Valle and Miles 1992). However, plant regeneration via tissue culture methods and genetic engineering provide an opportunity to introduce new characteristics in plants of this genus. We have developed methods for the 'genetic modification of Brachiaria brizantha cv. Marandu via biolistic transformation. A higher number of shoots was obtained with 4 mg/L 2.4-diclorophenoxyacetic acid and 0.2 mg/L benzylaminopurine in calli induction medium and 0.1 mg/L naphtaleneacetic acid and 4.0 mg/L kinetin in shoot regeneration medium. A selection curve for mannose was determined to use phospho mannose isomerase (PMI) gene of Escherichia coli as a selection marker. Calli formation was inhibited from 5 g/L mannose, even in the presence of sucrose while calli that were formed in the presence of mannose failed to develop embryos showing that PMI gene can be used for selection of transformants of this grass. Different promoters were tested to evaluate the efficiency based on the detection of the GUS gene expression (Jefferson et al. 1987). The monocot promoters, act1-D and ubi-1, resulted in higher expression levels than dicot promoters, ubi-3 and act-2, or the CaMV35S and CVMV promoters.
SHUKHERDORJ, Baasanmunkh;JANG, Ju Eun;DUCHOSLAV, Martin;CHOI, Hyeok Jae
Korean Journal of Plant Taxonomy
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v.48
no.4
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pp.278-288
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2018
Polyploidization plays an important role in generating the current high diversity of plants. Studies of the distributional patterns of diploid and derivative polyploid races have provided important insights into the evolutionary process and cryptic speciation by polyploidization within and between closely related taxa defined on the basis of their morphology. Allium thunbergii and A. sacculiferum, occurring throughout eastern Russia, eastern China, Korea, and Japan, are examples of closely related species with unsolved taxonomic relationships. A total of 97 and 65 individuals from 26 and 13 populations of A. thunbergii (including var. thunbergii, var. deltoids, and var. teretifolium) and A. sacculiferum, respectively, were studied to determine their ploidy. The geographic structure and habitat differentiation of the cytotypes were also analyzed. The main cytotype of A. thunbergii was diploid (92.3% in total; the rest were tetraploids). In contrast, the majority of A. sacculiferum plants were tetraploids (69.2% of the total; the rest were diploids). No populations of the studied taxa harbored both cytotypes. Allium thunbergii was more often found at higher elevations than A. sacculiferum, and it tended to occur more frequently on rocky slopes and below forests in mountainous areas. On the other hand, A. sacculiferum occurred at forest margins and in lowland pastures. The cytotypes differed with respect to the elevation; diploids were found more frequently at higher elevations than tetraploids. The results of this study and additional biosystematics data indicate that the morphological characteristics of A. thunbergii and A. sacculiferum may be influenced by polyploidization and by their adaptation to various habitat conditions and that A. thunbergii and A. sacculiferum do not clearly fulfill the requirements of any species concept. Consequently, we propose that A. sacculiferum be considered as an additional synonym of A. thunbergii. Additionally, Allium thunbergii var. deltoides is unified into A. thunbergii var. thunbergii.
In Vollenhovia emeryi (Hymenoptera: Myrmicinae), the queen and the male are known to be clonally reproduced. Its colonies can be classified into the two morphs with the wing length of the queen caste. The morph with normal wings is called the long-winged and the other the short-winged that is brachypterous. Even though the two morphs are considered a species, investigation on the species status of the two morphs was suggested with natural separation in nature and the distinctive wing morphology. It has yet to be determined whether the clonally reproduced queen caste is haploid or diploid. Our data clearly show that the two morphs are the same species and the queen caste is diploid on the basis of the genome size data comparison.
