• 제목/요약/키워드: Mitochondrial 12S rDNA

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동해 연안에 서식하는 성게의 형태변이와 미토콘드리아 유전자 분석 (Morphological Variation and Partial Mitochondrial Sequence Analysis of Echinoid Species from the Coasts of the East Sea)

  • 신지혜;김성규;김영대;손영창
    • 한국양식학회지
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    • 제21권3호
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    • pp.139-145
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    • 2008
  • 성게의 형태학적 분류는 그것의 형질적 변이에 의하여 어려움이 많다. 본 연구에서는 말똥성게, 둥근성게, 보라성게, 분홍성게와 동해안에서 포획된 미확인 성게 4종의 형태형질 비교와 계통유연관계를 조사하였다. 성게의 생식소로부터 genomic DNA를 분리한 후, PCR 방법을 통하여 mitochondrial 12S rDNA 유전자의 염기서열을 분석하였다. 둥근성게과의 말똥성게, 둥근성게, 만두성게과의 보라성게, 주발성게과의 분홍성게의 mitochondrial 12S rDNA의 염기서열은 미확인 성게종들의 그것과 85.9-93.9%의 상동성을 나타내었다. 한편, 미확인 성게종들은 새치성게의 mitochondrial 12S rDNA의 일부 염기서열과 99.8%의 높은 상동성을 보였으며, 각 개체의 mitochondrial 12S rDNA를 통한 분자계통수 분석에 의해서 미확인 성게들은 새치성게의 형태적 변이로 판단된다.

영지버섯과 표고버섯 원형질 융합체의 미토콘드리아 DNA 검색 (Mitochondrial DNA Analysis in Fusants of Ganoderma lucidum and Lentinus edodes)

  • 최은주;정영자;이영재;김병각;현진원
    • 한국환경성돌연변이발암원학회지
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    • 제22권3호
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    • pp.199-204
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    • 2002
  • It has been known that Ganoderma lucidum and Lentinus edodes have anticancer activity and immune enhancing activity. These two mushrooms were grown in liquid culture and harvested. From these mycelia, DNA was isolated and EtBr-CsCl density gradient ultracentrifugation was performed to purify it further. Then mitochondrial DNA was isolated by bisbenzimide-CsCl density ultracentrifugaton. Mitochondrial DNA of Ganoderma lucidum was digested by restriction enzymes, EcoR I, Hind Ⅲ, and Pst I, then electrophoresed. It showed 12, 22, 4 fragments. Mitochondrial DNA of Lentinus edodes was digested by EcoR I. Electric pattern showed 6 fragments. 4 fragments had appeared by Pst 1 digested mitochondrial DNA. Hind ill couldn't digest mitochondrial DNA of Lentinus edodes. Mitochondrial DNA of fusants was isolated to compare to those of parents. The results showed that fusant P₂S₄has new, recombined mitochondrial DNA. But P₂S₄had the same DNA that Ganoderma lucidum had.

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두족류의 진위 판별을 위한 Real-time Quantitative PCR 검사법 개발 및 검증 (Development and Validation of Quick and Accurate Cephalopods Grouping System in Fishery Products by Real-time Quantitative PCR Based on Mitochondrial DNA)

  • 정인영;서용배;양지영;권기성;김군도
    • 한국식품위생안전성학회지
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    • 제33권4호
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    • pp.280-288
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    • 2018
  • 본 연구는 국내에서 생산되거나 해외에서 수입되어 국내에서 유통되는 수산물 중에서 두족류를 문어류, 낙지류, 오징어류, 주꾸미류, 꼴뚜기류의 5개 그룹으로 구분하여 분석하였다. 두족류 5개 그룹을 판별을 하기 위해 미토콘드리아에 존재하는 유전자를 분석하였고, 그 중에서 COI (mitochondrial cytochrome C oxidase subunit I), 16s rRNA (16s ribosomal RNA), 12s rRNA (12s ribosomal RNA) 내에서 상당히 유사한 DNA 서열 부분과 일부 서열 변화 부분이 확인되었다. 명확하게 두족류 5개 그룹 판별을 하기 위해 COI, 16s rRNA, 12s rRNA 유전자의 일부 서열 변화 부분에서 그룹 특이적 프라이머 세트를 디자인하였다. 국내 외에서 확보한 두족류 시료(참문어, 낙지, 살오징어, 아메리카 대왕오징어, 갑오징어, 주꾸미, 모래주꾸미, 하이야주꾸미, 참꼴뚜기, 창꼴뚜기, 한치꼴뚜기)의 genomic DNA을 추출하여 각 그룹의 특이적 프라이머를 이용하여 SYBR 기반의 real-time PCR 시스템에 의해 분석되었고, threshold cycle (Ct) value와 같은 real-time PCR 결과 분석에 의해 두족류 내 그룹 판별이 가능하였다(Table 3).

