본 연구에서는 C2C12 근육 세포의 분화 과정에 있어 IGF-I이 지방산의 수송을 담당하는 지방산 수송체인 FAT/CD36의 mRNA 및 단백질 발현에 미치는 영향에 대해 알아보았다. 그 결과 근육세포의 분화 과정에 있어 FAT/CD36의 단백질과 mRNA 발현이 분화 시간 의존적으로 유의하게 증가하였으며, IGF-I의 처리에 의해서도 유의하게 조절되었음을 알 수 있었다. 이는 IGF-I이 골격근 세포의 성장 및 분화를 촉진하여 근육 관련 유전자들의 발현을 조절하는 기능뿐만 아니라, 골격근의 주요 에너지원으로 사용되는 지방산의 수송을 담당하는 FAT/CD36의 발현에도 영향을 미친다는 것으로 해석할 수 있겠다. 향후 IGF-I이 골격근 세포에서 FAT/CD36의 발현에 영향을 미침으로써 골격근의 지방산 흡수와 산화율을 조절하는지, 그에 따라 지방대사에 어떠한 영향을 미치는지에 대한 연구가 필요할 것이며, 이와 관련된 신호전달 체계 및 기전에 대한 연구도 진행 되어야 할 것이다.
High affinity complexes for the tumor were obtained by changing pH and composition in the preparation of $^{99m}Tc-DMSA$. The purpose of this study was to investigate the tumor affinity, and in vitro and in vivo characteristics of these complexes. The results obtained were as follows; 1) Tumor imaging agent was formed successfully at pH $6.0\sim9.0$ and renal imaging agent at pH $2.0\sim5.0$. 2) The serum protein binding of $^{99m}Tc-DMSA$ was $89.1\sim92.8%$ at pH $2.0\sim5.0$ and $11.8\sim30.5%$ at pH $6.0\sim9.0$ respectively, and it was not changed with time. 3) The T 1/2 of tumor affinity complex in blood between 3 and 6 hours after injection was $187{\pm}29$ minutes $(mean{\pm}SD)$. 4) In the blood, the radioactivity was mainly in the plasma, and less than 1% was in the cellular components. 5) In the Walker carcinosarcoma 256 bearing Wistar rats, the radioactivity in the kidney increased, and decreased in the skeleton with time. The radioactivity in the tumor showed the peak in 6 hours after injection and decreased thereafter. 6) In the tumor cell, the radioactivity localized mainly in the cytosol, the soluble fraction of the cytoplasm. This study provides the basic knowledge about tumor affinity and usefulness of $^{99m}Tc-DMSA$ in the diagnosis of malignant disease.
Nitrosative stress is defined as pathophysiological conditions that are related to covalent modifications of proteins by nitration/nitrosylation by forms of nitrogen oxide ($NO_x$), leading to DNA damage, ultimately, cell death. This type of stress condition appears to be associated with a number of disease states, including diabetes, inflammation and neurodegenerative diseases. Since these pathological conditions are frequently chronic in nature and, thus, require long-term treatment, changes in pharmacokinetics are likely to affect the therapy. Transporters are membrane proteins that facilitate the movement of substrates, including drugs, across plasma membranes of epithelial / endothelial cells. Since it is now increasingly evident that transporters are pharmacokinetically significant, functional alteration of transporters by this stress condition may have therapeutic relevance. In this review, experimental techniques that are used to study both in vivo and in vitro nitrosative stress are summarized and discussed, along with available literature information on the functional implication of transporters under conditions of nitrosative stress conditions. In the literature, both functional induction and impa irment were apparently present for both drug transporter families [i.e., ATP-binding cassette (ABC) and solute carrier families (SLC)]. Furthermore, a change in the function of a certain transporter appears to have temporal dependency by impairment in the early phase of nitrosative stress and induction thereafter, suggesting that the role of nitrosative stress is complex in terms of functional implications of the transporters. Although the underlying mechanisms for these alterations are not fully understood, protein nitration/nitrosylation appears to be involved in the functional impairment whereas transcript factor(s) activated by nitrosative stress may play a role, at least in part, in functional induction. Interestingly, functional induction under conditions of nitrosative stress has not been observed for SLC transporters while such impairment has been documented for both ABC and SLC transporters. Further investigations appear to be necessary to fully delineate the underlying reasons for these differences on the impact and importance of nitrosative stress conditions.
