한국산 고지질 Botryococcus를 확보하기 위해 시료채취를 하였고, 실험실에서 Botryococcus sp.를 분리하였다. 분리된 Botryococcus sp.는 현미경으로 그 크기와 형태를 관찰하였고, 분자적 동정을 위해 18S rRNA gene과 ITS region의 염기서열을 분석함으로써 Botryococcus sudeticus J2로 명명하였으며, 생태학적 특성 연구를 위해 문헌조사를 통해 국내의 Botryococcus 속의 분포를 조사를 실시하였다. 동정된 B. sudeticus J2의 생리적 특성 분석을 위해 배양실험을 수행하였고, 생장률과 바이오매스 생산성 그리고 광합성효율을 측정하였다. 또한 바이오디젤 생산을 위한 조류주로서의 가치를 판단하기 위해 총 지질함유량과 지방산 조성을 분석하였다. B. sudeticus J2의 생태적, 생리적 연구 후 2배의 광량과 2% $CO_2$ 조건에서 배양을 수행함으로써 최적 배양조건을 탐색하고자 하였다. 분리된 B. sudeticus J2는 비교를 위한 B. braunii UTEX 572보다 높은 바이오매스 생산성과 지질생산성을 보였으나 바이오매스 생산을 위한 다른 후보 미세조류에 비해서는 낮은 생장률을 보였다. 따라서 바이오디젤 생산을 위한 조류로 B. sudeticus J2를 활용하기 위해서는 본 연구에서 밝혀진 광저해에 대한 내성에 초점을 맞추어 최적 배양을 위한 광조건을 탐색하는 연구가 필요하다.
The marine microalgae Chaetoceros calcitrans was cultured under a fluorescent lamp (CON) and light-emitting diodes (LEDs) of various wavelengths (blue, LB; red, LR; green, LG; white, LW); changes in growth, fucoxanthin, chlorophyll-a, amino acid and fatty acid profiles were investigated. LR-exposed cultures exhibited the highest specific growth rate (SGR) (0.34), whereas LG-exposed cultures showed the lowest SGR (0.26). After cultivation for 10 days, the maximum dry cell weight (g/L) of LR-exposed cultures was significantly higher than that of those exposed to other light conditions (LR${\geq_-}$CON>LB${\geq_-}$LW${\geq_-}$LG). Eicosapentaenoic acid (EPA) levels were significantly higher in CON-exposed cultures compared to those exposed to LW (P<0.05), with no marked difference compared to those exposed to LB, LR and LG (P>0.05). The fucoxanthin content was highest in LB-exposed cultures ($6.3{\mu}g/mL$), whereas LW showed the lowest ($3.6{\mu}g/mL$; P<0.05). Chlorophyll-a content was highest in cultures exposed to LB compared to other light sources. These results suggest consistent differences in growth and biochemical composition after exposure to light of different wavelengths.
Screening suitable strains with high temperature adaptability is of great importance for reducing the cost of temperature control in microalgae cultivation, especially in summer. To obtain high temperature-tolerant diatoms, water samples were collected in summer from 7 different regions of China across the Northeast, North and East. A total of 731 water samples was collected and from them 131 diatom strains were isolated and identified based on the 18S rRNA sequences. Forty-nine strains out of the 131 diatoms could survive at 30℃, and 6 strains with relatively high biomass and lipid content at high temperature were selected and were found to be able to grow at 35℃. Cyclotella sp. HB162 had the highest dry biomass of 0.46 g/l and relatively high triacylglycerol (TAG) content of 237.4 mg/g dry biomass. The highest TAG content of 246.4 mg/g dry biomass was obtained in Fistulifera sp. HB236, while Nitzschia palea HB170 had high dry biomass (0.33 g/l) but relatively low TAG content (105.9 mg/g dry biomass). N. palea HB170 and Fistulifera sp. HB236 presented relatively stable growth rates and lipid yields under fluctuating temperatures ranging from 28 to 35℃, while Cyclotella HB162 maintained high lipid yield at temperatures below 25℃. The percentage of saturated fatty acids and monounsaturated fatty acids in all the 6 strains was 84-91% in total lipids and 90-94% in TAGs, which makes them the ideal feedstock for biodiesel.
The marine microalgae Nannochloropsis sp. was cultured under a metal halide lamp (MH) or light-emitting diodes (LEDs) of various wavelengths (blue, LB; red, LR; yellow, LY; green, LG; white, LW); changes in growth, total carotenoid, chlorophyll a, amino acid and fatty acid profiles were investigated. LB-exposed cultures exhibited the highest specific growth rate (SGR) (0.32), whereas LY-exposed cultures showed the lowest SGR (0.18). After cultivation for 9 days, the maximum dry cell weight (g/L) of LB-exposed cultures was significantly higher than that of those exposed to other light conditions (LB>MH>LW$${\geq_-}LG{\geq_-}$$LR>LY). The essential amino acid (EAA, %) contents of cultures exposed to LG, LB, LR and MH were higher than those exposed to LY and LW (P<0.05). Eicosapentaenoic acid and n-3 highly unsaturated fatty acid levels were significantly higher in MH-exposed cultures compared to those exposed to LY (P<0.05), with no marked difference compared to those exposed to LB, LG, LR and LW (P>0.05). The total carotenoid content was highest in LR-exposed cultures (18.0 mg/L), whereas MH showed the lowest (11.8 mg/L; P<0.05). Chlorophyll a content was highest in cultures exposed to LR compared to other light sources. These results suggest consistent differences in growth and biochemical composition after exposure to light of different wavelengths.