PCR-RFLP를 이용한 파방나방 (Spodoptera exigua(H bner)) 미토콘트리아 DNA의 유전변이 연구 (Study on the Genetic Variation of the Mitochondrial DNA in the Beet Armyworm, Spodoptera exigua (H bner), Using PCR-RFLP)

  • 김용균;이명렬;정충렬
    • 한국응용곤충학회지
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    • 제37권1호
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    • pp.23-30
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    • 1998
  • DNA의 제한요소단편 다형현상(RFLP)이 유전변이 연구에 널리 이용되고 있다. 본 연구는 파밤나방(Spodoptera exigua(H bner)) 미토콘드리아 DNA(mtDNA)의 RFLP방법을 개발하기 위해 게놈 크기 측정 및 PCR primer들을 선발하였다. 파밤나방의 mtDNA 전체크기는 약 16kb였다. 대부분 곤충 mtDNA에 적합하게 구성된 (Simon et al., 1994)29개 promer들중 21개가 파밤나방의 mtDNA증폭에 적합했다. 이들 primer들을 이용하여 여러 유전자 영역(CO-I, CO-II, Cyt-B, ND-1, 12S rRNA, 16S rRNA 및 일부 tRNA)의 일분 또는 전체를 포함하는 유전자 절편을 증폭시켰다. 일반적으로 다형을 보이는 primer조합을 중심으로 4염기 제한부위를 인식하는 8종의 제한 효소를 통해 분석된 PCR-RFLP는 서로 다은 지역(안동, 경산, 순천) 집단들간에 제한부위에 있어서 차이가 없었으나 일부 영역에서는 길이 차이를 보여 유용한 유전지표로서의 가능성을 제시했다.

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A Phylogenetic Study of Korean Rodents (Muridae, Sciuridae) Based on Mitochondrial and Nuclear DNA

  • Jung, Gi-La;Lee, Seo-Jin;Kim, Chuel-Kyu;Lee, Hang;Kim, Chang-Bae
    • Animal Systematics, Evolution and Diversity
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    • 제26권2호
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    • pp.99-104
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    • 2010
  • The subfamily Murinae is a very controversial group concerning their phylogenetic relationship. Previous studies could not resolve phylogeny among four genera Apodemus, Micromys, Mus and Rattus of the Muridae. In the present study, eight rodent species resident in South Korea were collected and phylogenetically analyzed based on sequence data of five mitochondrial and nuclear DNA regions: 12S rRNA, cytochrome b gene (cyt b), cytochrome oxidase II (COII), control region of mitochondrial DNA, and a thyroglobulin (Tg) of nuclear DNA. According to the phylogeny of the concatenated data, M. musculus separated early in Murinae (ML 100%; BA 1.00 pp) and the genus Rattus grouped with the harvest mouse, M. minutes; these were separated from the genus Apodemus with relatively strong support (ML 74%; BA 0.76 pp). The Siberian chipmunk population was also examined using the five genes to obtain better resolution. The phylogeny for Korean rodents determined using the 12S rRNA, cyt b, COII and control regions discriminated the Siberian chipmunk populations from Korea, Russia, and China.

범가자미에 대한 유전학적 동정 (Genetic Stock Identification of Spotted Flounder, Verasper variegatus from Yeocheun, Korea)

