Korean mistletoe (Viscum album) extract has been found to posses immunostimulatory activity. In this study, Korean mistletoe extract, M11C (non-lectin components), was used to know whether this extract might activate mouse splenic macrophages to produce tumor necrosis $factor-{\alpha}\;(TNF-{\alpha}$) and might play a role in anticancer. To know the effect of M11C on the production of $TNF-{\alpha}$, the splenic macrophages were treated by the M11C, and then collected the supernatant (M11C stimulated splenic macrophage-conditioned media; MSCM). MSCM was analyzed for the $TNF-{\alpha}$ secretion by means of ELISA and immunoblotting, and mRNA expression was analyzed by RT-PCR. The S-180 murine sarcoma model was established to know the effect of M11C on the inhibition of tumor growth. M11C had the effect of $TNF-{\alpha}$ production from splenic macrophages performed by ELISA technique. This ELISA data was reconfirmed by immunoblotting assay. The effects of M11C on the expression of $TNF-{\alpha}$ mRNA from the macrophages was also shown. M11C also had the inhibitory effect of S-180 tumor growth. These data suggest that Korean mistletoe extract M11C may be used for an immunomodulator.
Objectives: The purpose of this study is to report the improvement of recurrent cervical intraepithelial neoplasia (CIN) and chief complaint including dysmenorrhea, premenstrual syndrome after Korean medicine treatment. Methods: The patient who diagnosed CIN even after undergoing two times of loop electrosurgical excision procedure (LEEP) and complained dysmenorrhea with premenstrual syndrome was treated by acupuncture, moxibustion and herbal medicine as Ojeok-san-gami-bang along with mistletoe extract injection (Abnobaviscum®). The effect of treatment was evaluated by the results of liquid based cytology and HPV genotyping. Other symptoms were evaluated according to the patient's subjective complaint. Results: Before the treatment, the result of cytology was low grade squamous intraepithelial lesion and a low-risk group for HPV was detected. At the first examination after treatment, cytology showed negative for intraepithelial lesion or malignancy and the HPV genotyping was negative. The result showed negative findings in 3 consecutive follow-up tests. In addition, the chief complaint and general conditions were improved. Conclusion: This study shows that the recurrent cervical intraepithelial neoplasia (CIN) was improved after the Korean traditional treatment and it can be effective medical alternatives or options for patients receiving mistletoe injection during follow-up.
제주 동백나무 겨우살이 추출물의 항산화 활성을 DPPH 라디컬 소거능, 철이온 킬레이팅과 환원력 시험을 통해 조사한 결과, 메탄올과 에탄올 추출물이 열수 추출물보다 뛰어난 항산화 효능을 보였다. ${\alpha}$-Glucosidase와 pancreatic lipase 저해능 또한 메탄올과 에탄올 추출물이 우수한 활성을 보였다. 따라서, 제주 동백 나무 겨우살이의 메탄올 및 에탄올 추출물을 건강기능 의약식품 소재로 개발하기 위한 추가 연구가 진행되어야 할 것이다.