Rhododendron keiskei var. hypoglaucum (Ericaceae) was recently reported in Korea, with a disjunct distribution on the southern islands of the Korean Peninsula. Although chromosome numbers and ploidy variations are important traits in angiosperms, gaining a clear understanding the cytological features of Rhododendron has been hampered by the small size of its chromosomes. We herein report the chromosome number, karyotype structure, and genome size of R. keiskei var. hypoglaucum for the first time. The chromosome number of the investigated plants was 2n = 26 with x = 13 as the base chromosome number, which is the one of the frequently encountered base chromosome numbers in Rhododendron. The karyotype of R. keiskei var. hypoglaucum is composed of metacentric and submetacentric chromosomes similar in length, which ranged from 1.39 to 2.40 ㎛. The DNA 1C-value in all examined accessions was small, ranging from 0.63 to 0.65 pg, further supporting the stable genome size in Rhododendron. These comprehensive cytological results provide a framework for detailed molecular, cytogenetic, and phylogenomic analyses that can be used to interpret the slow species diversification rate in Rhododendron.
Mutation signatures represent unique sequence footprints of somatic mutations resulting from specific DNA mutagenic and repair processes. However, their causal associations and the potential utility for genome research remain largely unknown. In this study, we performed PanCancer-scale correlative analyses to identify the genomic features associated with tumor mutation burdens (TMB) and individual mutation signatures. We observed that TMB was correlated with tumor purity, ploidy, and the level of aneuploidy, as well as with the expression of cell proliferation-related genes representing genomic covariates in evaluating TMB. Correlative analyses of mutation signature levels with genes belonging to specific DNA damage-repair processes revealed that deficiencies of NHEJ1 and ALKBH3 may contribute to mutations in the settings of APOBEC cytidine deaminase activation and DNA mismatch repair deficiency, respectively. We further employed a strategy to identify feature-driven, de novo mutation signatures and demonstrated that mutation signatures can be reconstructed using known causal features. Using the strategy, we further identified tumor hypoxia-related mutation signatures similar to the APOBEC-related mutation signatures, suggesting that APOBEC activity mediates hypoxia-related mutational consequences in cancer genomes. Our study advances the mechanistic insights into the TMB and signature-based DNA mutagenic and repair processes in cancer genomes. We also propose that feature-driven mutation signature analysis can further extend the categories of cancer-relevant mutation signatures and their causal relationships.
A proposal of gene transfer scheme from diploid to hexaploid in oats was described. The main idea of this scheme are (1) use Avena magna which has two genomes partially in common with two genomes of the hexaploid Avena sativa or a common genome and the rest genomes partially commonn, and which lead to more regular pairing between them rather than AABB genome type to get 6x-amphiploid as a bridge between ploidy level. Cross between Avena strigosa and Avena magna is compatible and further give 42% seed set, (2) extract tetraploid derivatives which have in corporated desired genes from Avena strigasa to Avena magna, (3) Synthetic petaploid provide 2n=21 chromosome number in female gametes, which lead to complete pairing or nearly so in progenies with Avena sativa, (4) eventually homozygous lines will be produced by selfing the heterozygous (regarding to$A^{As}$ genome) at final step.
This study aimed to investigate the efficiency of colchicine and oryzalin in inducing polyploidy in two Cymbidium hybrids [Showgirl 'Silky' and Mystery Island 'Silk Road' (Silk Road-4)]. Colchicine was used at concentrations ranging from 50 to $500mg{\cdot}L^{-1}$, with treatments lasting 1 to 3 weeks. Oryzalin was used at concentrations ranging from 3 to $20mg{\cdot}L^{-1}$, with treatments lasting 3 to 6 days or 1 to 3 weeks. The survival rate of PLBs was better in colchicine than in oryzalin solutions. The ploidy levels were screened using flow cytometry. In C. Showgirl 'Silky', the highest chromosome doubling efficiencies were obtained with the 1-week treatment in $50mg{\cdot}L^{-1}$ colchicine (60%) and the 2-week treatment in $5mg{\cdot}L^{-1}$ oryzalin (46.7%). In C. Mystery Island 'Silk Road' (Silk Road-4), the highest chromosome doubling efficiencies were obtained with the 1-week treatment in $50mg{\cdot}L^{-1}$ colchicine (16.7%) and the 3-day treatment in $10mg{\cdot}L^{-1}$ oryzalin (6.7%). Colchicine was more efficient than oryzalin in terms of polyploidy induction. Furthermore, pre-treatment, which entailed poking 10 times with forceps, improved the efficiency of chromosome doubling.
