Tremella fuciformis, one of edible and medicinal mushroom belonging to Tremellaceae of Basidiomycota, has been known to have a curative effect on sarcoma 180 of mice and lowering high blood pressure of human beings. Neutral salt soluble [0.9% NaCl (Fr. NaCl)], hot water soluble (Fr. HW) and methanol soluble (Fr. MeOH) substances were extracted from Tremella fuciformis. In vitro cytotoxicity tests, Fr. HW and Fr. NaCl were not cytotoxic against cancer cell lines such as NIH3T3, Sarcoma 180, and HT-29 at the concentration of $2000{\mu}g/ml$, while Fr. MeOH was cytotoxic to NIH3T3 and Sarcoma 180. Intraperitoneal injection with Fr. NaCl showed antitumor effect with life prolongation of 53% in mice inoculated with Sarcoma 180. Fr. NaCl improved the immunopotentiation activity of B lymphocyte by increasing the alkaline phosphatase activity by $3.0{\sim}8.1$ folds, respectively. Intraperitoneal injection with Fr. NaCl increased the numbers of peritoneal exudated cells and circulating leukocytes by 7.4 folds and 1.6 folds, respectively, than in the control group. The antitumor effect of T. fuciformis against Sarcoma 180 of mice was likely due to immunopotentiation activity.
Lim, Ji-Ye;Kim, Soon-Hee;Kang, Gil-Son;Rhee, John M.
Polymer(Korea)
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v.32
no.5
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pp.415-420
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2008
The porcine small intestinal submucosa (SIS) without immunorejection responses and hyalunonic acid (HA) can be used as biomaterials. In this study, we tried to design and characterize novel sponge. SIS- HA sponge was prepared by freeze-drying after addition 1wt% HA solution into fabricated SIS sponge. Sponge was crosslinked with 1-ethyl-(3-3-dimethyl aminopropyl) carbodiimide hydrochloride (EDC) solution with 100mM concentration for 24 hrs and lyophilized. SIS-HA sponge was characterized by scanning electron microscopy and fourier transform infrared spectrometer. And water absorption ability of sponge was evaluated. We seeded NIH/3T3 cells in SIS-HA sponge and cellular attachment was assayed by 3-(4,5-dimethylthiazole-2-yl)-2,5-diphenyltertazolium-bromide (MTT) test. We demonstrated presence of HA in SIS-HA sponge from C-O functional group observed by the FT-IR analysis. Moreover, we confirmed low cytotoxicity and high cell viability of the SIS-HA sponges. Therefore, we could expect that SIS- HA scaffolds are applicable for the tissue regeneration.
The cytotoxic and antitumor activity of Herba cratalariae sessiliflorae on cultured NIH 3T3 fibroblast and human oral epitheloid carcinoma cells were evaluated by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazoliumbromide (MTT) colorimetric method. The light microscopic study was carried out to observe morphological changes of cultured mouse fibroblast and human oral epitheloid carcinoma cells (KB). These results were obtained as follows; Ethyl acetate, chloroform and hexane extracts showed a significant cytotoxicity in NIH 3T3 fibroblast, but the other extracts did not show. All extracts exhibited a significant antitumor activity in human oral epitheloid carcinoma cells, but ethanol extract did not show a antitumor activity. Hexane extract showed low cytotoxic effect, but exhibited the most antitumor activity. The MTT absorbance in NIH 3T3 fibroblast was significantly decreased by treatment with chloroform, ethyl acetate and hexane extracts respectively. Human oral epitheloid carcinoma cells was significantly decreasd by treatment with all extracts with the exception of ethanol extract. The difference in MTT absorbance in two cell Types was most remarkable when treated with water and hexane extracts. Cholroform and hexane extracts showed the strongest effect in growth inhibition of human oral epitheloid carcinoma cells. These results indicated that water extract possessed no cytotoxicity and a strong antitumor activity.