  • 김경길;김윤;남윤권;김동수
    • 한국양식학회지
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    • 제6권3호
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    • pp.221-233
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    • 1993
  • 범가자미, Verasper variegatus에 대한 유전학적 동정을 위하여 세포 크기, DNA함량, 염색체수 및 핵형분석 등의 세포유전학적 조사와 PCR 기법을 이용한 mtDNA 125 ribosomal RNA gene의 분석을 실시하였다. 본 종의 적혈구와 핵의 평균 부피는 각각 $211.10{\mu}m^3$$23.03{\mu}m^3$였으며, haploid DNA content는 0.79 pg/cell로서 잉어의 $46.5\%$, 포유류의 $22.6\%$로 나타났다. 염색체 수는 46개로 모두 acrocentric 염색체로 구성되어 있었으며, heteromorphic한 성 염색체는 관찰되지 않았다. PCR 기법을 이용하여 증폭된 범가자미 mtDNA의 12S rRNA gene segment는 대략 390bp로 나타났고, 12S rRNA gene의 PCR product를 제한 효소로 처리 결과, Ava I, Mae II, Sma I, Xba I는 1개의 restriction site가, Mae I는 2개의 restriction site가 관찰되었다. 범가자미 mtDNA의 12S rRNA gene segment의 염기 서열을 인간과 차넬메기와 비교한 결과, identity가 차넬메기 와는 $81.8\%$, 인간과는 $67.7\%$였다.

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한국산 짱뚱어(Boleophthalmus pectinirostris)와 남방짱뚱어(Scartelaos gigas) (Gobiidae)의 분자유전학적 계통연관과 DNA 다형화 (Phylogenetic Relationship and DNA Polymorphism of Boleophthalmus pectinirostris and Scartelaos gigas (Teleostei: Gobiidae) of Korea)

  • 최기호;정의영;박갑만
    • 한국어류학회지
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    • 제25권3호
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    • pp.149-156
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    • 2013
  • 우리나라 망둑어과 어류 중 말뚝망둥어아과에 속하며 형태학적으로 흡사한 짱뚱어 (B. pectinirostris)와 남방짱뚱어(S. gigas)를 대상으로 12S rRNA, 16S rRNA 및 mitochondria cytochrome b 유전자의 염기서열 분석을 통해, 종내 및 종간의 분자유전학적 특성을 파악하고자 하였다. 짱뚱어 종내 개체간 유전적 차이를 밝히기 위해 mitochondria내에 3가지 유전자를 분석한 결과, 순천지역과 군산지역간의 염기서열은 12S rRNA는 총 434 bp (base pair)의 염기서열을 얻었으며 이를 비교 분석한 결과, 순천지역과 군산지역의 집단 간에는 100% 동일한 염기서열을 보였고, 16S rRNA 유전자는 총 484 bp의 염기서열 중 99.6%의 차이로 단지 2 bp가 치환된 것으로 나타났고, mitochondria cytochrome b 유전자의 경우, 444 bp의 염기서열을 얻었으며 두 지역 간 염기서열은 100%의 일치도를 보였다. 한국산 짱뚱어를 대상으로 한 동일한 종내에서 서식지 (서해, 남해)에 따른 유전적 차이나 지리적 거리의 차이가 있을 것으로 예상하였으나 이상의 3가지 유전자를 비교해 본 결과를 종합해 보면, 종내 개체 변이와 지역별 변이는 일어나지 않은 것으로 밝혀졌다. 또한 짱뚱어와 남방짱뚱어 2종간 비교 (inter-species)에서는 순천지역 짱뚱어와 해남지역 남방짱뚱어를 12S rRNA 유전자와 16S rRNA 유전자 및 mitochondria cytochrome b 유전자 염기서열을 비교 분석한 결과, 각각 96.1% (17 bp), 94.0 (29 bp), 그리고 82.9% (76 bp)로 나타나 두 종의 유전학적 차이는 크게 나타났다. 따라서 본 연구에서 나타난 짱뚱어와 남방짱뚱어 두 종간에 3.9~17.1%를 보여 서로 다른 종으로 볼 수 있을 것으로 사료되었다.

Mitochondrial Genome Sequences of Spirometra erinaceieuropaei and S. decipiens (Cestoidea: Diphyllobothriidae)