Field performance of somatic plants (somatic embryo derived-plants) of yellow-poplar (Liriodendron tulipifera) produced from somatic embryogenesis was compared with that of seedlings at age 5. In comparison of photosynthetic rate (seedling, $10.67{\mu}mol$$CO_2m^{-2}s^{-1}$; somatic plant, $9.04{\mu}mol$$CO_2m^{-2}s^{-1}$), stomatal conductance rate (seedling, 0.2 $H_2Om^{-2}s^{-1}$; somatic plant, 0.166 $H_2Om^{-2}s^{-1}$) and respiration rate (seedling, 1.71 mmol $H_2Om^{-2}s^{-1}$; somatic plant, 1.513 mmol $H_2Om^{-2}s^{-1}$), no significant differences were found between plants. The seedlings were a little higher in comparison of stomatal density (seedling, $23.33/mm^2$; somatic plant, $22.43/mm^2$), length (seedling, $25.83{\mu}m$; somatic plant, $23.46{\mu}m$) and width (seedling, $15.87{\mu}m$; somatic plant, $15.3{\mu}m$). In comparison of DNA content of the leaves using flow cytometry, no differences in ploidy level were found between the seedlings and somatic plants.
Pollen-derived embryos cultured on the hormone-free medium showed a low germination frequency (12.5%) and poor growth response after germination. The greatest frequency of germination (81.3%) was obtained from the embryos cultured on medium with 0.3mg/L GA$_3$.The greatest frequency of generation (81.3) was obtained from embryos cultured on medium with 0.3mg/L GA$_3$. The embryos precultured for 20 days on medium with 0.3mg/L GA$_3$were transferred to the medium with various combination of hormones such as IAA, kinetin, zeatin, 6-benzylaminopurin (BA) and Gh$_3$. The germination frequency of cotyledonary stage embryos showed above 72% on media with all of the hormonal combinations, but the embryos germinated on medium with 2mg/L BA or 0.1mg/L kinetin and 0.3mg/L GA$_3$ developed more vigorously into plantlets than those of other hormonal combinations. Torpedo-stage embryos cultured on medium with 0.3 mg/L Gh$_3$ were pretreated for 8 weeks at 2-week intervals at 4$^{\circ}C$, The germination frequency of the cold-preheated embryos increased with the increment of pretreatment period from 2 to 8 weeks. The greatest frequency of germination (73.3%) was obtained from the embryos pretreated for 8 weeks at 4$^{\circ}C$. The chromosomes of the root-tip cells of W plane grown for 40 days after germination were observed. Most of the regenerated plants were haploid (55.8%) or diploid (315%), but triploid (1.3%), tetraploid (5.2%), or aneuploid (6.5%) were also detected among them.
In order to investigate the effects of gelling agent on rice anther culture, anthers of rice (Japonica cv Daecheongbyeo) were cultured on N$_{6}$ media supplemented with 0.8, 1.2 or 1.6% Junsei agar and 05, 0.4, 0.6, 0.8 or 1.0% Gelrite (Phytagel, Sigma). On Junsei agar media, the frequency of callus induction was decreased in proportion to agar concentration. The frequency of callus induction was more increased as 67.6% and 54.8% in media containing 0.4 and 0.6% Gelrite than in agar media. The frequency of plant regeneration and spontaneous doubled-diploid was directly proportional to Junsei agar and Gelrite concentration. The number of green and spontaneous doubled diploid plant was highest on 0.6% Gelrite medium. In order to optimize the concentration of growth regulators for the callus induction medium containing 0.6% Gelrite, anthers were cultured on N$_{6}$ media supplemented with 2mg/L NAA, 2 mg/L 2,4-D, 1mg/L NAA and 1mg/L 2, 4-D, or 1mg/L NAA, 1mg/L 2,4-D and 0.5mg/L kinetin. The maximum frequency of callus induction and plant regeneration was obtained from the medium supplemented with 2 mg/L NAA and 0.6% Gelrite. In conclusion the induction of embryogenic callus, the frequency of plant regeneration and in vivo chromosome doubling was more effective in Gelrite media than in Junsei agar media.dia.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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