• 한국양식학회지
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• 제19권3호
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• pp.197-204
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• 2006

넙치 치어 3 cm와 5 cm 그룹을 이용하여 Philasterides dicentrarchi에 대한 병원성과 감염경로를 조사하였다. 소형수조에서 넙치치어에 스쿠티카충을 인위감염시킨 결과 3 cm 그룹인 경우 접종 4일 후에 40%가 감염되었으며, 24일 후에는 감염률이 90.1%로 대부분의 실험어가 감염되었다. 5 cm 그룹은 3 cm그룹에 비해서 초기 감염률이 현저히 낮았다. 접종 8일 후에 최초로 20%의 감염률을 보였으며 16일 후에도 42%로 완만한 속도로 감염률이 증가하였다. 그러나 그 이후에는 감염률이 급격히 증가하여 24일 후에는 81%에 달했다. 반면에 스쿠티카충을 접종시키지 않은 대조구에서는 스쿠티카충이 감염되지 않았다. 인위감염시킨 스쿠티카충의 어체내 침투는 몇 가지 경로로 이루어졌는데, 지느러미 연조막에 감염된 후 지느러미 조직과 근육에 침투하는 경로, 주둥이 부위의 부드러운 표피를 통하여 감염 된 후 두부 골격과 근육 결을 따라 안구와 뇌로 침투하는 경로, 꼬리지느러미를 통해서 미병부에 침투한 후 척수에 도달하고, 척수를 따라 뇌에 침투하는 경로 등이었다. 이외에도 복강에 침투하는 경우도 있었는데, 항문주위에 다량으로 증식하며 조직을 괴사시킨 후 복강으로 침투하였다. 치명적인 피해를 입히는 뇌 침투는 3cm그룹은 충 접종 후 14일 만에, 5cm그룹은 20일 만에 각각 확인되어 어체가 작을수록 빨리 이루어졌다.

• 한국어병학회지
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• 제22권1호
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• pp.45-52
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• 2009

Zebrafish was firstly applied to an experimental model for scuticociliatosis caused by Philasterides dicentrarchi, a facultative parasitic ciliate in cultured marine fish. The susceptibility of zebrafish to infection of P. dicentrarchi was assessed by intraperitoneal injection of the ciliates, which produced typical symptoms of scuticociliatosis and significant mortality. The potential use of zebrafish as a model to evaluate the vaccine efficacy against scuticociliatosis was analyzed by immunization of zebrafish with the ciliates lysate. Furthermore, the effect of different adjuvants, such as Quillaja saponin (QS), Montanide, and Freund’s incomplete adjuvant (FIA) on the protective efficacy of the vaccine was investigated. Groups of zebrafish injected with QS or Montanide alone showed higher survival of fish against challenge test compared to control fish. The results suggest that adjuvant-mediated enhancement of innate immune responses play important roles in protection of fish against scuticociliatosis. The considerably high survival in the fish immunized with the antigen alone indicates that the ciliate lysate itself is highly immunogenic to zebrafish, which can elicit protective immune responses. The protective potential of the antigen, ciliate lysate, was enforced through combined administration with adjuvants including QS, Montinide and FIA. No or low mortalities in the groups of fish immunized with the antigen plus adjuvants suggests that the adaptive immune responses of zebrafish might be accelerated by the adjuvants or the protective potential of the antigen and adjuvants might synergistically interact. In spite of several shortcomings such as difficulties in sampling of serum and leucocytes enough to routine immunological analyses, zebrafsih might be the most convenient experimental animal for scuticociliatosis.

• 한국양식학회지
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• 제20권2호
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• pp.106-113
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• 2007

양식넙치에서 분리된 스쿠티카섬모충 P. dicentrarchi에 대한 생물학적 특성을 규명하기 위해 배양, 생육환경, 화합물의 in vitro 구제실험 등을 실시하였다. P. dicentrarchi 배양실험 결과 세포, 세균, 넙치치어 배합사료, 뇌 조직과 로티퍼 조직 등의 유기물을 먹이로 활발히 증식하였다. 생육환경 조건은 염분농도 $5{\sim}45\;ppt,\;pH\;6{\sim}9$ 범위에서 증식이 이루어졌으며, 온도는 $10{\sim}30^{\circ}C$ 범위에서 생존 및 증식이 가능하나 $10{\sim}25^{\circ}C$ 범위에서 활발한 증식이 이루어졌다. P. dicentrarchi의 화합물 구제실험 결과 포르말린 300, 400 ppm에 30분, 200 ppm에 60분, 100 ppm에 90분, 50 ppm에서 120분 만에 구제효과를 보였다. 과산화수소 약욕에 따른 구제효과는 300 ppm에서 60분, 200 ppm에서 90분 만에 구제효과를 보였으며, 150 ppm 처리구와 100 ppm 처리구에서는 150분 만에 각각 운동성을 완전히 상실하여 구제효과를 보였다.

