Bacterial wilt, Fusarium wilt and Foot rot caused by Ralstonia solanacearum, Fusarium oxysporum, and Phytophthora capsici respectively, continue to be severe problems to tomato, potato and black pepper growers in Vietnam. Three bio-products, Bacillus vallismortis EXTN-1 (EXTN-1), Bacillus sp. and Paenibacillus sp. (ESSC) and Bacillus substilis (MFMF) were examined in greenhouse bioassay for the ability to reduce bacterial wilt, fusarium wilt and foot rot disease severity. While these bio-products significantly reduced disease severities, EXTN-1 was the most effective, providing a mean level of disease reduction 80.0 to 90.0% against bacterial wilt, fusarium wilt and foot rot diseases under greenhouse conditions. ESSC and MFMF also significantly reduced fusarium wilt, bacterial wilt and foot rot severity under greenhouse conditions. Bio-product, EXTN-1 with the greatest efficacy under greenhouse condition was tested for the ability to reduce bacterial wilt, fusarium wilt and foot rot under field condition at Song Phuong and Thuong Tin locations in Ha Tay province, Vietnam. Under field condition, EXTN-1 provided a mean level of disease reduction more than 45.0% against all three diseases compared to water treated control. Besides, EXTN-1 treatment increased the yield in tomato fruits 17.3% than water treated control plants.
우수한 재래종(在來種)에 더뎅이병과 역병 저항성(抵抗性) 인자(因子)를 도입(導入)하기 위한품질친(品質親)을 선발(選拔)하기 위하여 '칼미초'에서 선발한 20계통과 '풍각초'에서 선발한24계통을 공시하여 본(本) 대학(大學) 시험포양(試驗圃楊)에 재배(栽培)하여 개화소요일수(開花所要日數), 초장 및 과실특성을 조사(調査)하였다. '칼미초'와 '풍각초' 선발 계통(系統)들은 모두 개화소요일수(開花所要日數)가 많은 만생종(晩生種)이었고, '칼미초' 계통들이 '풍각초' 보다 변이복(變異福)이 더 크게 나타났다. '칼미초'의 일부 계통(系統)들은 초세(草勢)가 강하고 당도(糖度)가 높으며 포양(圃楊)에서 바이러스에 저항성(抵抗性)으로 나타났다. '풍각초'의 일부 계통(系統)은 과종(果種)이 무거운 대과종(大果種)이었으며 과피가 두텁고 제분율(製粉率)이 높게 나타났다. 이상(以上)의 결과(結果)로서 더뎅이병과 역병에 저항성(抵抗性) 품종(品種)을 육성하기 위한 여고잡육종에서 반복친으로 사용할 수 있는 재료(材料)로 '칼미초' 계통 6, 9, 14, 18과 '풍각초' 계통 14, 16, 18등 7계통(系統)을 선발(選拔)하였다.
An endophytic bacterial strain YC5480 producing antifungal and phytotoxic compounds simultaneously was isolated from the surface sterilized root of Artemisia sp. collected at Jinju area, Korea. The bacterial strain was identified as a species of Pseudomonas brassicacearum based on its 16S rRNA gene sequence analysis and physiological and biochemical characteristics. The seed germination and growth of monocot and dicot plants were inhibited by culture filtrate (1/10-strength Tryptic Soy Broth) of the strain. The germination rate of radish seeds in the culture filtrate differed in various culture media. Only 20% of radish seeds germinated in the culture media of 1/2 TSB for 5 days incubation. Mycelial growth of fungal pathogens, Colletotrichum gloeosporioides, Fusarium oxysporum and Phytophthora capsici was also inhibited by the culture filtrate of the strain YC5480. An antifungal compound, KS-1 with slight inhibitory activity of radish seed germination at 1,000 ppm and a seed germination inhibitory compound, KS-2 without suppression of fungal growth were produced simultaneously in TSB. The compounds KS-1 and KS-2 were identified to be 2,4-diacetylphloroglucinol (DAPG) and 2,4,6-trihydroxyacetophenone (THA), respectively.