Extracellular ATP elicits diverse physiological effects by binding to the G-protein-coupled P2Y receptors on the plasma membrane. In addition to the short-term effects of extracellular nucleotides on cell functions, there is evidence that such purinergic signalling can have long-term effects on cell proliferation, differentiation and death. The 3T3-L1 cell line derived from mouse embryo is a well-established and commonly utilized in vitro model for adipocytes differentiation and function. However, the distributions and roles of P2Y subtypes are still unknown in the preadipocyte. In this study, we identified the distributions and roles of P2Y subtypes in preadipocyte using $Ca^{2+}$ imaging and realtime PCR. ATP increased the $[Ca^{2+}]_i$ in a concentration-dependent manner. ATP increased $Ca^{2+}$ in absence and/or presence of extracellular $Ca^{2+}$. Suramin, non-selective P2Y blocker, largely blocked the ATP-induced $Ca^{2+}$ response. U73122, a PLC inhibitor, completely inhibited $Ca^{2+}$ mobilization in 3T3-L1 cells. The mRNA expression by realtime PCR of P2Y subtypes was $P2Y_2:P2Y_5:P2Y_6=1.0:12.5:0.3$. In conclusion, we showed that $P2Y_5$ receptor is a dominant purinergic receptor in preadipocytes, and multiple P2Y receptors could involve in differentiation and migration via regulating of intracellular calcium concentration.
Shin, Chang Yell;Lee, Hak Yeong;Kim, Gil Hyung;Park, Sun Young;Choi, Won Seok;Sohn, Uy Dong
Biomolecules & Therapeutics
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제29권4호
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pp.419-426
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2021
In this study, we aimed to investigate the effects of 8 weeks of treatment with a combination of evogliptin and leucine, a branched-chain amino acid, in mice with high-fat diet (HFD)-induced diabetes. Treatment with evogliptin alone or in combination with leucine reduced the body weight of the mice, compared to the case for those from the HFD control group. Long-term treatment with evogliptin alone or in combination with leucine resulted in a significant reduction in glucose intolerance; however, leucine alone did not affect postprandial glucose control, compared to the case for the mice from the HFD control group. Furthermore, the combination of evogliptin and leucine prevented HFD-induced insulin resistance, which was associated with improved homeostasis model assessment for insulin resistance, accompanied by markedly reduced liver fat deposition, hepatic triglyceride content, and plasma alanine aminotransferase levels. The combination of evogliptin and leucine increased the gene expression levels of hepatic peroxisome proliferator-activated receptor alpha, whereas those of the sterol regulatory element-binding protein 1 and stearoyl-CoA desaturase 1 were not altered, compared to the case in the HFD-fed mice (p<0.05). Thus, our results suggest that the combination of evogliptin and leucine may be beneficial for treating patients with type 2 diabetes and hepatic steatosis; however, further studies are needed to delineate the molecular mechanisms underlying the action of this combination.
Objective: This study was conducted to investigate the potential effects of prolonged photoperiod on the serum lipids, carcass traits, and meat quality of Jinjiang cattle during winter. Methods: Thirty-four Jinjiang bulls aged between 14 and 16 months were randomly assigned to two groups that were alternatively subjected to either natural daylight +4 h supplemental light (long photoperiod, LP) or natural daylight (natural photoperiod, NP) for 96 days. The potential effects on the levels of serum lipids, carcass traits, meat quality, and genes regulating lipid metabolism in the intramuscular fat (IMF) of the cattle were evaluated. Results: Jinjiang cattle kept under LP showed significant increase in both dry matter intake and backfat thickness. the serum glucose and the plasma leptin levels were significantly reduced, while that of melatonin and insulin were observed to be increased. The crude fat contents of biceps femoris muscle and longissimus dorsi muscle were higher in LP than in NP group. In longissimus dorsi muscle, the proportions of C17:0 and C18:0 were significantly higher but that of the C16:1 was found to be significantly lower in LP group. The relative mRNA expressions in IMF of longissimus dorsi muscle, the lipid synthesis genes (proliferator-activated receptor gamma, fatty acid-binding protein) and the fatty acid synthesis genes (acetyl-coa carboxylase, fatty acid synthetase, 1-acylglycerol-3-phosphate acyltransferase) were significantly up-regulated in LP group (p<0.05); whereas the hormone-sensitive lipase and stearoyl-CoA desaturase 1 were significantly down-regulated in LP than in NP group. Conclusion: Prolonged photoperiod significantly altered the growth performance, hormonal levels, gene expression and fat deposition in Jinjiang cattle. It suggested that the LP improved the fat deposition by regulating the levels of different hormones and genes related to lipid metabolism, thereby improving the fattening of Jinjiang cattle during winter.
