눈꽃동충하초는 국내에서 몇 가지 학명으로 불려지고 있으나 그 중 오명이 포함되어 있음으로 인해 학자들간에 논란이 되고 있으며, 균학도들에 의해서 잘못 인용되는 사례가 빈번함에 따라 본 시험에서는 균을 재 동정코자 하였다. 수집 균은 담황색 분생자병속을 1~5여개 형성하며 그 끝마디에는 다량의 분생포자가 발생되었다. MA배지 상에서는 $25^{\circ}C$, 14일간 직경 2.1 cm로 더딘 생장을 보이며, colony의 색상은 앞면은 옅은 담황색, 뒷면은 연노랑 색이며, 분생포자는 타원형 혹은 난형으로 2.9~6.6$\times$l.5~2.5$\mu\textrm{m}$이며 분생포자를 지탱하고 있는 phialide는 부풀고 팽창한 형태로 3~4개가 형성되며 4.0~6.6$\times$2.0~2.2 $\mu\textrm{m}$이다. 본 균주는 Samson분류에 의거하여 주요 특성이 일치하여 Paecilomyces tenuipes(Peck) Samson 균과 동일 종으로 인정되었다.
Park Nam Sook;Lee Kwang Sik;Lee Sang Mong;Je Yeon Ho;Park Eunju;Sohn Hung Dae;Jin Byung Rae
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제10권1호
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pp.35-43
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2005
We describe here the complete nucleotide sequence and the exon-intron structure of the Cu,Zn superoxide dismutase (SOD1) gene of Paecilomyces tenuipes and Paecilomyces sp. The SOD1 gene of P. tenuipes spans 966 bp, and consisted of three introns and four exons coding for 154 amino acid residues. Three unambiguous introns in P. tenuipes separate exons of 13, 332, 97, and 20 bp, all exhibiting exon sizes identical to Cordyceps militaris SOD1 gene. The SOD1 gene of Paecilomyces sp. contains 946 bp and consisted of four introns and five exons coding for 154 amino acid residues. Five exons of Paecilomyces sp. SOD1 are composed of 13, 180, 152, 97, and 20 bp. Interestingly, this result showed that the total length of exons 2 (180 bp) and 3 (152 bp) of Paecilomyces sp. SOD1 is same to exon 2 length (332 bp) of C. militaris SOD1 and P. tenuipes SOD1. The deduced amino acid sequence of the P. tenuipes SOD1 showed $95\%$ identity to C. militaris SOD1 and $78\%$ to Paecilomyces sp. SOD1. Phylogenetic analysis confirmed that the C. militaris SOD1, P. tenuipes SOD1 and Paecilomyces sp. SOD1 are placed together within the ascomycetes group of fungal clade.
Paecilomyces tenuipes is one of the famous Chinese medicinal entomopathogenic fungi that parasite in the lavae of silkworm. A cytotoxic compound, 4$\beta$-acetoxyscirpendiol (ASD) was isolated from a methanolic extracts of Paecilomyces tenuipes. The ASD compound belongs to scirpenol subfamily of trichothecene mycotoxin. In a continuation of the elucidation of the mechanism of ASD, we report here the evidences of induction of apoptosis by ASD in human Jurkat T cell line. In MTT reduction assay for monitoring cell viability, ASD showed strong toxicity. The 50 percent inhibitory concentrations of ASD against human T lymphoid Jurkat cell was 59.5 ng/$m\ell$. Phosphatidylserine externalization was increased by ASD at 3 and 6 hrs when compared with that of 6 hrs in the cell line showing in a time-dependent manner. When whole lysates of cells treated with ASD were subjected to western blot assay, 113 kDa poly(ADP-ribose) polymerase (PARP) was significantly cleaved to 89 kDa fragment. Time-dependent DNA fragmentation was also observed when Jurkat T cells were treated with ASD at 100 ng/$m\ell$ for 6 hrs and 18 hrs at the ratios of 8.5% and 15.0%, respectively. From these data, Jurkat T lymphocytes treated with ASD from Paecilomyces tenuipes underwent typical cascades of apoptotic cell death.
본시험은 한국에서 채집되어 강원대학교 동충하초은행(EFCC)에서 보관 중인 눈꽃동충하초의 분포와 배양적 특성을 조사하였다. 눈꽃동충하초는 한국의 산이나 계곡에서 어렵지 않게 채집할 수 있으며 골고루 분포한다. 채집시기는 7~9월로 나타났으며 9월말에 가장 많이 채집할 수 있으며 채집된 눈꽃동충하초의 종은 눈꽃동충하초(P. tenuipes)가 가장 높게 채집되었다. 눈꽃동충하초의 균사배양 최적배지는 PDA배지이며 SDAY와 HMA배지에서도 생장은 가능하며 균사생장에 가장 적합한 온도는 $25^{\circ}C$이며 pH는 6.0~7.0으로 나타났다. 적합한 영양원으로는 탄소원은 dextrose이었으며, 질소원은 tryptone가 가장 우수하였고, 무기염으로는 $KH_2PO_4$에서 가장 고른 성장을 보였다. C/N에서는 20 : 1의 비율이 가장 적합한 것으로 조사되었다.