Here, we show that an endophytic bacterial strain, Enterobacter asburiae B1 exhibits the ability to elicit ISR in cucumber, tobacco and Arabidopsis thaliana. This indicates that strain B1 has a widespread ability to elicit ISR on various host plants. In this study, E. asburiae strain B1 did not show antifungal activity against tested major fungal pathogens, Colletotrichum orbiculare, Botrytis cinerea, Phytophthora capsici, Rhizoctonia solani, and Fusarium oxysporum. Moreover, the siderophore production by E. asburiae strain B1 was observed under in vitro condition. In greenhouse experiments, the root treatment of strain B1 significantly reduced disease severity of cucumber anthracnose caused by fungal pathogen C. orbiculare compared to nontreated control plants. By root treatment of strain B1 more than 50% disease control against anthracnose on cucumber was observed in all greenhouse experiments. Simultaneously, under the greenhouse condition, the soil drench of strain B1 and a chemical inducer benzothiadiazole (BTH) to tobacco plants induced GUS activity which is linked with activation of PR promoter gene. Furthermore, in Arabidopsis thaliana plants the soil drench of strain B1 induced the defense gene expression of PR1 and PDF1.2 related to salicylic acid and jasmonic acid/ethylene signaling pathways, respectively. In this study, for the main focus on root colonization by strain B1 associated with defense responses, bacterial cells of strain B1 was tagged with the gfp gene encoding the green fluorescent protein in order to determine the colonization pattern of strain B1 in cucumber. The gfp-tagged B1 cells were found on root surface and internal colonization in root, stem, and leaf. In addition to this, the scanning electron microscopy observation showed that E. asburiae strain B1 was able to colonized cucumber root surface.
Kim Jin-Woo;Kim Eun-Ha;Kang Yong-Sung;Choi Ok-Hee;Park Chang-Seuk;Hwang In-Gyu
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제16권3호
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pp.450-456
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2006
Pseudomonas fluorescens MC07 is a growth-promoting rhizobacterium that suppresses mycelial growth in fungi such as Rhizoctonia solani, Pythium ultimum, Fusarium oxysporum, and Phytophthora capsici. To determine the role of the bacterium's antifungal activity in disease suppression, we screened 2,500 colonies generated by Tn5lacZ insertions, and isolated a mutant 157 that had lost antifungal activity. The EcoRI fragment carrying Tn5lacZ was cloned into pBluescript II SK(+) and used as a probe to isolate wild-type clones from a genomic library of the parent strain, MC07. Two overlapping cosmid clones, pEH4 and pEH5, that had hybridized with the mutant clone were isolated. pEH4 conferred antifungal activity to the heterologous host P.fluorescens strain 1855.344, whereas pEH5 did not. Through transposon mutagenesis of pEH4 and complementation analyses, we delineated the 14.7-kb DNA region that is responsible for the biosynthesis of an antifungal compound. DNA sequence analysis of the region identified 11 possible open reading frames (ORF), ORF1 through ORF11. A BLAST search of each putative protein implied that the proteins may be involved in an antifungal activity similar to polyketides.
식물 생장촉진근권세균 B. vallismortis BS07M을 점토로 제형화한 제제(CP)는 고추의 생육촉진 및 병저항성 유도 효과를 보였다. CP를 육묘 상토에 혼합하는 것은 기존의 세균 현탁액을 유묘 또는 포장에서 재배 중에 관주 살포하는 방법에 비해 비교적 사용하기 쉽고, 그 효과가 포장에서도 지속됨으로써 고추의 열매 개당 무게를 증가시켰으며, 수확 후 저장 중에 자연적으로 발생하는 무름 증상을 감소시킴으로써 보관기간을 늘리는 효과가 있을 것이다.
About 300 actinomycetes were isolated from two forest and one sea-shore soil and tested for inhibitory effects on mycelial growth of six plant pathogenic fungi Magnaporthe grisea, Alternaria mali, Colletotrichum gloeosporioides, Phytophthora capsici, Fusarium oxysporum f. sp. cucumerinum, and Rhizoctonia solani. Among 300 actinomycetes tested, only 16 actinomycetes showed the antifungal activity against the test fungi. Isolate NH 50 was selected for production and purification of antifungal antibiotic substances. Actinomycete isolate NH 50 displayed the broad antifungal spectra against 11 plant pathogenic fungi. To identify actinomycete isolate NH 50, cultural characteristics on various agar media, diaminopimelic acid type, and morphological characteristics by scanning electron microscopy were examined. As a result, actinomycete isolate NH 50 was classified as a rare actinomycete that had LL-DAP type and did not produce spores. After incubation of isolate NH 50 in yeast extract-malt extract-dextrose broth, antifungal compound NH-B1 that inhibited mycelial growth of some plant pathogenic fungi was purified from the methanol eluates of XAD-16 resins by a series of purification procedures, i.e., silica gel flash chromatography, C18 flash chromatography, Sephadex LH-20 column chromatography, silica gel medium pressure liquid chromatography (MPLC), C18 MPLC, and high pressure liquid chromatography (HPLC). UV spectrum and 1HNMR spectrum of antifungal compound NH-B1 dissolved in methanol were examined. The antibiotic NH-B1 showed the major peaks at 230 and 271.2nm. Based on the data of 1H-NMR spectrum, NH-B1 was confirmed to be an extremely complex polymer of sugars called polysaccharides. The antibiotic NH-B1 showed strong antifungal activity against Alternaria solani and Cercospora kikuchi, but weak activity against M. grisea.