모유에 존재하는 유지방구의 막을 구성하는 주된 당단백질인 하나인 lactadherin(과거에는 BA46로 일컬어짐)은 rotavirus에 의한 감염증상을 예방하는 것으로 보고되고 있다. 본 연구에서는 retrovirus vector system을 이용하여 Chinese Hamster Ovary (CHO) 세포에 tetracycline에 의해 발현이 제어되는 promoter 하의 lactadherin 유전자를 전이시킨 후lactadherin이 tetracycline에 의해 발현이 유도되는지의 여부를 실험하였다. 먼저 기초 실험으로 E. coli LacZ유전자를 이용하여 tetracycline에 의한 유도 여부를 조사하였다. Tet-On과 RevTRE-LacZ retrovirus를 co-infection시킨 NIH3T3 세포는 doxycycline (tetracycline 유도체)의 투여량에 비례하여 E. coli LacZ 유전자의 발현 정도가 증가하는 양상을 나타내었는데, 최대의 발현에 대한 doxycycline 농도는 1 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ 이상으로 나타났다. 이 예비실험의 결과를 바탕으로 Tet-On과 RevTRE-Ltd retrovirus vector를 이용하여 사람의 lactadherin 유전자의 유도적 발현을 검정하였는데, CHO 세포에서 lactadherin 유전자의 유도적 발현을 RT-PCR 기법을 이용하여 확인하였다. 표적세포 내에서 외부에서 도입된 유전자가 지속적으로 발현될 경우 심각한 생리적 부작용을 야기시킨다는 사실을 감안할 때, 본 실험의 결과는 유전자 치료와 형질전환동물의 생산에 크게 도움이 될 것으로 예상된다.
Kim, Won-Jung;Kwon, Ji-Young;Cheong, Seong-Ihl;Kim, In-Seop
KSBB Journal
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v.21
no.4
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pp.255-259
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2006
The biodegradable hyaluronic acid(HA) membranes cross-linked with lactide using the crosslinking agent, 1-ethyl-3(3-dimethyl aminopropyl) carbodiimide(EDC) were prepared as a potential biocompatible material for tissue engineering. HA membranes having different mechanical properties were synthesised by varying degree of the mole ratio of lactide to HA, EDC concentration, and crosslinking temperature. HA membranes were degradable in water solution and the degradation became slower with the increasing mole ratio of lactide to HA. HA membranes were sterilized using ethylene oxide gas and extracted with cell culture medium for 24 h at $37^{\circ}C$ and 200 rpm. Cytotoxicity of the extract was tested using NIH/3T3 mouse embryo fibroblast as a model cell. Growth inhibition was not observed in the extracts of HA membranes with the mole ratios of lactide to HA, 5 or 10, and 10% EDC concentration, however 11% of growth inhibition was observed in the extract with the mole ratio of 13. Growth inhibition was not observed in the extracts of HA membranes prepared with 5% EDC or 10% EDC and the mole ratio of lactide to HA, 10, however 12% of growth inhibition was observed in the extract with 20% EDC. Cytotoxicity was not observed in the extracts of HA membranes prepared at varying crosslinking temperatures, $15^{\circ}C,\;25^{\circ}C,\;and\;28^{\circ}C$ with the mole ratio of lactide to HA, 10 and 10% EDC.
Hesperidin (Hes) has known to having some functions like protection of blood circulatory system, anti-tumor effect, antioxidant effect and anti-inflammatory effect. The goal of this study is to demonstrate the relationship between Hes and inflammatory through in vitro and in vivo studies using poly(lactic-co-glycolic acid) (PLGA) film including Hes as a tissue engineered scaffold. To confirm the proliferation of cells on fabricated scaffold, cells (RAW 264.7 and NIH/3T3) were seeded on PLGA/Hes film then analyzed with MTT and SEM at 1 and 3 days after seeding. The results from ELISA, RT-PCR, and FACS for anti-oxident and anti-inflammatory effect showed that inflammatory response of PLGA/Hes film decreased more than that of PLGA film. Also, in vivo result confirmed that inflammatory response by implanted PLGA/Hes film decreased more comparing with PLGA film. This is because of anti-inflammatory effect of Hes reducing induced inflammatory cell and accumulation of fibrous capsule. The results showed that PLGA/Hes film's capacity on reducing inflammatory is better than PLGA film because of Hes.
Kim, Sang-Beom;Lee, Gun-Woo;Kim, Hye-Young;Shim, Mi-Ja;Rho, Hyun-Su;Lee, Hyun-Sook;Lee, Min-Woong;Lee, U-Youn;Lee, Tae-Soo
The Korean Journal of Mycology
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v.34
no.2
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pp.98-104
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2006
Armillaria mellea, one of edible and medicinal mushroom belonging to Tricholomataceae of Basid-iomycota, has been known to have outstanding inhibitive effects on the sarcoma 180 and Erhrlich carcinoma of mice. Neutral salt soluble (0.9% NaCl), hot water soluble and methanol soluble substances (hereinafter referred to Fr. NaCl, Fr, HW and Fr. MeOH, respectively) were extracted from the mushroom. In vitro cytotoxicity tests, crude polysaccharide were not cytotoxic against cancer cell lines such as NIH3T3 and Sarcoma 180 at the concentration of $1000{\mu}g/ml$. Intraperitoneal injection with crude polysaccharides exhibited life prolongation effect of $60{\sim}67.5%$ in mice inoculated with Sarcoma 180, respectively. Fr, NaCl improved the immunopotentiation activity of B lymphocyte by increasing the alkaline phosphatase activity by $1.8{\sim}3.0$ folds, respectively. In case of Fr. NaCl, the numbers of peritoneal exudate cells and circulating leukocytes were increased by 10 and 2 folds, respectively.