논꽃동충하초(Paecilomyces tenuipes DGUM 32001)의 자실체를 메탄올로 추출하여 인간 암세포주에 대한 세포독성을 조사하였다. 메탄올 추출물의 암세포주에 대한 세포독성은 매우 우수하였다. 메탄올 추출물의 용매 분획 중, 에틸아세테이트 분획에서 가장 우수한 세포독성을 나타내었으며, HeLa, HeLa S3 및 A-431 암세포주에 대한 $IC_{50}$ 값은 각각 13, 35 및 30 $\mu$ g/ml이었다. 그러나, 이 분획의 HeLa 암세포주에 대한 세포독성은 apoptosis에 의하지 않음을 알 수 있었다. 배양 균사체의 메탄올 추출물은 A-431 암세포주에 대해 우수한 세포독성을 보여주었다.
While studying Bombyx mori "Zipnuae" inoculated with an entomopathogenic fungus, Paecilomyces tenuipes, a mycoparasitic hymenoascomycete with a long neck was isolated from the silkworm rearing room. The fungus was identified as Syspastospora parasitica which has been recognized as a hyperparasite on various moniliaceous hyphomycetes. A descriptive illustration is presented in this study.
본 연구에서는 눈꽃동충하초를 열수추출하여 항전립선암 효능을 조사하였다. 눈꽃동충하초 열수추출물은 PSA 발현을 저해하는 효능이 탁월하였으며, 또한 전립선암세포의 혈관신생인자 중 TIMP-1과 TIMP-2의 발현을 증가시킴과 동시에 MMP-2와 MMP-9의 발현을 감소시켜 혈관신생 작용을 억제하는 것으로 확인되었다. 이상의 결과는 이후 눈꽃동충하초를 이용한 항전립선암 연구에 대한 기초자료로가 될 것이며, 혈관신생억제와 관련된 이외의 경로에 대한 추가 연구가 필요할 것으로 사료된다.
눈꽃동충하초 분생자경속을 형성하는데 액체배양을 이용한 접종원의 배지는 PDB가 가장 우수하였으며, 분생자경속 형성에 유리한 배양온도는 $20^{\circ}C$로 나타났다. 조명은 500lx.에서 가장 양호한 성장을 하였으며 광조사 시간은 18hr이 가장 유리한 분생자경형성 조건을 나타내었다. 알맞은 배지 조건은 번데기와 현미를 50 : 50의 비율에 증류수를 현미에 1 : 1비율로 첨가한 혼합배지에서 높게 나타났다. 번데기배지는 원형상태와 분쇄상태 중에서는 분쇄된 상태에서 번데기배지의 공극률이 높아 균사의 침입이 용이하여 분생자경속 회수율과 균사의 배지내에 형성이 원형상태의 번데기보다 더욱 높게 나타났으며, 균사의 생장도 역시 분쇄한 번데기에서 더욱 빠르고 고르게 나타났다. 종균 접종량은 $15m{\ell}$의 종균을 접종하면 분생자경속이 잘 형성되었다. 눈꽃동충하초 재배에 가장 안정하게 재배하려면 분쇄한 번데기에 현미와 혼합한 배지에 종균 $15m{\ell}$를 접종하여 24 에서 발이를 시킨 후 $20^{\circ}C$의 배양실에서 재배하는 것이 가장 좋은 것으로 나타났다.
Si Young Ha;Woo Seok Lim;Hyeon Cheol Kim;Ji Young Jung;Jae-Kyung Yang
한국버섯학회지
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제22권1호
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pp.8-16
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2024
Paecilomyces tenuipes (P. tenuipes) is a fungus cultivated artificially by South Korean researchers, utilizing rice bran as its substrate. The increased demand for this fungus has not been met with successful cultivation methods for fruiting body production in natural environments. Therefore, we tested the effect on the growth of P. tenuipes using a Solid media based on pests. In this results, the Solid media based on M.alternatus was effective in increasing the growth of P. tenuipes and the content of cordycepin. Moreover, we confirmed the conditions for manufacturing a Solid media based on M.alternatus for P. tenuipes growth. We suggested that the growth-promoting compounds offers valuable insights for optimizing fungal cultivation conditions, thereby enhancing productivity and contributing to a broader understanding of fungal physiology in varying nutritional environments.
In the previous report, we described the in vivo antitumor activity of PJ-4, a protein-polysaccharide fraction prepared from the culture filtrate of an insect-born fungus, Paecilomyces tenuipes DGUM 32001. In the present study, we elucidated the immunomodulating activity of PJ-4 on the BALB/c mouse splenic lymphocytes using flow cytometrical techniques. As a result, PJ-4 was found to stimulate the lymphocytes not only to form lymphoblasts but also to express CD25 (IL-2 receptor $\alpha$ chain) molecule, which is well known as a T cell activation marker. More interestingly, its T cell stimulatory activity was more strongly exerted on CD8$^{+}$ T cells than on CD4$^{+}$ T cells. All these data suggest that PJ-4 exerts its antitumor activity at least partly through stimulation of T cells which play major roles in the cell-mediated immune system.tem.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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