  • Eom, Keeseon S.;Park, Hansol;Lee, Dongmin;Choe, Seongjun;Kim, Kyu-Heon;Jeon, Hyeong-Kyu
    • Parasites, Hosts and Diseases
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    • 제53권4호
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    • pp.455-463
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    • 2015
  • The present study was performed to compare the mitochondrial genomes between 2 Spirometra tapeworms, Spirometra erinaceieuropaei and Spirometra decipiens (Cestoidea: Diphyllobothriidae), which larval stages are important etiological agents of sparganosis in humans. For each species, the full mitochondrial genome was amplified in 8 overlapping fragments using total genomic DNA purified from a single worm as the template. The mitochondrial genomes were 13,643 bp (S. erinaceieuropaei) and 13,641 bp (S. decipiens) in length and contained 36 genes; 12 protein-coding genes, 2 ribosomal RNA (rRNA, small and large subunits), and 22 transfer RNAs (tRNAs). The 12 protein-coding genes constituted 10,083 bp (S. erinaceieuropaei) and 10,086 bp (S. decipiens) of their respective mitochondrial genomes. The tRNA genes, ranging in length from 56 to 70 bp, were identified based on putative secondary structures such as the typical cloverleaf shape. A total of 23 intergenic sequences, varying from 1 to 204 bp in size, were interspersed in S. erinaceieuropaei (total, 504 bp) and S. decipiens (total, 496 bp) mtDNA. The 12 protein-coding genes of S. erinaceieuropaei and S. decipiens differed by 12.4%, whereas the overall difference in mtDNA sequence between S. erinaceieuropaei and S. decipiens was 12.9%. Thus, from the standpoint of the mitochondrial genome, S. decipiens represents a valid species that can be distinguished from S. erinaceieuropaei.

미토콘드리아 12S rRNA 유전자의 종 특이적 PCR-RFLP Fingerprint를 이용한 식육 원료의 판별 (Identification of Meat Species Using Species-Specific PCR-RFLP Fingerprint of Mitochondrial 12S rRNA Gene)

  • 박종근;신기현;신성철;정구용;정의룡
    • 한국축산식품학회지
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    • 제27권2호
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    • pp.209-215
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    • 2007
  • 본 연구는 mt DNA 12S rRNA 유전자의 PCR-RFLP 분석기법을 이용하여 다양한 식육자원 및 각종 가공 육제품의 원료육에 대한 정확하고 재현성 높은 축종 및 육종 감별기술을 개발하기 위하여 수행되었다. 국내에서 유통되고 있는 9종류 축종(소, 돼지, 양, 염소, 말, 사슴, 닭, 오리 및 칠면조)의 육류로부터 12S rRNA유전자의 특정 염기서열을 포함하는 primer를 설계 제작하여 PCR-RFLP 분석을 실시하였다. 각 공시축의 근육조직으로부터 genomic DNA를 추출하고 PCR 증폭 반응을 수행한 후 얻어진 PCR 증폭산물(약 455 bp)을 Tsp5091와 MboI 제한효소로 각각 절단한 결과 Tsp5091 제한효소는 포유류 6종간에서 그리고 MboI 제한효소는 가금류 3종간에서 명확한 차이를 보이는 종 특이적인 PCR-RFLP profile을 검출하였다. 따라서 본 연구에서 개발한 12S rRNA 유전자의 종 특이적 DNA 분자표지는 각종 원료육 및 가공 육제품의 육종 및 축종 판별에 매우 유용한 동물 종 감별 DNA marker로 이용될 수 있을 것이다.

미토콘드리아 12S rRNA 유전자 변이 조사를 통한 잉어(Cyprinus carpio)의 유전학적 동정 (Genetic Stock Identification of Common Carp (Cyprinus carpio) by Detection of Intraspecific DNA Sequence Variation in the Mitochondrial 12S rRNA Gene)

  • 남윤권;주수동;정창화;노충환;조재윤;김동수
    • 한국양식학회지
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    • 제10권4호
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    • pp.403-407
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    • 1997
  • Intraspecific sequence variation was detected by polymerase chain reaction (PCR) and direct sequencing of a 350-nucleotide region of the mitochondrial 12S rRNA gene of two natural populations (Han River and Nakdong River) and one hatchery stock (Jinhae Inland Fisheries Institute) of local strain common carp, one Israeli strain of common carp stock from Pukyong National University (PKU), and one hybrid between Israeli strain of common carp female and local strain common carp male from PKU stock. There is little variation in 350 bases of the mitochondrial 12S rRNA gene sequences among 2 natural and 1 hatchery local strain common carp populatins, representing abut 7 to 20 nucleotide differences (less than 6%). The sequence of specimens from Han River was more similar to that from Nakdong River (identity=98.0%) than to that from Jinhae Inland Fisheries Institute (identity=96.3%). Sequence variation between Israeli strain and wild local strain common carp was higher than the variation within natural stocks. The level of variation was ranged from 15.7 to 17.7%. The hybrid showed very similar nucleotide4 sequence of 12S rRNA gene to the sequence of Israeli strain with the identity of 98.9%.

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