• Journal of Microbiology
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• 제44권2호
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• pp.226-232
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• 2006

Swarming has proven to be a good in vitro model for bacterial surface adherence and colonization, and the swarming differentiation of a bacterium has been shown to be coupled with changes in the expression of virulence factors associated with its invasiveness, particularly in the early stages of infection. In this study, we attempted to determine whether the expression of vvhA, which encodes for hemolysin/cytolysin (VvhA), is either upregulated or downregulated during the swarming differentiation of V. vulnificus. The insertional inactivation of vvhA itself exerted no detectable effect on the expression of V. vulnificus swarming motility. However, in our lacZ-fused vvhA transcriptional reporter assay, vvhA expression decreased in swarming V. vulnificus as compared to non-swarming or planktonic V. vulnificus. The reduced expression of vvhA in swarming V. vulnificus increased as a result of the deletional inactivation of luxS, a gene associated with quorum sensing. These results show that vvhA expression in swarming V. vulnificus is downregulated via the activity of the LuxS quorum-sensing system, suggesting that VvhA performs no essential role in the invasiveness of V. vulnificus via the adherence to and colonization on the body surfaces required in the early stages of the infection. However, VvhA may playa significant role in the pathophysiological deterioration occurring after swarming V. vulnificus is differentiated into planktonic V. vulnificus.

• 미생물학회지
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• 제39권3호
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• pp.161-165
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• 2003

Ornithobacterium rhinotracheale(OR)은 최근에 알려진 그람음성 간균으로서 가금류에서 호흡기감염을 일으킨다. OR균의 항생제 감수성과 OR에 대한 국내발생현황을 조사하기 위하여 11개 OR분리주의 8중 항생제에 대한 최소발육억제농도(MIC)와 국내 달의 OR 항체보유율을 조사하였다. 모든 분리주는 ampicillin, tetracycline 및 doxycycline에 대하여 높은 감수성을 나타내었다. MIC는 각각 0.38～2 ${\mu}g$ /ml, 0.094～3 ${\mu}g$/ml, 0.094～3 ${\mu}g$/ml으로 ciprofloxacin, norfloxacin, enrofloxacin및 ofloxacin의 MIC는 대부분 3 ${\mu}g$/ml～48 ${\mu}g$/ml로 나타났고 gentamicin에 대하여는 모든 분리주가 저항성을 나타내었다. 시판되는 OR ELISA검사 kit를 사용하여, 국내에서 사육하는 육계 및 육용종계와 산란계 188계군에 대한 항체보유율을 검사한 결과, 육계 5계군(4%),육용종계 17계군(50%),산란계 16계군(55.2%)이 OR항체 양성계군으로 나타났다. 이 결과로 보아 OR은 국내 양계장내 광범위하게 만연되어 있을 것으로 보인다.

• 약학회지
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• 제43권6호
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• pp.716-728
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• 1999

Whole oil and ketonic fraction (KF) of Leptospermum scoparium have been tested for their antimicrobial activity and combination effect with several antibiotics against various bacterial strains and fungi by using microbiological assay methods. Antibacterial activities of KF against a number of test strains were 2-3 fold stronger than those of whole oil. MICs of the KF were $65~125{\;}{\mu\textrm{g}}/ml$ against seven gram positive bacterial strains, $65~250{\;}{\mu\textrm{g}}/ml$ against 19 methicillin resistance Staphylococcus aureus strains, and $65~50{\;}{\mu\textrm{g}}/ml$ against 14 quinolone resistance strains. However, KF showed little or no activity against gram negative bacteria. MICs of the KF were $16~250{\;}{\mu\textrm{g}}/ml$ against more than 50% of the anaerobic bacterial strains tested. KF showed the higher antibacterial activity than bacitracin against 10 strains of Bacteroids thetaiotaomicron, or three strains of Bacteroides ovatus, and the more active than ciprofloxacin against one strain of Bacteroides thetaiotaomicron and three strains of Bacteroids ovatus. The MICs of KF was 63 and $250{\;}{\mu\textrm{g}}/ml$ against Aspergillus niger and Candida albicans, respectively. Antibacterial activities of KF in combination with 19 antibiotics against 14 strains and with four antifungal agents against one fungal strain were determined by paper strip diffusion method. While most of combination showed additivity, KF showed synergism with bacitracin, exfadroxil, cephradin, and meropenem for 29~57% of the strains tested. However, ofloxacin, enoxacin, sparfloxacin showed antagonism with KF for 43~71% of the strains. KF alone and in combination with bacitracin, gentamycin, neomycin, itraconazole, fluconazole, terfinafine and ketoconazole against five bacterial strains or one fungus strain synergistic effect was demonstrated against 33% of strains examined with FIC index value below 0.5 by checkerboard study. Synergistic effect of KF with gentamicin against Staphylococcus epidermidis 329 (QRS) was found by time-kill study.

