Anticoagulant activities were tested for the fifteen kinds of medicinal plants by measuring activated partial thromboplastin time (aPTT). Of them five kinds or species (Artemisia princeps, Sanguisorba officinalis, Artemisia apiacea, Eclipa alba, Schizonepeta tenuifolia) were selected and fractionated for the preparation of acidic polysaccharides. They were extracted with water by refluxing and the extracts were precipitated with ethanol. The precipitates were separated based on charge using a DEAE-Sephadex. The low salt and high salt fractions were sulfated with anhydrous pyridine and chlorosulfonic acid complex. In vitro anticoagulant activities of sulfated polysaccharides were tested by measuring aPTT, prothrombin time (PT), and factor Xa clotting time using normal human plasma. No relationship was found between the amount of uronic acids and anticoagulant activities, but the sulfated ones show the increase of activities. In vivo anticoagulant properties of the sulfated polysaccharide from Artemisia apiacea were also tested by the intraveneous administration of three different doses (3,5 and 10 mg/kg) to rats. APTT and PT were increased significantly and the action of factor Xa and thrombin mediated through antithrombin III were inhibited slightly.
To search of more selective vasculogenic relaxation activity, the antioxidant activity of silkworm male pupae was determined by measuring its radical scavenging effect on 1, 1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radicals, and anticoagulant activity of them was measured clotting time in both activated partial thromboplastin time (aPTT). Because, most of cGMP-enhancing agent such as, sildenafil, promotes thrombin-induced platelet aggregation, developed unexplained thrombic conditions including heart attack. To search more suitable and safe drug for vasculogenic relaxation, we purified silkworm pupae male extract. The ethyl acetate extract of silkworm male pupae showed strong scavenging activity in both DPPH and aPTT anticoagulant activity. The antioxidant activity potential of the individual fraction was in order of ethyl acetate > n-butanol > chloroform > n-hexane. The ethyl acetate soluble fraction exhibiting strong anti-oxidant and anticoagulant activity was further purified by repeated silica gel and Sephadex LH-20 column chromatography. Cholesterol was isolated as one of the active principles from ethyl acetate fraction, together with, minor portion, ${\beta}-sitosterol$.
Glycosaminoglycans (GAGs) were isolated from the porcine testis, and their immuno-modulating and anticoagulant activity was investigated. From anion exchange chromatography (Dowex Macropolous Resin) used for further isolation of porcine testis GAGs (PT-GAGs), two fractions (PT-GAG-1.5 and PT-GAG-16) eluted by different salt concentration were obtained. In immunomodulating activity test, PT-GAG-1.5, but not PT-GAG-16, significantly enhanced the growth of murine peritoneal macrophages. In addition, treatment with PT-GAG-1.5 induced the production of cytokines, interleukin-1$\beta$ (IL-1$\beta$), interferon-${\gamma}$ (IFN-${\gamma}$) and tumor necrosis factor-$\alpha$ (TNF-$\alpha$), from murine microphages. Unexpectedly, both of PT-GAGs had no effect on the growth of murine splenocytes. The anticoagulant activity of PT-GAG-1.5 and PT-GAG-16 was examined by activated partial thromboplastin time (aPTT) assay and thrombin time (TT) assay. Both of PT-kGAGs significantly increased the clotting times of aPTT and TT in a dose-dependent manner. The anticoagulant activity of PT-GAG-16 was found to be higher than that of PT-GAG-1.5. These results suggest that PT-GAGs possess biological activities such as immunomodulating activity and anticoagulant activity.
Cyclopia subternata is a medicinal plant commonly used in traditional medicine to relieve pain. Here, the anticoagulant effects of scolymoside, an active compound in C. subternata, were examined by monitoring activated partial thromboplastin time (aPTT), prothrombin time (PT), and the activities of thrombin and activated factor X (FXa). The effects of scolymoside on plasminogen activator inhibitor type 1 (PAI-1) and tissue-type plasminogen activator (t-PA) expression were evaluated in tumor necrosis factor (TNF)-α-activated human endothelial cells. Treatment with scolymoside resulted in prolonged aPTT and PT and the inhibition of thrombin and FXa activities and production. In addition, scolymoside inhibited thrombin-catalyzed fibrin polymerization and platelet aggregation. Scolymoside also elicited anticoagulant effects in mice, including a significant reduction in the PAI-1 to t-PA ratio. Collectively, these findings indicate that scolymoside possesses anticoagulant activities and could be developed as a novel anticoagulant.
