The objectives of this study were to prepare PLGA film onto the surface of the capsular tension ring (CTR) for controlled drug release and investigate the influence of plasticizers, the test drug and measurement conditions on flexibility of the film. Film solutions were prepared by dissolving PLGA, plasticizer (triethyl citrate, TEC or polyethylene glycol, PEG), test drug (dexamethasone) in ethyl acetate then films were prepared by spray coating and evaporation method. Then, the flexibility of PLGA film was determined by elongation test. The addition of plasticizer, PEG or TEC to PLGA copolymer caused a depression of glass transition temperature ($T_g$) and the elasticity of PLGA films increased. The addition of dexamethasone to the PLGA/TEC matrix decreased the flexibility of film. Dimensional factors of the PLGA films such as width and thickness were significantly influenced on flexibility of films and film length and elongation speed had no considerable influence on elongation of films. In this study, sufficiently flexible and stable PLGA films capable of being coated onto CTR could be prepared. This PLGA films can be used as a platform for local drug delivery.
헤스페리딘은 혈관 순환계 보호 효과, 항암 효과, 항산화 효과, 항염증 효과 등의 작용이 있다고 알려져 있다. 본 연구에서는 헤스페리딘을 함유한 poly(lactic-co-glycolic acid)(PLGA) 필름을 조직공학적 세포담체로 이용하고 생체 내/외의 실험을 통하여 헤스페리딘과 염증 반응의 상관관계를 알아보고자 하였다. 세포담체에서의 세포의 증식과 부착을 확인하고자 PLGA/헤스페리딘 필름에 세포(RAW 264.7, NIH/3T3)를 파종하여 1, 3일 후에 MTT와 SEM을 통하여 분석하였다. 또한 항산화 효과와 염증 완화 효과를 알아보고자 ELISA, RT-PCR, FACS 등을 평가한 결과 PLGA 필름보다는 헤스페리딘이 첨가된 PLGA 필름에서 염증 반응이 감소하는 것을 확인하였다. In vivo 실험에서도 헤스페리딘이 PLGA에 의해 유도된 염증세포와 섬유피막 축적을 감소시켜 헤스페리딘의 항염증 효과를 볼 수 있었다. 이 실험 결과 PLGA 필름보다는 PLGA/헤스페리딘 필름에서 염증 반응이 감소함을 확인하였다.
Thermomechanical and surface chemical properties of composite films of poly(D, L-lactic-co-glycolic acid) (PLGA) were significantly improved by the addition of graphene oxide (GO) nanosheets as nanoscale fillers to the PLGA polymer matrix. Enhanced thermomechanical properties of the PLGA/GO (2 wt.%) composite film, including an increase in the crystallization temperature and reduction in the weight loss, were observed. The tensile modulus of a composite film with increased GO fraction was presumably enhanced due to strong chemical bonding between the GO nanosheets and PLGA matrix. Enhanced hydrophilicity of the composite film due to embedded GO nanosheets also improved the biocompatibility of the composite film. Improved thermomechanical properties and biocompatibility of the PLGA composite films embedded with GO nanosheets may be applicable to biomedical applications such as scaffolds.
망막색소상피(retinal pigment epithelium, RPE)는 시기능을 유지하는데 중요한 역할을 하여 RPE의 퇴화는 여러 망막변성질병을 유발한다. 현재 이에 대한 효과적인 치료법이 부족하여 세포 이식에 적합한 지지체를 제작하기 위해, 생분해성 고분자인 PLGA와 항염증, 항산화 작용 등의 기능이 있는 헤스페리딘을 이용하여 하이브리드 필름을 제조하였다. ARPE-19를 파종한 후, MTT 분석법을 이용하여 세포 증식률을 확인하고, 세포의 부착 및 세포 형태를 SEM을 통하여 확인하였다. 또한 RPE 세포의 특이적 유전자 발현정도를 확인하기 위하여 RT-PCR을 수행하였고, RPE65의 발현을 확인하기 위해 AEC 면역화학적 염색을 실시하였다. 그 결과, 헤스페리딘/PLGA 필름은 PLGA보다 RPE 세포의 부착, 증식 및 표현형 유지가 우수함을 확인하였고, 이를 통해 헤스페리딘/PLGA 필름의 망막재생을 위한 조직공학적 담체로써 응용 가능성을 확인할 수 있었다.
