Objective: The purpose of this study was to quantify decidual $CD56^+$ and $CD16^+$ NK cell subtype population and to evaluate the correlation between decidual NK cell expression and peripheral $CD56^+$ NK cell expression in women with a history of recurrent abortion and increased peripheral NK cells. Methods: Twenty-nine women with recurrent abortion and elevated peripheral $CD56^+$ NK cell percentage who had chromosomally normal conceptus were included in this study. Thirty-two women with recurrent abortion who had chromosomally abnormal conceptus were used as controls. Distribution of $CD56^+$ and $CD16^+$ NK cells in decidual tissues including implantation sites was examined by immunohistochemical staining. The degree of immunohistochemical staining was interpreted by score and percentage. Results: There was a significant difference in decidual $CD56^+$ NK cell score ($43.6{\pm}24.5$ vs. $23.9{\pm}16.3$ P =0.001) and $CD56^+$ NK cell percentage ($42.1{\pm}11.7$ vs. $33.9{\pm}15.8$ P =0.027) between increased peripheral NK cell group and control group. However, there was no statistically significant difference in decidual $CD16^+$ NK cell score ($18.7{\pm}9.5$ vs. $13.2{\pm}39.4$ P =0.108) and $CD16^+$ NK cell percentage ($24.7{\pm}5.9$ vs. $23.4{\pm}11.7$ P =0.599). There was no significant correlation between decidual NK cell score and peripheral NK cell percentage in increase peripheral NK cell group (peripheral $CD56^+$ NK cell percentage vs. decidual $CD56^+$ NK cell score, r=-0.016, P =0.932, peripheral $CD16^+$ NK cell percentage vs. decidual $CD16^+$ NK cell score, r=0.008, P =0.968). Conclusion: This study shows that $CD56^+$ decidual NK cells are increased in decidua of women exhibiting a history of recurrent abortion with increased $CD56^+$ peripheral NK cell. There was no significant correlation between decidual and peripheral NK cell increment in increase peripheral NK cell group. This study suggests the possibility that decidual NK cells may play an important role in the immune mechanism of recurrent abortion.
The feasibility of using ammonium (${NH_4}^+$) and potassium ($K^+$)-loaded zeolite (NK-Z) as a slow-release fertilizer to control nitrogen and potassium supply was investigated in this study. The growth responses, which were determined in terms of shoot length, shoot fresh weight, and fresh fruit weight, were greater in plants treated with NK-Z than in those treated with chemical fertilizers (CF) after 18 weeks of transplantation. The total fruit weight per plant in treated with NK-Z as the basal and additional fertilizer (ZBAF) was 14.89% higher than that of CF. The nitrogen and potassium contents in NK-Z amended soils were higher than those in CF amended soils in the final stage of plant growth. The ammonium nitrogen ($NH_4$-N) concentration in ZBAF amended soils was 63.41% higher than that in CF amended soils.
Natural killer (NK) cells play an important role in anti-tumor immunity. Interleukin (IL)-18 is an immunoregulatory cytokine that induces potent NK cell-dependent anti-tumor responses when administrated with other cytokines. In this study, we explored the effects of combining IL-18 and IL-2 on NK cytotoxicity as well as expression levels of the NK cell receptor NKG2D in vitro. Freshly isolated PBMCs were incubated for 48 h with IL-18 and IL-2, then CD107a expression on $CD3^-CD56^+$ NK cells was determined by three-colour flow cytometry to evaluate the cytotoxicity of NK cells against human erythroleukemia K562 cells and human colon carcinoma HT29 cells. Flow cytometric analysis was also employed to determine NKG2D expression on NK cells. The combined use of IL-18 and IL-2 significantly increased CD107a expression on NK cells compared with using IL-18 or IL-2 alone, suggesting that the combination of these two cytokines exerted synergistic enhancement of NK cytotoxicity. IL-18 also enhanced NKG2D expression on NK cells when administered with IL-2. In addition, blockade of NKG2D signaling with NKG2D-blocking antibody attenuated the up-regulatory effect of combining IL-18 and IL-2 on NK cytolysis. Our data revealed that IL-18 synergized with IL-2 to dramatically enhance the cytolytic activity of human NK cells in a NKG2D-dependent manner. The results appear encouraging for the use of combined IL-18 and IL-2 in tumor immunotherapy.