We investigated the effects of plant vinegar on platelets and blood coagulation system. Plant vinegar inhibited in vitro platelet aggregation in a concentration dependent manner, when platelets were activated by thrombin and collagen. In addition, plant vinegar showed inhibitory effects on the serotonin secretion induced by thrombin in a concentration dependent manner. However, treatment with plant vinegar to platelets did not induce any cytotoxicity, as determined by the release of lactate dehydrogenase. Plant vinegar did not change the coagulation parameters such as activated partial thromboplastin time (aPTT) and prothrombin time (PT) using rat citrated plasma. In vivo study revealed that, treatment with plant vinegar prolonged the bleeding time from mouse tail. All these results suggest that plant vinegar might improve blood hemostasis mediated via anti platelet activities.
The in vitro anticoagulant and fibrinolytic activities of crude extract from insects which have been used as traditional medicines. The extracts of Formica, Huechys and Eupolyph-aga/Steleophaga prolonged activated partial thromboplastin time and thrombin time compared to the value of the control. The fibrinolytic activity of insect extracts was also tested by fibrin plate method. We found that the extracts of Cicadae Periostracum, Eupolyphaga/Steleophdga, Mantidis $O{\ddot{o}}otheca$ and Huechys directly could hydrolyze the fibrin clot without the activation of plasminogen by plasminogen activators.
Ryu, Ri;Jung, Un Ju;Kim, Hye-Jin;Lee, Wonhwa;Bae, Jong-Sup;Park, Yong Bok;Choi, Myung-Sook
Preventive Nutrition and Food Science
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제18권3호
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pp.181-187
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2013
Artemisia princeps Pampanini (AP) has been used as a traditional medicine in Korea, China and Japan and reported to exhibit various beneficial biological effects including anti-inflammatory, antioxidant, anti-atherogenic and lipid lowering activities; however, its antiplatelet and anticoagulant properties have not been studied. In the present study, we evaluated the effects of an ethanol extract of Artemisia princeps Pampanini (EAP) and its major flavonoids, eupatilin and jaceosidin, on platelet aggregation and coagulation. To determine the antiplatelet activity, arachidonic acid (AA)-, collagen- and ADP (adenosine diphosphate)-induced platelet aggregation were examined along with serotonin and thromboxane A2 ($TXA_2$) generation in vitro. The anticoagulant activity was determined by monitoring the activated partial thromboplastin time (aPTT) and prothrombin time (PT) in vitro. The data showed that EAP and its major flavonoids, eupatilin and jaceosidin, significantly reduced AA-induced platelet aggregation and the generation of serotonin and $TXA_2$, although no significant change in platelet aggregation induced by collagen and ADP was observed. Moreover, EAP significantly prolonged the PT and aPTT. The PT and/or aPTT were significantly increased in the presence of eupatilin and jaceosidin. Thus, these results suggest that EAP may have the potential to prevent or improve thrombosis by inhibiting platelet activation and blood coagulation.
본 연구는 2007년 1월부터 2015년 12월까지 본원에서 쯔쯔가무시병으로 진단을 받고 치료 중인 상태에서 뇌경색이 발생하거나, 뇌경색이 생겨 입원 치료를 받던 중 쯔쯔가무시병이 발견된 16명의 환자를 대상으로 하였다. 급성기 뇌경색의 진단은 뇌자기공명영상 및 뇌자기공명혈관영상으로 하였으며 쯔쯔가무시병의 진단은 PCR (Polymerase chain reaction)로 하였다. 일반적인 뇌경색과 쯔쯔가무시병을 동반한 뇌경색의 차이점을 구별하기 위해 내원시 혈압과 체온을 측정하여 보았다. 일반적으로 급성기 뇌경색에서는 혈압이 올라가는데 흥미롭게도 본 연구에서는 수축기 혈압이 130mmHg 미만인 환자가 12명으로 급성기 뇌경색에서 흔히 보이는 혈압 양상과는 다른 모습을 보였다. 쯔쯔가무시병을 동반한 뇌경색의 특징을 알아보기 위해 발병 위치 및 단일 혹은 다발성 뇌경색 여부를 확인하여 보았는데, 앞순환 동맥 영역의 뇌경색 발생 환자가 13명이었으며 뒤순환 동맥 영역의 뇌경색 발생 환자는 3명이었다. 응고장애를 진단하기 위해 트롬보플라스틴시간(Prothrombin Time, PT), 활성화부분트롬보플라스틴시간(activated partial thromboplastin time, aPTT), D-dimer, 섬유소원(fibrinogen), 섬유소분해산물(fibrin degradation product, FDP)를 기록하였다. 뇌경색시 일반적으로 수치가 증가하는 것으로 알려진 D-dimer의 경우 13명의 환자에서 큰 폭의 증가 소견을 보였다. 섬유소분해산물(FDP)는 15명의 환자에서 큰 폭의 증가 소견을 보였다. 쯔쯔가무시병의 병태생리학적 기전은 혈관염으로 알려져 있는데 이로 인한 대뇌혈관의 내피세포 손상 및 증식이 있을 수 있고 그 과정에서 응고장애가 동반되어 뇌경색이 발생할 수 있다. 또는 내피세포 손상 및 증식이 없더라도 혈관염으로 인한 혈관연축이 발생하여 혈관수축이 오며 뇌경색이 발생 할 수도 있다.