• 미생물학회지
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• 제25권1호
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• pp.57-66
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• 1987

E. coli의 한 변종안 LeB 850 strain을 MNNG되 저해하여 MMS에 대해 증가된 빈감성을 갖는 변종들 분리하다. 이 들에 대해 효소 황동도, 간단한 알켈화제 시약에 대한 띤감성을 조사하고, bacteriophage을 이용한 숙주세포 재활성도 능력 평가 알칼화제 실시하여 이 들을 확정지었다. E. coli의 변종인 5-62뉴 3-methyladenine DNA glycosylase II의 효소 활능도가 전혀 없었으며, 알킬화제 시약인 M:ING와 1\1MS에 대한 매우 증가된 민감성을 보였다. 또한 이 변종 5-62는 MMS가 처리된 phage charon 35-을 숙주내에 셔 새황성화 시키는 능력이 현저히 부족하였다. 변종 5-62에서 MMS에 대해 증가 된 저항성을 주는 MMS+ gene을 cloning 하였다. 재조합 plasmid인 pMRG 1은 변종 5-62에서 MMS에 대한 민감도달 감소시켰으나 MMS에 대한 민감도는 변화 시키시 몫했다. 이 plasmid를 포착한 변종 5-62는 0.5$\mu$g/ml의 MNNG를 $37^{\circ}C$에서 2 시간 처리 하였을때 MMS의 저항성을 보다 촉진시켰다. 재조합 plasmid인 pMRG 1이 alk A 변이와 ada 변이를 회복시키지 못했으나, MMS가 처리된 파지를 재활성화 시키는 능력은 이 plasmid가 없는 변종보다 증가시컸다.

• 미생물학회지
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• 제9권2호
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• pp.86-93
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• 1971

위생환경이 좋지 못하고 보건사업의 혜택이 원활치 못한 지역의 소아 및 국민학동에게서 분리한 장내 세균 중 이열성 장내 독소생성 대장균주의 분포를 배양된 부신암 세포를 이용하여 살펴보았다. 이 열성 장내독소의 존재아래 부신암 세포는 세포의 원형화 및 seroid 생성력의 항진을 보이기에 이 두 성질에 기처를 두어 독소생선균주를 감별하였다. 실험의 결과 조사대상자의 약 10%에 해당하는 균주들이 독소 생성 균주로 밝혀졌다. 분리한 균주의 화학요법제에 대한 감수성 내지 내성도를 측정하였는데 특히 주목할 것은 이열성 장내독소 균주들의 대부분이 gentamycin(10mg)과 nalidixic acid(5mg)에 감수성이 있는데 비해, colistin(10mg), novobiocin(30mg), sulfa drug(50mg)에는 내성을 나타냈으며, 장내 질환에 널리 쓰이는 chloramp-henicol(10mg)에 대해서는 균에 따라 감수성 또는 내성을 보인데 있다. 이상의 조사로 우리나라 정상아동이 상당의 이열성 장내독소 생성균주를 보유하고 있음을 알수 있다. 이를 균주중 몇개는 장내질환 치료제로 널리 사용하는 항생제에 대해 내성을 지니고 있음을 볼 수 있었다.

• Journal of Microbiology
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• 제45권3호
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• pp.256-261
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• 2007

Apoptosis is a step of the cell cycle which is important in the regulation of immune cell populations. Chungkookjang is a Korean traditional fermented soybean containing microorganisms, enzymes, and bioactive compounds which was used in the treatment of mouse spleen as well as thymus cells (CH1-fermented soybean containing barley, wormwood, and sea tangle; CH2-fermented soybean) and was found to exhibit substantially reduced small DNA fragmentation. An MTT assay showed that the treatment of CH1 and CH2 into the mouse splenocytes and thymocytes sharply increased their survival. Moreover, a FACS analysis also showed that CH1 and CH2 are effective at suppressing the apoptosis of splenocytes and thymocytes. The fermented soybean isoflavone concentrations, which are implicated in lowering breast and prostate cancers, lowering the risk of cardiovascular diseases, and improving bone health, were determined using Capillary Electrophoresis-Electrochemical Detection (CE-ED). The amount of Daidzein in fermented soybean significantly increased by 44-fold dramatically, compared with those in unfermented soybean. In this study, we demonstrated that ethanol extracts of Chungkookjang promote the survival of the mouse spleen and thymus cells in culture by suppressing their apoptotic death. Future studies should investigate which genes are related to apoptosis of the immune cells.