Background: Molecular mechanisms of natural killer (NK) cell development from hematopoietic stem cells (HSCs) have not been clearly elucidated, although the roles of some genes in NK cell development have been reported previously. Thus, searching for molecules and genes related NK cell developmental stage is important to understand the molecular events of NK cell development. Methods: From our previous SAGE data-base, Gpnmb (Glycoprotein non-metastatic melanoma protein B) was selected for further analysis. We confirmed the level of mRNA and protein of Gpnmb through RT-PCR, quantitative PCR, and FACS analysis. Then we performed cell-based ELISA and FACS analysis, to know whether there are some molecules which can bind to Gpnmb. Using neutralizing antibody, we blocked the interaction between NK cells and OP9 cells, and checked IFN-${\gamma}$ production by ELISA kit. Results: Gpnmb expression was elevated during in vitro developmental stage and bound to OP9 cells, but not to NK precursor cells. In addition, we confirmed that the levels of Gpnmb were increased at NK precursor stage in vivo. We confirmed syndecan4 as a candidate of Gpnmb's binding molecule. When the interaction between NK cells and OP9 cells were inhibited in vitro, IFN-${\gamma}$ production from NK cells were reduced. Conclusion: Based on these observations, it is concluded that Gpnmb has a potential role in NK cell development from HSCs.
Conditioned media from various sources comprise numerous growth factors and cytokines and are known to promote the regeneration of damaged tissues. Among these, natural killer cell conditioned medium (NK-CdM) has been shown to stimulate collagen synthesis and the migration of fibroblasts during the wound healing process. With a long-term aim of developing a treatment for skin photoaging, the ability of NK-CdM to prevent ultraviolet-B (UV-B) damage was assessed in neonatal human dermal fibroblasts (NHDFs) and an in vitro reconstructed skin model. The factors present in NK-CdM were profiled using an antibody array analysis. Protein and mRNA levels in UV-B exposed NHDFs treated with NK-CdM were measured by western blotting and quantitative reverse transcription-PCR, respectively. The total antioxidant capacity of NK-CdM was determined to assess its ability to suppress reactive oxygen species. The anti-photoaging effect of NK-CdM was also assessed in a 3D reconstituted human full skin model. NK-CdM induced proliferation of UV-B-treated NHDFs, increased procollagen expression, and decreased matrix metalloproteinase (MMP)-1 expression. NK-CdM also exhibited a potent antioxidant activity as measured by the total antioxidant capacity. NK-CdM inhibited UV-B-induced collagen degradation by inactivating MAPK signaling. NK-CdM also elicited potential anti-wrinkle effects by inhibiting the UV-B-induced increase in MMP-1 expression levels in a 3D reconstituted human full skin model. Taken together, the suppression of both UV-B-induced MMP-1 expression and JNK activation by NK-CdM suggests NK-CdM as a possible candidate anti-skin aging agent.
Kim, Kwang-Dong;Choi, Seung-Chul;Lee, Eun-Sil;Kim, Ae-Yung;Lim, Jong-Seok
IMMUNE NETWORK
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v.7
no.3
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pp.133-140
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2007
Background: It is well established that cross talk between natural killer (NK) cells and myeloid dendritic cells (DC) leads to NK cell activation and DC maturation. In the present study, we investigated whether type 1-polarized DC (DC1) matured in the presence of IFN-${\gamma}$ and type 2-polarized DC (DC2) matured in the presence of PGE2 can differentially activate NK cells. Methods: In order to generate DC, plastic adherent monocytes were cultured in RPMI 1640 containing GM-CSF and IL-4. At day 6, maturation was induced by culturing the cells for 2 days with cytokines or PGE2 in the presence or absence of LPS. Each population of DC was cocultured with NK cells for 24 h. The antigen expression on DC was analyzed by flow cytometry and cytokine production in culture supernatant was measured by ELISA or a bioassay for TNF-${\alpha}$ determination. NK cell-mediated lysis was determined using a standard 4h chromium release assay. Results: DC2, unlike DC1, had weak, if any, ability to induce NK cell activation as measured by IFN-${\gamma}$ production and cytolytic activity. DC2 were weakly stimulated by activated NK cells compared to DC1. In addition, IFN-${\gamma}$-primed mature DC appeared to be most resistant to active NK cell-mediated lysis even at a high NK cell/DC ratio. On the other hand, PGE2-primed DC were less resistant to feedback regulation by NK cells than IFN-${\gamma}$-primed mature DC. Finally, we showed that the differential effect of two types of DC population on NK cell activity is not due to differences in their ability to form conjugates with NK cells. Conclusion: These results suggest that different combinations of inflammatory mediators differentially affect the effector function of DC and, as a result, the function of NK cells, eventually leading to distinct levels of activation in adaptive immunity.