Chris Major, Ncho;Akshat, Goel;Vaishali, Gupta;Chae-Mi, Jeong;Yang-Ho, Choi
Animal Bioscience
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제36권2호
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pp.284-294
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2023
Objective: This study investigated the effects of in ovo feeding of γ-aminobutyric acid (GABA) and embryonic thermal manipulation (ETM) on growth performance, organ indices, plasma biochemical parameters, hepatic antioxidant levels, and expression of lipid metabolism-related genes in broilers. Methods: Two hundred and fifty eggs were assigned to one of four treatments: control eggs incubated under standard conditions (CON); eggs that received an in ovo injection of 10% GABA on day 17.5 of incubation (G10); thermally manipulated eggs between days 10 and 18 of incubation at 39.6°C for 6 h daily (TM); and eggs that received both treatments during incubation (G10+TM). After 28 days of rearing, five birds per treatment were selected for blood and organ sampling. Results: No differences were found in hatchability or growth parameters among different treatment groups. Hepatic gene expression of catalase (CAT) and glutathione peroxidase 1 (GPx1) was upregulated (p = 0.046 and p = 0.006, respectively) in the G10+TM group, while that of nuclear factor erythroid 2-related factor 2 (NRF2) was upregulated (p = 0.039) in the G10 group. In addition, the relative gene expression of NADPH oxidase 1 (NOX1) was significantly lower (p = 0.007) in all treatment groups than that in the CON group. Hepatic fatty acid synthase (FAS) levels and average daily feed intake (ADFI) of last week showed a positive correlation (r = 0.50, p = 0.038). In contrast, the relative gene expression of the extracellular fatty acid-binding protein (EXFAB) and peroxisome proliferator-activated receptor-γ (PPAR-γ) were positively correlated (r = 0.48, p = 0.042 and r = 0.50, p = 0.031) with the overall ADFI of birds. Conclusion: Taken together, the results of this study suggest that the combination of in ovo feeding of GABA and ETM can enhance hepatic antioxidant function in broilers.
본 연구는 한국 전통부각 제조방법을 이용하여 부각을 부식으로뿐만 아니라 스낵의 용도로도 사용할 수 있게 개발하고자 하였다. 부각 제조가 상대적으로 간편하며 원료 자체의 색상이 거의 없는 연근을 선정하여 여기에 빨강, 녹색 그리고 노란색을 낼 수 있도록 천연 기능성 색소 소재로 백년초, 녹차 그리고 치자 가루를 사용하였다. 이들 기능성 색소 재료를 삭힌 찹쌀풀 제조 후 첨가하여 다양한 부각을 만들고 이를 말린 후 생 참기름에 튀겨 동맥경화식이에 10%가 되도록 첨가하여 $LDLr^{-/-}$ 마우스에 10주간 섭취시켜 지질저하 기능성을 비교하였다. 실험군은 동맥경화유발식이를 섭취한 wild type mice 대조군(WC), $LDLr^{-/-}$ mice 대조군(CON), 그리고 동맥경화식이에 다양한 연근부각을 첨가한 연근부각군(LRB), 백년초연근부각군(OFB), 녹차연근부각군(GTB), 그리고 치자연근부각군(GFB)의 총 7군이었다. 부각의 효과를 비교하기 위하여 제한식이를 실시하였다. CON의 혈중 지질 농도는 WC에 비해 유의적으로 높았으며, LRB의 혈중 TG, TC 그리고 LDL-C 농도는 CON에 비해 유의적으로 낮았다(P<0.05). 기능성 색소 재료 첨가에 따른 지질저하 기능성을 살펴보았을 때 OFB와 GTB군의 혈중 TG, TC 그리고 LDL-C 농도가 LRB군에 비해 유의적으로 낮았다(P<0.05). 간의 지방산 합성 효소인 FAS와 콜레스테롤 합성 효소인 HMGCR의 발현 역시 OFB와 GTB군에서 LRB군에 비해 유의적 낮아(P<0.05) 혈중 지질 농도 결과와 일치하였다. 그러나 GFB군의 혈중 지질 농도는 LRB군보다 낮았으나 유의적인 차이를 보이지 않았고, FAS 및 HMGCR 발현 역시 유의적인 차이를 보이지 않았다. FAS 및 HMGCR의 mRNA 발현을 조절하는 전사인자인 SREBP-1과 2의 발현을 살펴보았을 때, OFB군과 GTB군은 LRB군에 비해 각각 유의적으로 낮았으나(P<0.05) GFB군에서는 발현 정도가 낮기는 하였으나 유의적이지 않았다. 이상의 결과로부터 백년초와 녹차 가루를 첨가하여 제조한 연근부각은 $LDLr^{-/-}$ 마우스의 간에서 지방산과 콜레스테롤의 생합성 억제를 통해 혈중 지질의 농도를 낮추는 효과가 있음을 확인하였다.