• 미생물학회지
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• 제44권4호
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• pp.299-304
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• 2008

마이엘로이드 계열의 단핵세포는 인체세포거대바이러스(human cytomegalovirus, HCMV)의 잠복 부위로 알려져 있다. 다양한 세포에서 HCMV에 의한 세포주기의 촉진 또는 억제에 관한 연구는 많이 있었지만, 단핵세포에서의 연구는 거의 없는 상태이다. 이에 본 연구에서는 단핵세포에 HCMV가 감염되면 세포주기에 어떤 변화가 나타나는지 알아보고자 하였다. Propidium iodide를 이용한 유세포 분석을 통한 세포주기 분석에서 HCMV에 감염된 THP-1 세포에서는 G0-G1기가 증가하고, 그만큼 S가 감소함을 보았다. 반면 HL-60 세포에서는G0-G1기와 S기의 상대적인 비율에 큰 변화가 없었다. BrdU 유입 실험에서 THP-1세포의 DNA 합성이 HCMV 감염에 의해 억제됨을 알 수 있었다. 세포주기의 G1기에서 S기로의 전환을 억제하는 p21 단백질은HCMV에 감염된 THP-1 세포에서는 발현이 유도되었지만 HL-60 세포에서는 거의 발현이 되지 않았다. 따라서 HCMV는 promocyte THP-1 세포에서 p21 단백질의 유도에 의해 세포주기를 G0-G1기에서 억류함에 따라 세포중식을 억제하는 것으로 생각된다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제31권4호
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• pp.395-399
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• 2003

본 연구에서는 S. hindustanus ATCC 31218로부터 선별된 변이주를 사용하여 배양조건이 nebramycin 주요 생산물인 factor 2, factor 4, factor 5', kanamycin A 등의 구성비율과 역가에 미치는 영향을 조사하였다. 실험결과, nebramycin의 factor들이 구성비율은 온도 및 배지보다는 배양액량, 교반속도 등에 의해 크게 영향을 받는 것으로 나타났다. 따라서 플라스크와 발효조의 산소전달속도를 각각 측정하여 factor 5' 생산의 최적 산소전달조건을 검토한 결과, $0.50 mMO_2$/min으로 배양시 factor 5'의 역가가 가장 높았으며 구성비율도 70% 이상을 나타내었다. 한편 $0.9 mMO_2$/min 이상으로 배양시는 factor 2의 역가와 구성비율이 현저히 감소한 반면 factor 2의 역가와 구성비율이 급격히 증가하였다. 한편 본 연구에 사용된 변이주 S. hindustanus YHT-0001는 factor 5'의 역가는 16.4배, factor 5'구성비율은 약 11% 향상된 균주로 확인되었다. S. hindustanus 발효시 공급되는 산소량은 단지 hydroxyl기와 아미노기의 존재유무에 따라 구조가 결정되는 factor 5', factor 4, kanamycin A의 hydroxyl기 생성을 위한 산소공여자로 역할뿐 만 아니라 배당체 구조에 차이를 보이는 apramycin 생합성과정에 영향을 크게 준다고 사료되었다.

• Journal of Microbiology
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• 제41권1호
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• pp.46-51
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• 2003

RAD6 in yeast mediates postreplication DNA repair and is responsible for DNA-damage induced mutations. RAD6 encodes ubiquitin-conjugating enzyme that is well conserved among eukaryotic organisms. However, the molecular targets and consequences of their ubiquitination by Rad6 have remained elusive. In Aspergillus nidulans, a RAD6 homolog has been isolated and shown to be an allele of uvs). We screened a CDNA library to isolate UVSJ-interacting proteins by the yeast two-hybrid system. JIPA was identified as an interactor of UVSJ. Their interaction was confirmed in vitro by a GST-pull down assay. JIPA was also able to interact with mutant UVSJ proteins, UVSJl and the active site cysteine mutant UVSJ-C88A. The N- and the C-terminal regions of UVSJ required for the interaction with UVSH, a RAD18 homolog of yeast which physically interacts with Rad6, were not necessary for the JIPA and UVSJ interactions. About 1.4 kb jipA transcript was detected in Northern analysis and its amount was not significantly increased in response to DNA-damaging agents. A genomic DNA clone of the jipA gene was isolated from a chromosome I specific genomic library by PCR-sib selection. Sequence determination of genomic and cDNA of jipA revealed an ORF of 893 bp interrupted by 2 introns, encoding a putative polypeptide of 262 amino acids. JIPA has 33% amino acid sequence identity to TIP41 of Saccharomyces cerevisiae which negatively regulates the TOR signaling pathway.

• Journal of Microbiology
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• 제43권4호
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• pp.325-330
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• 2005

Rhodococcus sp. strain YU6 was isolated from soil for the ability to grow on o-xylene as the sole carbon and energy source. Unlike most other o-xylene-degrading bacteria, YU6 is able to grow on p-xylene. Numerous growth substrate range experiments, in addition to the ring-cleavage enzyme assay data, suggest that YU6 initially metabolizes 0- and p-xylene by direct aromatic ring oxidation. This leads to the formation of dimethylcatechols, which was further degraded largely through meta-cleavage path-way. The gene encoding meta-cleavage dioxygenase enzyme was PCR cloned from genomic YU6 DNA using previously known gene sequence data from the o-xylene-degrading Rhodococcus sp. strain DK17. Subsequent sequencing of the 918-bp PCR product revealed a $98\%$ identity to the gene, encoding meth-ylcatechol 2,3-dioxygenase from DK17. PFGE analysis followed by Southern hybridization with the catechol 2,3-dioxygenase gene demonstrated that the gene is located on an approximately 560-kb megaplasmid, designated pJY J1