본 연구는 한국산 겨우살이 물 추출물과 이것에서 분리한 렉틴 성분을 실험적으로 간암을 유도한 흰쥐에게 투여하여 이들이 간 발암억제 효과 및 그 기전의 일부인 apoptosis와의 관련성을 조사하고자 하였다. 이를 위해 80~90 g 정도로 이유된 .3주령 Sprague-Dawley종을 한국산 겨우살이 물 추출물 투여 (100 $\mu\textrm{g}$/kg BW), 렉틴의 투여 10 ng/kg BW)와 DEN 투여 여부에 따라6군으로 나누어 발암물질 투여 1주일 후부터 주 2회 복강 투여하였다. 총 사육기간은 9주간이었고, 희생시킨 후 간조직을 분리하여 조직 병리학적 변화 측정을 위한 전암성 병변의 지표인 GST-P$^{+}$foci의 수와 면적을 측정하였고, apopotosis와의 관련성을 조사하기 위하여 apoptosis 염색, DNA fragmentation 측정 및 Bcl-2, c-lAP2, caspase-9, caspase .:, fas-L의 발현정도 측정을 위한 western blotting을 실시하였다. 그 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. (1) 체중은 발암물질에 의해 식이 섭취가 감소하는 것을 고려하여 제한 섭취를 실시하였으므로 발암물질 투여 에 따른 차이는 없었으며, 겨우살이 또는 렉틴의 투여에 따른 차이도 나타나지 않았다. 간 무게는 겨우살이, 렉틴의 투여에 따른 변화는 보이지 않았으나 발안물질 투여 에 따라 유의적으로 증가하였고, 체중에 대한 상대적인 간 무게에 대한 결과도 간 무게의 결과와 유사하였다. 따라서 본 연구에 사용한 투여 량의 한국산 겨우살이 물 추출물 및 렉틴이 간에 독성을 나타내는 농도가 아닌 것으로 보여진다. (2) GST-P$^{+}$ foci의 수, 면적과 PCNA은 겨우살이 물 추출물과 렉틴의 투여에 따라 모두 유의적으로 감소하였고, 겨우살이 물 추출물과 렉 틴에 따른 차이는 보이지 않았다. (3) 조직화학적으로 apoptosis염색한 결과와 DNA fragmentation을 측정한 결과는 모두 apoptosis에 대한 증거가 나타나지 않았다. 그러나 western blot을 측정한 결과 apoptosis을 억제하는 것으로 알려진 단백질인 Bcl-2와 IAP2는 발암물질 투여에 의해 증가된 발현 정도가 겨우살이 물 추출물이나 렉틴의 투여에 따른 차이를 보이지 않았으며, apoptosis를 촉진하는 단백질인 caspase-9, fas-L의 경우에는 발암물질 투여 에 의 해 증가된 발현 정도가 겨우살이 물 추출물 및 렉틴의 투여시 더욱 증가되었다.
목적: 미슬토 추출물은 서양에서 오래전부터 사용되어진 면역치료 물질로 위암에 대해서는 연구가 부족한 실정이다. 본 연구에서 수술 받은 위암환자를 대상으로 항암제와 미슬토 추출물의 병합투여가 면역기능에 미치는 효과를 파악하기 위해 시행되었다. 대상 및 방법: 원발성 위암으로 진단받고 근치적 수술을 받은 10명의 환자를 선정하여 항암화학요법과 병행하여 수술 후 7일째부터 미슬토 추출물(ABNOVA viscum-Q)을 주 3회, 총 16주간 피하주사 하였다. 면역기능에 미치는 효과는 환자의 말초혈액에서 백혈구수와 그 분획, 백혈구에 대한 총림프구의 분율 그리고 시토카인들(Interleukin-$1{\beta}$, Interleukin-2, Interleukin-6, Interferon-$\gamma$, Tumor necrosis factor-$\alpha$)의 변화를 분석하였다. 상기 항목들은 수술 전과 수술 후 8주, 16주 총 3회 측정되었다. 결과: 남녀비는 9 : 1이며, 평균연령은 55.9세(range $33{\sim}74$세)였다. 병기는 stage Ib가 4명, II가 6명이었다. 백혈구수와 총호중구수는 기저치에 비해 치료 후 8주와 16주에 유의한 감소를 보였다. 총호산구수는 기저치에 비해 8주와 16주에 증가하는 경향을 보였지만 통계적 유의성은 없었다(P=0.15). 총림프구의 수치는 치료 전후 유의한 감소를 보이지만 백혈구 수에 대한 총 림프구의 분율은 유의하지는 않지만(P=0.91) 오히려 증가하고 있다. 각각의 시토카인들은 치료전후 큰 변화를 보이지 않았다. 결론: 치료 전후 의미있는 면역반응의 증가는 관찰하기 어려웠다. 이것은 미슬토 추출물과 항암제의 병용투여에 의한 면역활성과 억제의 상쇄반응으로 생각된다. 총호산구수가 증가하였고, 백혈구에 대한 림프구의 분율이 감소하지 않고 증가하는 양상을 보인 것은 미슬토 추출물에 의해 유발된 면역반응으로 생각된다.
A lectin (agglutinin, VCA) from Korean mistletoe (Viscum album L. coloratum) was isolated by affinity chromatograpy on a asialofetuin-Sepharose 4B. The molecular weights of A- and B-chains of VCA were different from those of VAAS. The VCA recognized the antibody of VAAs in the Western blot analysis and ELLA system. We also investigated the synergistic effects of the components in mistletoe by dividing the extract into different molecular weight fractions.