Saqib Sharif;Hyeong-Woo Song;Daewon Jung;Hiep Xuan Cao;Jong-Oh Park;Byungjeon Kang;Eunpyo Choi
Journal of Sensor Science and Technology
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v.32
no.6
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pp.418-424
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2023
Natural killer (NK) cells play a crucial role in combating infections and tumors. However, their therapeutic application in solid tumors is hindered by challenges, such as limited lifespan, tumor penetration, and delivery precision. Our research introduces a novel ultrasonic actuation technique to navigate NK cells more effectively in the vascular system, particularly at vessel bifurcations where targeted delivery is most problematic. We use a hemispherical ultrasonic transducer array that generates phase-modulated traveling waves, focusing on an ultrasound beam to steer NK cells using blood-flow dynamics and a focused acoustic field. This method enables the precise obstruction of non-target vessels and efficiently directs NK cells toward the tumor site. The simulation results offer insights into the behavior of NK cells under various conditions of cell size, radiation pressure, and fluid velocity, which inform the optimization of their trajectories and increase targeting efficiency. The experimental results demonstrate the feasibility of this ultrasonic approach for enhancing NK cell targeting, suggesting a potential leap forward in solid tumor immunotherapy. This study represents a significant step in NK cell therapeutic strategies, offering a viable solution to the existing limitations and promising enhancement of the efficacy of cancer treatments.
Objectives: The purpose of this study was to compare the decidual NK cell populations between increased pre-conceptional peripheral NK cell population and normal pre-conceptional peripheral NK cell population in women with a history of recurrent abortion. Methods: Fourteen women with history of recurrent abortion and elevated pre-conceptional peripheral NK cell, above 15% of peripheral lymphocyte population were included in this study. As a control, twelve women with history of recurrent abortion and their peripheral NK cell percentage showed below 15% were included. Distribution of $CD56^+$ and $CD16^+$ NK cells in paraffin embedded decidual tissues including implantation sites were examined by immunohistochemical staining using anti-CD56, 16 monoclonal antibodies. After immuohistochemical staining, the numbers of decidual NK cells were counted and compared these results between study and control groups. Results: There was significant difference in decidual $CD56^+$ NK cell count ($170.1{\pm}132.1$ vs. $68.3{\pm}66.1$, p=0.02) between increased peripheral $CD56^+$ NK cell group and control group. But, there showed no statistically significant correlation between decidual $CD56^+$ NK cell count and peripheral $CD56^+$ NK cell percentage (r=0.229, p=0.261). Also there was no statistically difference decidual $CD16^+$ NK cell count between study and control group ($25.70{\pm}11.72$ vs. $31.17{\pm}22.67$), and no correlation between decidual $CD16^+$ NK cell and peripheral $CD16^+$ NK cell percentage (r=-1.40, p=0.535). Conclusions: This study shows that decidual $CD56^+$ NK cell are significantly increased in decidua of women exhibiting a history of recurrent abortion with increased $CD56^+$ peripheral NK cell. This study suggests that the percentage of peripheral NK cell reflect the expression of decidual NK cell. Consequently, pre-conceptional peripheral blood NK cell population can be the useful marker for detecting the risk of subsequent miscarriage.
Lactococcus lactis NK34, isolated from jeotgal (Korean traditional fermented fish), produces bacteriocin against bovine mastitis pathogens such as Staphylococcus aureus 7, S. aureus 8, Staphylococcus chromogenes 10, S. chromogenes 19, Staphylococcus hominis 9, Streptococcus uberis E290, Enterococcus faecium E372, Streptococcus agalactiae ATCC 13813, Pseudonocardia autotrophia KCTC 9455, and Staphylococcus simulans 78. Lacticin NK34 was inactivated by protease XIV but not by protease IX, protease XIII, proteinase K, $\acute{a}$-chymotrypsin, trypsin, and pepsin. Also, lacticin NK34 was stable over a pH range of 2 to 9 for 4 hr and withstood exposure to temperatures of 30-$100^{\circ}C$ for 30 min. Lacticin NK34 showed bactericidal effects against S. simulans 78. This bacteriocin was purified using ammonium sulfate precipitation, ion exchange chromatography, ultrafiltration, and hydrophobic chromatography. Tricin-SDS-PAGE of purified bacteriocin gave the same molecular weight (3.5 kDa) as nisin. The gene encoding this bacteriocin was amplified by PCR using nisin gene-specific primers. It showed similar sequences to this nisin Z gene. These results indicate that lacticin NK34 is a nisin-like bacteriocin, and could be used as an antimicrobial alternative for livestock.
Natural killer (NK) cells play key roles in innate and adaptive immune defenses. NK cell responses are mediated by two major mechanisms: the direct cytolysis of target cells, and immune regulation by production of various cytokines. Many previous reports show that the complex NK cell activation process requires de novo gene expression regulated at both transcriptional and post-transcriptional levels. Specialized un-translated regions (UTR) of mRNAs are the main mechanisms of post-transcriptional regulation. Analysis of posttranscriptional regulation is needed to clearly understand NK cell biology and, furthermore, harness the power of NK cells for therapeutic aims. This review summarizes the current understanding of mRNA metabolism during NK cell activation, focusing primarily on post-transcriptional regulation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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