조직공학에 이용되는 고분자인 poly(lactic-co-glycolic acid)(PLGA)는 높은 생체적합성 및 생분해성의 장점을 지니지만, 생체활성물질의 결여와 소수성으로 인해 세포의 부착에 어려움을 가진다. 또한 PLGA의 가수분해 과정 중 생성되는 산 분해물이 조직주변의 pH를 감소시켜 염증을 유발하는 단점을 가지고 있다. 따라서 이러한 단점을 보완하기 위한 방법으로 천연고분자인 케라틴을 첨가한 PLGA필름을 제작하였으며 조직공학적 디스크재생에 응용하기 위하여 케라틴/PLGA 복합체필름의 원통형 지지체를 제작하였다. 이 원통형 지지체의 내부는 케라틴/PLGA 필름을 말아서 사용하였으며 외부는 PLGA 다공성 지지체 링을 제작하여 사용하였다. 본 연구에서는 이 지지체에 섬유륜세포를 파종하여 PLGA 필름과 케라틴/PLGA 필름을 이용한 원통형 지지체에서의 세포의 부착 및 생존율을 비교하고 케라틴을 첨가한 지지체의 우수성을 확인하였으며 강도의 우수성 또한 확인하였다. 이 결과는 디스크재생을 위한 지지체의 연구에 유용한 정보를 제공할 것이다.
Gilson Khang;Jeon, Eun-Kyung;John M. Rhee;Lee, Ilwoo;Lee, Sang-Jin;Lee, Hai-Bang
Macromolecular Research
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제11권5호
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pp.334-340
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2003
In order to fabricate new sustained delivery device of nerve growth factor (NGF), we developed NGF-loaded biodegradable poly(L-lactide-co-glycolide) (PLGA, the mole ratio of lactide to glycolide 75:25, molecular weight: 83,000 and 43,000 g/mole, respectively) film by novel and simple sandwich solvent casting method for the possibility of the application of neural tissue engineering. PLGA was copolymerized by direct condensation reaction and the molecular weight was controlled by reaction time. Released behavior of NGF from NGF-loaded films was characterized by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) and degradation characteristics were observed by scanning electron microscopy (SEM) and gel permeation chromatography (GPC). The bioactivity of released NGF was identified using a rat pheochromocytoma (PC-12) cell based bioassay. The release of NGF from the NGF-loaded PLGA films was prolonged over 35 days with zero-order rate of 0.5-0.8 ng NGF/day without initial burst and could be controlled by the variations of molecular weight and NGF loading amount. After 7 days NGF released in phosphate buffered saline and PC-12 cell cultured on the NGF-loaded PLGA film for 3 days. The released NGF stimulated neurite sprouting in cultured PC-12 cells, that is to say, the remained NGF in the NGF/PLGA film at 37 $^{\circ}C$ for 7 days was still bioactive. This study suggested that NGF-loaded PLGA sandwich film is released the desired period in delivery system and useful neuronal growth culture as nerve contact guidance tube for the application of neural tissue engineering.
탈미네랄화된 골분(DBP)은 사이토카인과 같은 다양한 생리활성분자를 가지기 때문에 조직공학분야에서 널리 사용되는 생체재료이다. 본 연구에서는 DBP를 함유한 2차원적 DBP/PLGA 필름이 추간판디스크 세포의 부착, 증식 및 표현형유지에 미치는 영향에 대해 연구하였다. DBP 함량에 따른 DBP/PLGA 필름은 용매증발법으로 제조하였으며 제조된 PLGA 및 DBF/PLGA 필름은 시차주사현미경을 통해 표면을 분석하였다. PLCA 필름은 매끄러운 표면을 가지며, DBF의 함량이 증가할수록 DBP/PLGA 필름의 표면은 거침도가 증가하는 것을 확인하였다. 섬유륜(AF) 및 수핵(NP)세포를 PLGA 및 DBP/PLCA 필름 표면에 파종하여 배양한 후, 세포의 계수 및 SEM 관찰을 통하여 이들의 부착과 증식을 평가하였다. 세포 계수와 SEM 관찰 결과, DBP의 함량이 10 및 20%인 DBP/PLGA 필름에서 높은 초기부착도 및 증식률을 보였다. 세포 계수 결과를 바탕으로 RT-PCR을 통하여 DBF 10%와 20%의 DBP/PLGA 필름에서의 디스크 세포의 특이적 유전자 발현확인 결과, DBF의 함량이 20%인 DBP/PLCA 필름에서 세포의 표현형이 유지되며 지속적인 세포외기질이 발현될 것으로 예상되었다. 따라서 적절한 천연재료의 함량이 세포의 부착과 증식에 더욱 적합하며 이는 조직공학적 디스크 재생의 기초 자료로 사용될 것으로 사료된다.