Hericium erinaceus, an edible and medicinal mushroom belonging to the Basidiomycota family, has been used for curing gastric ulcers and stomach cancers in human beings and is also known to have good inhibitory effects on sarcoma 180 and Ehrlich carcinoma in mice. Neutral saline soluble (0.9% NaCl), hot water soluble and methanol soluble substances (hereinafter referred to as Fr. NaCl, Fr. HW and Fr. MeOH, respectively) were extracted from the fruiting body of the mushroom. In in vitro cytotoxicity tests, crude polysaccharides were not cytotoxic against cell lines such as Sarcoma 180, HepG2, HT-29 and NIH3T3 at concentrations of $10{\sim}2,000\;{\mu}g/ml$. Intraperitoneal injection with crude polysaccharides exhibited a life prolongation effect of 29.1~54.1% in mice previously inoculated with Sarcoma 180. Fr. Na increased the numbers of spleen cells by 2.9 fold at a concentration of $50\;{\mu}g/ml$ compared with the control. Fr. Na improved the immuno-potentiating activity of B lymphocytes by increasing alkaline phosphatase activity by 5.5 fold compared with the control at a concentration of $200\;{\mu}g/ml$. Fr. NaCl increased the numbers of peritoneal exudate cells and circulating leukocytes by 4 and 2.3 folds at a concentration of 50 mg/kg, respectively. Therefore, the crude polysaccharides extracted from the fruiting body of H. erinaceus could improve antitumor activities in mice.
Neutral salt-soluble, hot water-soluble and methanol-soluble materials (hereinafter referred to Fr. NaCl, Fr. HW and Fr. MeOH, respectively) were extracted from sclerotium of Grifola umbellata. The Fr. NaCl and Fr. HW did not show any direct cytotoxicity against NIH3T3, Sarcoma 180 and MCF-7, but Fr. MeOH showed cytotoxicity against these cell lines at the concentration of $1,000\;{\mu}g/ml$. Intraperitoneal injection with Fr. NaCl showed antitumor effect with life prolongation of 66.7% and decrease the number of Sarcoma 180 cells of 54.2% in mice inoculated with Sarcoma 180. Fr. NaCl improved the immunopotentiation activity through alternative complement pathway and the alkaline phosphatase activity by $85.05{\sim}88.73%$ and 6 folds, respectively. The number of peritoneal exudate cells and the circulating leucocytes were increased by 1.7 and 3.6 folds in the Fr. NaCl treating group compared with the control group, respectively. The weight of immunoorgans such as liver, spleen and thymus were also gradually increased. The hematological analysis of the Fr. NaCl group was similar with that of the control group. The total polysaccharide and protein contents of Fr. NaCl were 98.25% and 1.44%, respectively. These results indicate that the antitumor activity of Fr. NaCl was exerted through immunopotentiation, but not through cytotoxicity against the tumor cells.
Lentinus giganteus, one of edible and medicinal mushroom belongs to Pleurotaceae of Agaricales, has been known to contain some inhibitive substances on Sarcoma 180 and curative effect on high blood pressure. Neutral saline soluble (0.9% NaCl), hot water soluble and methanol soluble substances (hereinafter referred to Fr. NaCl, Fr. HW and Fr. MeOH, respectively) were extracted from fruiting body of the mushroom. In vitro cytotoxicity tests, crude polysaccharides were not cytotoxic against cancer cell lines such as Sarcoma 180 and HepG2 at the concentration of $10{\sim}2,000\;{\mu}g/ml$, but crude polysaccharides from Fr. NaCl was toxic to NIH3T3 at the concentration of $10{\sim}2,000\;{\mu}g/ml$. Intraperitoneal injection with crude polysaccharides showed life prolongation effect of $14.3{\sim}67.5%$ in mice previously inoculated with Sarcoma 180, respectively. Fr. NaCl exhibited the immuno-potentiating activity of B lymphocyte by increasing the alkaline phosphatase activity by $1.53{\sim}1.68$ folds compared with control at the concentration of $50{\sim}200\;{\mu}g/ml$, respectively. The numbers of peritoneal exudate cells and circulating leukocytes were increased by 7.7 and 1.6 folds by injecting Fr. NaCl and Fr. MeOH into the mice at the concentration of 50 mg/ml body weight, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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