An antibiotic compound was isolated from the culture of an antagonist against Fusarium oxysporum f. sp. sesami, Bacillus polymyxa strain KB-8, and tested for the control of Fusarium wilt of sesame in greenhouse conditions. Optimum conditions for culturing the antagonist to obtain the maximum antibiotic activity were determined using different culture media, initial medium acidity, and incubation periods for which yeast -malt extract agar with the initial acidity of pH 5 and over 13 days culture were best. Antibiotic substances extracted by methanol had 2 main fractions, KB-8A and KB-8B, in thin layer chromatography (OLC) with Rf values of 0.35 and 0.67 in a solvent system of chloroform : methanol = 7 : 3. The fraction KB-8A wa purified further by XAD-2, silica gel and Sephadex LH-20 column chromatography, and crystalization. Its minimum inhibitory concentrations (MICs) were $12.8\mu\textrm{g}$/ml for F. oxysporum and Alternaria mali, $6.4\mu\textrm{g}$/ml for Colletotrichum gloeosporioides and Rhizoctonia solani, and $3.2\mu\textrm{g}$/ml for Phytophthora capsici. Soil drenching of antibiotic KB-8A in the concentrations of $13.0\mu\textrm{g}$/ml and $26.0\mu\textrm{g}$/ml effectively inhibited the Fusarium wilt of sesame in a greenhouse test, which appeared to be comparable to the fungicide benlate of $6.5\mu\textrm{g}$ a. i./ml.
Botrytis cinerea에 의한 포도 잿빛곰팡이병은 특히 하우스 재배시 큰 피해를 주는 병원 진균이다. Pseudomonas속 세균들은 토양 미생물중 가장 잘 연구되어 있고, 토양 내에서 중요한 역할을 담당하고 있다. 근권토양에서 분리한 형광성 Pseudomonas속 세균 83균주 중 P84균주는 실내 항균력 실험결과 다양한 식물병원진균(Phytophthora capsici, Sclerotium spp., Botryosphaeria dothidea, Fusarium spp.)에 대해 항균효과를 나타내었다. 생리적 실험과 유전적 실험결과 P84균주는 P. putida로 동정되었다. 이 세균의 항균력은 항생물질(2,4-diacetylphloroglucinol)의 생산과 관련되어 있는 것으로 사료되며, 이 세균이 포도 잿빛곰팡이병의 생물적 방제에 이용될 수 있는 가능성이 시사되었다.
43종의 식물오일들을 대상으로 잿빛곰팡이병균 (Botrytis cinerea) 외 9종의 식물병원균에 대한 살균 효과로 이들의 생리활성 검증을 실시하였다. 이 중 thyme 오일이 잿빛곰팡이병균(Botrytis cinerea), 잎집무늬 마름병균(Rhizoctonia solani), 고추역병균(Phytophthora capsici), 고추탄저병균(Glomerella cingulate), 사과점무늬 낙엽병균(Alternaria mali)과 벼도열병균(Magnaporthe grisea)에서 광범위하게 살균효과를 나타내었다. Thyme 오일의 주성분을 GC/MS로 분석한 결과 thymol, carvacrol, borneol, linalool과 p-cymene임을 확인하였다. 이 중 thymol과 carvacrol이 높은 살균활성을 나타내었다. 한편, 식물병원균에 대한 살균활성관련 작용기작을 실험한 결과, 잿빛곰팡이병균(Botrytis cinerea), 잎집무늬마름병균(Rhizoctonia solani)과 사과점무늬낙엽병균(Alternaria mali)의 포자발아를 억제하는 것으로 나타났다. Thymol과 carvacrol은 in vivo에서 잿빛곰팡이병균(Botrytis cinerea)과 잎집무늬마름병균(Rhizoctonia solani)에 대하여 높은 예방효과를 나타내었으며, thymol, carvacrol의 유사구조를 갖는 alkylphenol계 화합물들도 살균활성이 있음을 검정하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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