MLS (macrolide-lincosamide-streptogramin B) 항생제 내성인자 단백질인 Erm 단백질들은 아미노산 서열 중 그 동일성과 유사성이 높아 구조적으로도 동등한 단백질의 한 집단을 형성한다. 최근 X-ray crystallography에 의해 구조가 결정된 ErmC\` 및 ErmAM 단백질의 구조에 근거하여 ErmSF 단백질도 catalytic domain과 substrate binding domain으로 구분하였고 N-terminal end에 존재하는 catalytic domain의 대량생산을 다양한 pET 발현 vector를 사용하여 시도하였다. 그리고 catalytic domain을 coding하는 DNA 절편은 세 종류를 사용하였다: DNA 절편 1은 Met 1부터 Glu 186까지를 coding하고 DNA 절편 2는 Arg 60부터 Glu 186까지의 정보를 가진 DNA이고 DNA 절편 3은 Arg 60부터 Arg 240까지를 encoding하는 DNA이다. 사용된 다양한 발현 vector중에서 pET19b는 DNA 절편 3, pET23b는 DNA 절편 1과 2를 성공적으로 대량생산하였다. 그러나 대량생산된 catalytic domain들은 불용성 단백질 집합체인 inclusion body를 형성하였다. ErmSF catalytic domain들의 용해성 단백질의 생산을 위하여 chaperone GroESL과 Thioredoxin의 동시 발현 및 배양온도를 $22^{\circ}C$로 낮추어 시도했으나 대량 발현된 단백질의 용해에는 도움을 얻지 못하였다.
De Las Rivas Blanca;Carrascosa Alfonso V.;Munoz Rosario
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제17권3호
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pp.408-413
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2007
Putrescine has a negative effect on health and is also used as an indicator of quality on meat products. We investigated the genes involved in putrescine production by Serratia liquefaciens IFI65 isolated from a spoiled Spanish dry-cured ham. We report here the genetic organization of its ornithine decarboxylase encoding region. The 5,506-bp DNA region showed the presence of three complete and two partial open reading frames. Putative functions have been assigned to several gene products by sequence comparison with proteins included in the databases. The second gene putatively coded for an ornithine decarboxylase. The functionality of this decarboxylase has been experimentally demonstrated by complementation to an E. coli defective mutant. Based on sequence comparisons of some enterobacterial ornithine decarboxylase regions, we have elaborated a hypothetical pathway for the acquisition of putrescine biosynthetic genes in some Enterobacteriaceae strains.
A gene, ClCDA, encoding chitin deacetylase from Colletotrichum lindemuthianum, was optimized according to the codon usage bias of Pichia pastoris and synthesized in vitro by overlap extension PCR. It was secretorily expressed in P. pastoris GS115 using the constitutive expression vector pHMB905A. The expression level reached the highest with 110 mg/l culture supernatant after 72 h of methanol induction, which comprised 77.27 U/mg chitin deacetylase activity. SDS-PAGE, mass spectrometry, and deglycosylation assays demonstrated that partial recombinant protein was glycosylated with an apparent molecular mass of 33 kDa. The amino acid sequences of recombinant proteins were confirmed by mass spectrometry.
Arithmetic unit speed depends strongly on the algorithms employed to realize the basic arithmetic operations.(add, subtract multiply, and divide) and on the logic design. Recent advances in VLSI have increased the feasibility of hardware implementation of floating point arithmetic units and microprocessors require a powerful floating-point processing unit as a standard option. This paper describes the design of floating-point multiplier for IEEE 754-1985 Single-Precision operation. Booth encoding algorithm method to reduce partial products and a Wallace tree of 4-2 CSA is adopted in fraction multiplication part to generate the $32{\times}32$ single-precision product. New scheme of rounding and sticky-bit generation is adopted to reduce area and timing. Also there is a true sign generator in this design. This multiplier have been implemented in a ALTERA FLEX EPF10K70RC240-4.
Lo, Caleb K.;Vishwanath, Sriram;Heath, Jr., Robert W.
Journal of Communications and Networks
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제10권2호
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pp.194-203
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2008
This paper considers the multi-input multi-output (MIMO) relay channel where multiple antennas are employed by each terminal. Compared to single-input single-output (SISO) relay channels, MIMO relay channels introduce additional degrees of freedom, making the design and analysis of optimal cooperative strategies more complex. In this paper, a partial cooperation strategy that combines transmit-side message splitting and block-Markov encoding is presented. Lower bounds on capacity that improve on a previously proposed non-cooperative lower bound are derived for Gaussian MIMO relay channels.