• 한국어병학회지
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• 제17권2호
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• pp.145-149
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• 2004

The definitive identification of ciliate species by morphological characteristics relies on time-consuming and laborious staining techniques. Therefore, in this study, we discriminated 3 scuticociliatosis causing species - Pseudocohnilembus persalinus, Uronema marinum and Philasterides dicentrarchi - in cultured olive flounder by multiplex PCR. The multiplex PCR based on the species-specific amplification of small subunit ribosomal RNA (SS rRNA) gene sequence enabled us to distinguish the 3 scuticociliate species in a simple and rapid manner, even in the sample containing the three species simultaneously. These data suggest that the multiplex PCR strategy would make it possible to avoid the cumbersome and time-consuming procedures of morphological analysis for the definitive identification of scuticociliates.

• 한국어병학회지
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• 제19권2호
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• pp.87-97
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• 2006

2004년 12월부터 2005년 4월까지 양식넙치에서 분리된 스쿠티카 섬모충 P. dicentrarchi를 넙치 치어 3 ㎝ 그룹과 5 ㎝ 그룹에 인위 감염시킨 후 감염에 따른 폐사율 등의 병원성을 조사하였다. 소형수조에 스쿠티카충 P. dicentrarchi를 접종시킨 결과 수조저면에서 활발히 증식하였으며 접종 후 6일째부터 1.4 × 103 cell ㎖-1～2.5 × 103 cell ㎖-1범위로 ㎖당 2,000 cell 내외의 밀도로 증식하였다. 반면에 중층인 경우는 ㎖당 300 cell 이하의 낮은 밀도를 유지하였다.수조저면에 P. dicentrarchi충을 증식시킨 후 넙치치어를 방양한 결과 3 ㎝ 그룹과 5 ㎝ 그룹 모두 배양시킨 충에 감염되었으며, 충 감염에 의한 폐사는 3 ㎝ 그룹인 경우 치명적이었다. 접종 후 5일째부터 폐사가 시작되었으며, 28일 만에 95.6%의 높은 폐사율을 보였다. 대조구에서는 실험기간 동안 4.4% 폐사율을 보였으나 스쿠티카충은 검출되지 않았다. 5 ㎝ 그룹은 접종 후 18일째에 처음으로 폐사되기 시작하여 3 ㎝ 그룹에 비해 폐사 진행이 현저히 늦었다. 이 그룹은 스쿠티카충의 인위 접종 후 28일 동안 71%가 폐사하여 3 ㎝ 그룹에 비해 폐사율이 낮았다. 5 ㎝ 그룹의 대조구에서는 실험기간 동안 폐사가 없었으며 스쿠티카충의 감염도 없었다.모든 실험구의 폐사어에서 인위 감염시킨 충을 재분리하여 SSU rRNA에 대한 유전학적 분석결과, 처음 접종시킨 P. dicentrachi와 각 실험구별 재분리된 섬모충의 SSU rRNA 유전자가 일치하여 동일 섬모충에 의한 감염임이 확인되었다.

• 한국어병학회지
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• 제22권2호
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• pp.97-105
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• 2009

본 연구는 양식넙치에 높은 폐사율과 성장저하를 일으키는 스쿠티카섬모충 Miamiensis avidus (syn. Philasterides dicentrarchi)의 성장과 병원성에 미치는 온도의 영향을 알아보았다. in vitro 배양조건에서 이분열에 걸리는 시간은 $5{^{\circ}C}$에서 61.82시간, $10{^{\circ}C}$에서 26.32시간, $15{^{\circ}C}$에서 21.14시간, $20{^{\circ}C}$에서 16.86시간 그리고 25℃에서 는 16.21시간이었다. 최고로 배양 가능한 충수는 $1.54-1.75{\times}10^{5}$/ ml의 범위로 $10{^{\circ}C}$이상의 모든 온도범위에서 유사했다. 넙치(평균 8.34 cm, 4.33g)마리당 $1{\times}10^{2}$/ ul, $1{\times}10^{6}$/ ul, $1{\times}10^{4}$/ ul 과 $1{\times}10^{5}$/ ul 으로 스쿠티카충을 복강에 감염시킨 후 $10{^{\circ}C}$, $15{^{\circ}C}$와 $20{^{\circ}C}$에서 사육하면서 폐사를 관찰하는 실험을 2회 실시한 결과, 수온 $10{^{\circ}C}$에서는 폐사가 현저히 낮았고 온도가 높아질수록 폐사가 증가하였다. 또한 감염농도가 높아질수록 폐사는 증가하였다. 그러므로 스쿠티카섬모충 M. avidus는 온도가 높을수록 증식이 잘 되며 또한 수온이 높아질수록 온도의존적으로 폐사가 증가하므로 폐사를 경감시키기 위해서는 고수온기의 수온관리가 중요한 것으로 사료된다.

• 한국어병학회지
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• 제34권1호
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• pp.47-53
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• 2021

Scuticociliates are one of the serious parasitic threats faced by the marine aquaculturists worldwide. To date, Uronema nigricans, Philasterides dicentrarchi, Miamiensis avidus, Uronema marinum, and Pseudocohnilembus persalinus have been reported as the important culprit species causing scuticociliatosis in fish. The present paper reports the finding of an additional scuticociliate isolate from the gill of diseased olive flounder Paralichthys olivaceus in Korea. Based on the morphological characteristics, a scuticociliate in this study was identified as Paranophrys marina. Phylogenetic analysis placed P. marina as a sister lineage to three species of Pseudocohnilembus and Mesanophrys carcini within the order Philasterida.