본 연구는 재래돼지와 랜드레이스를 기초축으로 이용한 F$_2$ 241두에 대해 Heart Fatty Acid- Binding Protein 유전자와 연관되어 있는 PCR- RFLP를 이용하여 그 다형성을 조사하고 돼지의 성장형질, 도체형질, 육질형질과 그 유전자형간의 연관성을 구명코자 실시하였다. H-FABP PCR-RFLP는 두 쌍의 primer에 의한 850bp와 700bp의 증폭산물을 HaeⅢ와 HinfⅠ제한효소를 사용하여 실시되었다. HaeⅢ을 이용한 PCR-RFLP 유전자형은 DD형/700+150bp, Dd형/700+400+300+ 150bp 그리고 dd형/400+300+150bp의 DNA 단편을 보였으며, Hinf1에 의한 유전자형은 HH형은 350+180+130bp, Hh형은 350+220+180+130bp, hh형/350+220+130bp의 절단된 DNA 단편을 보였다. H-FABP/HaeⅢ 유전자형 중에서 12주령 체중은 DD형에 비해 Dd와 dd형에서 유의적으로 높은 값을 보였으며(p〈0.001), 3주령 체중 (p〈0.01)과 5주령, 30주령 체중 (p〈0.05)에 경우도 Dd와 dd형에서 유의적으로 높게 관찰되었고(Table 3), 특히 ‘d’ 대립유전자가 체중과 연관성이 있음이 관찰되었다. H-FABP/HinfⅠ의 유전자형과 표현형질의 연관성을 보면 12주령, 30주령 체중 및 도체지방 과 등지방 두께에서는 hh형에 비해 HH와 Hh형에서 유의적으로 높게 나타났으며(p〈0.001), 5주령 체중과 근내지방 함량에서도 HH형에서 유의적으로 높게 관찰되었고(p〈0.05), 특히 ‘H’ 대립유전자가 체중과 도체지방, 등지방 두께 및 근내지방 함량과 연관성이 있음이 관찰되었다. 따라서 돼지성장 및 지방축적과 관련한 선발력을 높이기 위해 H- FABP PCR-RFLP(HaeⅢ & HinfⅠ)를 분자생물학적 marker로 사용할 수 있을 것으로 사료된다.
A myofiber of skeletal muscle is composed of myofibrils, sarcolemma (plasma membrane), and constameres, which anchor the myofibrils to the sarcolemma. Achvillin is a recently identified F-actin binding muscle protein, co-isolates with dystrophin and caveolin-3 in low-density sarcolemma of striated muscle, and colocalizes with dystrophin at costameres, the specialized adhesion sites in muscle. Archvillin also binds to nebulin and localizes at myofibrillar Z-discs, the lateral boundaries of the sarcomere in muscle. However other roles of archvillin on the dynamics of myofibrillogenesis remain to be defined. The goal of this study is, by using siRNA-mediated gene silencing technique, to investigate the effect of archvillin on the dynamics of myofibrillogenesis in cell culture of a mouse skeletal myogenic cell line (C2C12), where presumptive myoblasts withdraw from the cell cycle, fuse, undergo de novo myofibrillogenesis, and differentiate into mature myotubes. The roles of archvillin in the assembly and maintenance of myofibril and during the progression of myofibrillogenesis induced in skeletal myoblast following gene silencing in the cell culture were investigated. Fluorescence microscopy demonstrated that the distribution of archvillin was changed along the course of myofibril assembly with nebulin, vinculin and F-actin and then located at Z-lines with nebulin. Fluorescence microscopy demonstrated that knockdown of mouse archvillin expression led to an impaired assembly of new myofibrillar clusters and delayed fusion and myofibrillogenesis although the mouse archvillin siRNA did not affect those expressions of archvillin binding proteins, such as nebulin and F-actin. This result is corresponded with that of RT-PCR and western blots. When the perturbed archvillin was rescued by co-transfection with GFP or Red tagged human archvillin construct, the inhibited cell fusion and myotube formation was recovered. By using siRNA technique, archvillin was found to be involved in early stage of myofibrillogenesis. Therefore, the current data suggest the idea that archvillin plays critical roles on cell fusion and dynamic myofibril assembly.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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