PLGA는 미국 식품의약품안전청의 승인을 받은 합성고분자로서 생체재료로 널리 쓰이며, 실크피브로인은 세포친화성 및 우수한 기계적 특성으로 세포의 조직성장을 지지한다. 본 연구에서는 PLGA/실크피브로인 0, 10, 20, 40 및 80 wt% 하이브리드 필름을 제조하였고 함량별 슈반세포의 최적환경을 설정하고자 하였다. DSC결과 PLGA/실크피브로인 필름이 in vivo 적용시 열적으로 안정할 것으로 사료되었다. 접촉각 측정을 통해 PLGA/실크피브로인 10 및 20 wt% 필름이 세포 분화 및 증식에 적합할 것으로 사료되며 RT-PCR과 SEM 결과로부터 PLGA에 10 및 20 wt%의 실크피브로인을 함유한 필름에서 슈반세포의 우수한 부착거동 및 형태유지를 확인하였다. 또한 WST 결과 10 wt% 실크피브로인 함량에서 높은 증식률이 확인되었다. 결과적으로 PLGA/실크피브로인 10 및 20 wt% 필름이 세포에 알맞은 상호관계를 제공해 긍정적으로 작용함을 확인하였다.
의료용 금속 임플란트는 우수한 기계적 강도를 바탕으로 결손된 신체 부위의 보강, 대치, 회복을 위해 임상적으로 사용되고 있지만, 낮은 생체적합성 및 독성 때문에 염증 및 후기 혈전증, 재협착의 문제점을 가지고 있다. 이런 단점을 보안하기 위한 다양한 표면처리 기술 중, 본 연구에서는 금속표면에 생분해성 고분자인 poly (lactic-co-glycolic acid) (PLGA)를 이용하여 전기분사 코팅(electrospray coating) 기술을 검토하였다. 전기분사와 용액 인자들의 기초적인 조사를 바탕으로, 코팅 필름의 표면형상은 방울이 날아가는 거리, 용매의 비등점, 방울의 크기에 밀접한 관련이 있다. 고분자 필름의 두께는 분사량에 선형적으로 비례를 하였다. 이 결과는 전기분사된 고분자 방울이 계속적으로 고분자 필름 위에 적층되는 것을 보여준다. 따라서, 전기분사 코팅기술은 스텐트와 같은 의료용 금속 임플란트에 있어서 표면 형상 조절, 나노/마이크로 두께의 단/다중층의 고분자 필름을 제조하는데 적용될 수 있다.
망막조직공학을 위한 생체 재료는 기계적 안정성, 생체적합성, 낮은 분해속도 등을 포함하여 in vivo에서 잠재적인 유용성을 위한 몇 가지 중요한 특징이 입증되어야 한다. 실크 필름 생체재료는 이러한 기능적인 요구에 맞게 디자인되었다. 0, 10, 20, 40, 및 80 wt%의 실크가 함유된 천연합성물질과 하이브리드화된 silk/PLGA 필름을 용매 증발법으로 제조하였다. 1, 2, 및 3일 후에 부착된 세포 수를 확인하기 위해 MTT 분석을 하였고 SEM을 통해 필름에 부착된 세포 모폴로지를 확인하였다. 또한, mRNA 발현정도를 알아보기 위해 retinal pigment epithelitun(RPE) 세포의 프라이머인 RPE65를 사용하여 RT-PCR을 실시하였고 RPE 세포의 특정 단백질인 cytokeratin의 발현을 확인하고 세포의 증식을 비교하기 위해 면역화학염색을 실시하였다. 본 실험을 통해 실크/PLGA 필름에서 20~40 wt% 실크를 함유한 경우에 RPE 세포의 부착과 증식에 가장 좋은 영향을 미치는 것을 확인하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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