Antitumor activity of Korean mistletoe extract (KM-110) and European commercial mistletoe preparation (Helixor) was investigated. KM-110 showed the cytotoxic effect that it is high for various tumor cell lines and normal splenocytes in comparison with Helixor. Administration of two mistletoe extracts ($100{\mu}g$) to mice did not show any significant changes on the level of glutamic-oxaloacetic transaminase (GOT), glutamic-pyruvate transaminase (GTP), blood creatinine (CRE) and blood urea nitrogen (BUN) in sera. The culture supernatant of macrophages stimulated with KM-110 inhibited effectively tumor growth whereas Helixor had little effect. Administration of KM-110 or Helixor resulted in a effective inhibition of lung metastasis after the i.v. inoculation of colon 26-M3.1 lung carcinoma, B16-BL6 melanoma and L5178Y-ML25 lymphomas. In all cases, the mice treated with KM-110 showed more effective anti-tumor metastatic activity than the mice of Helixor. These results suggest that Korean mistletoe extracts, KM-110 might be used as an alternative methods having antitumor activity like European mistletoe preparation, Helixor.
The serine proteases such as human leukocyte elastase (HLE) and porcine pancreatic elastase (PPE) are classified in the chymotrypsin family, and possibly the most destructive enzymes having the ability to degrade virtually all of the connective components in the body. In the present study, the extracts of water and methanol of Korean mistletoe (Viscum album var. coloratum) inhibited significantly the PPE activity. The fractions eluated on Amberlite XAD-2 from methanol extract were further purified on the repeated $SiO_2$ column chromatography and the fractions A, B and C were eluated. The fractions A, B and C at 3 mg/ml inhibited significantly the PPE activity up to 66%, 95% and 85%, respectively. In conclusion, the fraction A assumed as lignans or phenylpropanes, and fraction B and C assumed as triterpenoids showed the PPE inhibitory effects on the PPE and that these compounds in mistletoe may be used for treatment of pathological processes such as age-dependent tissue loss or inflammation.
Mistletoe (Viscum album) is a common name for many species of semi-parasitic plants which grow on deciduous trees all over the world. In this study, the immunomodulatory activity of the water-extract of Korean mistletoe fruits (KMFWE), was investigated on murine peritoneal macrophages. The culture supernatants of KMF-WE-stimulated murine peritoneal macrophages showed the increased production of IFN-$\gamma$, IL-$1{\beta}$ and TNF-$\alpha$, in a dose-dependent manner. KMF-WE also induced chemokine production from murine peritoneal macrophages such as RANTES, MCP-1, MIP-$1{\alpha}$ and MIP-$1{\beta}$, as well as nitric oxide (NO) production, in a dose-dependent manner. The gel filtration fraction revealed F-1, which is the early-eluted and high molecular weight product, is the major fraction of KMF-WE to activate the murine peritoneal macrophage to induce cytokines, chemokines and NO. The nature of F-1 fraction needs to be examined in detail in further studies to define the regulatory mechanisms of cytokine or chemokine induction by KMF-WE on macrophages. These results suggest that KMF-WE possess a potent immunostimulant activity and can be a promising candidate available for development of immunomodulators.
To evaluate the immunomodulatory activity of a water extract (KMF-WE) of Korean mistletoe (Viscum album var. coloratum) fruit, we examined its ability to induce humoral and cellular immune response against keyhole limpet hemocyanine (KLH). Immunized mice with KLH admixed with KMF-WE (KLH/KMF-WE) showed significant induction of KLH-specific antibodies compared to mice immunized with KLH alone. The assay for determining isotypes of antibodies revealed that KMFWE augmented KLH-specific-IgG1 and -IgG2a production. In vitro T lymphocyte proliferation analysis against KLH revealed that the splenocytes of mice immunized with KLH/KMF-WE showed a significantly higher proliferative ability than those from mice immunized with KLH alone. The culture supernatants of splenocytes, which were harvested from mice immunized with KLH/KMF-WE, showed higher levels of both Th-1 type (IL-2, IFN-${\gamma}$) and Th-2 type (IL-4) cytokines in response to KLH stimulation compared to those from mice immunized with KLH alone. Also, in delayed-type hypersensitivity (DTH) assay, mice immunized with KLH/KMF-WE showed a significantly higher reaction to KLH than mice treated with KLH alone. These results suggest that KMF-WE possess immunoadjuvant activity to enhance both antigen-specific humoral and cellular immune responses against protein antigens (KLH).
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[게시일 2004년 10월 1일]
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