We propose ROI(region of interest) image coding application to still image using PSBS(partial significant bitplane shift)method combined with human face region detecting system. PSBS is an encoding algorithm for ROI image coding in JPEG2000, and takes advantages of both generic scaling based method and maximum shift method defined in JPEG2000. The Powerful advantages of PSBS are able to adjusting image quality in ROI and background flexibly, and support arbitrarily shaped ROI coding without coding the shape. In this letter, we show how to compress an image for human face region using PSBS method combined with human face region detecting system, and propose its application.
Multiplication is a fundamental arithmetic operation in many digital signal processing (DSP) and communication algorithms. The group CSD (GCSD) multiplier was recently proposed based on the variation of canonical signed digit (CSD) encoding and partial product sharing. This multiplier provides an efficient design when the multiplications are performed only with a few predetermined coefficients (e.g., FFT). In this paper, it is shown that, by exploiting the characteristics of the filter coefficients, GCSD multipliers can be used for the efficient implementation of time-multiplexed FIR filters.
Adhikari, Mahesh;Kim, Sang Woo;Lee, Hyang Burm;Lee, Youn Su
한국균학회지
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제49권1호
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pp.11-19
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2021
In 2017, Talaromyces variabilis was isolated during a survey of fungal diversity in field soils in Korea. This isolate was described based on its morphological and molecular characteristics and it was identified molecularly using the partial 18S-ITS1-5.8S-ITS2-28S rDNA region and calmodulin (CaM)-encoding gene sequence data. Thus, this study reported morphological and multigene sequence characterization of T. variabilis.
Cheng, Guangyan;He, Liying;Sun, Zhibin;Cui, Zhongli;Du, Yingxiang;Kong, Yi
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제25권9호
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pp.1449-1459
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2015
A novel proteolytic enzyme with fibrinolytic activity, FSP3, was purified from the recently isolated Streptomyces sp. P3, which is a novel bacterial strain isolated from soil. FSP3 was purified to electrophoretic homogeneity by ammonium sulfate precipitation, anion exchange, and gel filtration. FSP3 is considered to be a single peptide chain with a molecular mass of 44 kDa. The maximum activity of the enzyme was observed at 50℃ and pH 6.5, and the enzyme was stable between pH 6 and 8 and below 40℃. In a fibrin plate assay, FSP3 showed more potent fibrinolytic activity than urokinase, which is a clinical thrombolytic agent acting as a plasminogen activitor. The activity was strongly inhibited by the serine protease inhibitor PMSF, indicating that it is a serine protease. Additionally, metal ions showed different effects on the activity. It was significantly suppressed by Mg2+ and Ca2+ and completely inhibited by Cu2+, but slightly enhanced by Fe2+. According to LC-MS/MS results, its partial amino acid sequences are significantly dissimilar from those of previously reported fibrinolytic enzymes. The sequence of a DNA fragment encoding FSP3 contained an open reading frame of 1287 base pairs encoding 428 amino acids. FSP3 is a bifunctional enzyme in nature. It hydrolyzes the fibrin directly and activates plasminogen, which may reduce the occurrence of side effects. These results suggest that FSP3 is a novel serine protease with potential applications in thrombolytic therapy.
Paenibacillus woosongensis의 유전체 부분 염기서열로부터 유추된 xylanase 유전자를 PCR 증폭하여 대장균에 클로닝하였다. Xylanase 유전자는 211 아미노산으로 구성된 단백질을 코드하며 633 뉴클레오티드로 이루어졌다. 아미노산 잔기배열을 분석한 결과 xylanase는 glycosyl hydrolase family 11에 속하며 Paenibacillus의 xylanase와 85-89% 상동성을 보였다. Xylanase 유전자를 T7 promoter로 과잉발현한 결과 그 발현량이 높지 않았으며, 균체내 외에서 모두 효소활성이 관찰되었다. 재조합 대장균의 균체파쇄상등액을 사용하여 효소 반응특성을 조사한 결과 pH 5.5와 $60^{\circ}C$에서 최대 반응활성을 보였다. 한편 xylanase의 기질로 xylan과 xylooligosaccharides를 사용하였을 때 xylose와 xylotriose가 주된 최종 반응산물로 관찰되었으며 xylobiose는 분해하지 못하였으나 이보다 중합도가 큰 xylooligosaccharides는 분해하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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