목적: 관절경 수술을 시행 받은 환자의 항응고 요법이 응고능에 미치는 영향과 대표적 항응고 약물 사이에 차이가 있는지 알아보기 위하여 항응고 약물 중 두 종류를 선택하여 사용한 환자들의 혈액 응고 검사를 수술 전후에 시행하여 수술 전 후 및 두 약물 간에 차이가 나타나는지에 대해 알아보았다. 대상 및 방법: 관절경 수술을 시행한 47예의 슬관절 혹은 고관절 환자를 대상으로 하였으며 환자군을 무작위로 enoxaparin과 rivaroxaban을 사용한 두 그룹으로 나누어 수술 전 및 수술 후 5일째 응고 검사를 시행하여 수술 전후 및 두 약물간의 결과를 비교하였다. 결과: 수술 전 시행한 응고 검사에서는 두 그룹간의 유의한 차이가 없었으나(P>0.05) 수술 후 5일째 시행한 응고 검사에서는 prothrombin time-international normalized ratio (PT-INR), activated partial thromboplastin time (aPTT)에서 증가 소견을 보였고 특히 rivaroxaban 환자군의 수치가 증가한 것으로 나타났다(P<0.05). 결론: 관절경 수술의 약물을 통한 항응고 요법은 혈액 검사를 통한 결과에서 출혈 경향 면에서 안전한 범위에서 수술전과 비교하여 통계적으로 유의한 차이를 보였으나 rivaroxaban을 사용한 환자 군에서 응고능의 정상 범위를 넘어서는 환자가 있어 rivaroxaban의 사용에 주의를 요할 것으로 생각된다.
본 연구는 성인 흡연자를 대상으로 NKF 정제를 단기 (4,000 U를 1회 투여)와 장기(2,000 U를 매일 1회 4주 투여) 실험을 통하여 NKF의 혈전용해 개선 및 항 동맥경화효과를 검증하였다. 임상대상자는 20세${\sim}$31세의 건강한 성인으로 하루 흡연량이 하루 1갑 이상인 고혈압 또는 항 혈전증 약을 섭취하지 않는 사람을 선정하여 무작위로 placebo군과 NKF군으로 분류하여 이중맹검법으로 실험을 하였다. NKF와 placebo 정제는 (주)HK바이오텍에서 제공하였다. 단기시험은 placebo군(10명)과 NKF군(29명)을 대상으로 NKF 섭취전과 섭취 1, 2, 4시간에 혈전용해효과를 검토하였고, 장기시험은 placebo군 10명과 NKF군 15명에게 NKF 섭취 전과 섭취 후 매주 혈전용해효과 및 혈압개서효과를 검토하였다. 단기시험에서 fibrin clot 용해능은 placebo군에 비해 NKF군에서는 섭취 후 2시간에 유의적으로 증가하여 4시까지 그 활성이 유지되었다. ECLT도 NKF 섭취 후 시간이 경과함에 따라 placebo군에 비해 현저하게 감소되었으며 aPTT는 섭취 후 4시에 섭취 전에 비해 12.5% 지연시키는 것으로 나타났다. 장기시험에서는 수축기와 이완기 혈압이 placebo군에서는 섭취 4주에 섭취 전에 비해 2.8%와 3.5%로 증가하였고 NKF군에서는 각각 1.3%와 1.0% 감소하여 두 군 모두에서 유의차는 없었다. Fibrin clot 용해능은 NKF군에서 1주에 증가하여 4주에도 높은 수준으로 유지되었고, ECLT는 NKF군은 섭취 전에 비해 1주에 현저하게 감소되어 4주 후까지 유사한 수준으로 유지하여 NKF의 효과를 볼 수 있었지만, placebo군에서는 효과가 없었다. 따라서 NKF는 PT와 aPTT를 개선하여 전 처리 기간 placebo군에 비해 혈액응고시간을 유의적으로 지연시켰다. 또한 NKF 섭취는 TG/HDL-cholesterol을 감소시켜 항 동맥경화 지수를 상승시키는 효과가 있었다. 이상의 결과로 미루어 볼 때 단기와 장기 임상시험에서 NKF는 fibrin clot 용해능을 증가시키고 ECLT를 감소시키며 PT와 aPTT를 지연시켜 혈전 용해능을 상승시키며, TG/HDL-cholesterol을 낮추어 혈중 지질수준을 개선하고 동맥경화를 예방하는데 유익하게 작용할 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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