In a previous study, the sequential optimization and regulation of environmental parameters using the PhotoBiobox were demonstrated with high-throughput screening tests. In this study, we estimated changes in the biovolume-based composition of a polyculture built in vitro and composed of three algal strains: Chlorella sp., Scenedesmus sp., and Parachlorella sp. We performed this work using the PhotoBiobox under different temperatures (10-36℃) and light intensities (50-700 μmol m-2 s-1) in air and in 5% CO2. In 5% CO2, Chlorella sp. exhibited better adaptation to high temperatures than in air conditions. Pearson's correlation analysis showed that the composition of Parachlorella sp. was highly related to temperature whereas Chlorella sp. and Scenedesmus sp. showed negative correlations in both air and 5% CO2. Furthermore, light intensity slightly affected the composition of Scenedesmus sp., whereas no significant effect was observed in other species. Based on these results, it is speculated that temperature is an important factor in influencing changes in algal polyculture community structure (PCS). These results further confirm that the PhotoBiobox is a convenient and available tool for performance of lab-scale experiments on PCS changes. The application of the PhotoBiobox in PCS studies will provide new insight into polyculture-based ecology.
This study was to investigate the composition and characteristics of long-chained alcohols extracted from the algal strain Monoraphidium 3s35. The production of biomass was optimized using different cultivation methods. Under the aerated growth condition, this strain yielded up to 37.26% extracts of dry weight and $576mgL^{-1}$ biomass. The major compounds of the extracts are mainly long-chained alcohols (89.24%), with carbon chain length ranging from 12 to 20. Interestingly, or the long-chained alcohols, 3-(2-Methoxyethyl)-1-nonanol, 3,7,11,15-Tetramethyl-2-hexadecen-1-ol and oleyl alcohol accounted for 53.68%, 23.45%, and 12.11%, respectively. Because of their amphipathic nature, these long-chained alcohols have been widely used in bioenergy production and cosmetics industry. Furthermore, Monoraphidium 3s35 produced 9.73% of $C_{17}$ and $C_{20}$ alkanes, which can be used as an important supplement for the petrodiesel-like fuel.
Omega-3 fatty acids and carotenoids, which are known as representative high-value substances derived from microalgae, are being studied from various diatoms. Most of the diatoms contain fucoxanthin and omega-3 fatty acid. Fucoxanthin produced by diatom has been reported as bioactive compounds exhibiting strong antioxidant, anticancer and anti-inflammatory activities. However, the low growth rate and fucoxanthin content of diatoms are one of the big obstacles to the industrial application. In this study, indigenous marine diatom Achnanthidium sp. BS-001 was isolated for a candidate of fucoxanthin producer. Light intensity and temperature for the culture of Achnanthidium sp. BS-001 were optimized on PhotoBiobox. Optimization of silicate concentration for increasing BS-001 biomass productivity was confirmed in F/2 medium with various concentration of sodium silicate. As a result, condition of light intensity, temperature, and silicate concentration for optimal cultivation were $150{\mu}mol{\cdot}m^{-2}{\cdot}s^{-1}$, $18^{\circ}C$ and 0.106 mM, respectively. Maximum biomass productivity reaches to $154.3mg{\cdot}L^{-1}{\cdot}day^{-1}$, and then the content of omega-3 fatty acids and fucoxanthin were $19.4mg{\cdot}g^{-1}$, $9.05mg{\cdot}g^{-1}$, respectively. These results indicate that Achnanthidium sp. BS-001 has the potential to be used as a source of omega-3 fatty acids and fucoxanthin.
Mahdieh, Majid;Shabani, Salimeh;Amirjani, Mohammad Reza
한국미생물·생명공학회지
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제47권1호
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pp.11-19
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2019
The properties of microalgae as bioresources for biodiesel production can be improved by adding nitrogen sources into the culture medium. Thus, Nannochloropsis oceanica CCAP 849/10 was cultured in f/2 media supplemented with five different forms of nitrogen at $0.88mmol-N\;l^{-1}$ each: ammonium bicarbonate ($NH_4HCO_3$), ammonium sulfate ($(NH_4)_2SO_4$), sodium nitrate ($NaNO_3$), ammonium nitrate ($NH_4NO_3$), and urea. The cell density, lipid content, and fatty acid profile of the microalga were determined after 15 days of cultivation. The growth of N. oceanica based on cell number was lowest in the medium with $NH_4NO_3$, and increased significantly in the medium with $NH_4HCO_3$. Cells treated with $(NH_4)_2SO_4$, and $NH_4NO_3$ produced the highest total lipid contents (i.e., 65% and 62% by dry weight, respectively). The fatty acid profiles of the microalga were significantly different in the various nitrogen sources. The major fatty acids detected in cultures supplemented with $NH_4HCO_3$, $(NH_4)_2SO_4$, $NH_4NO_3$, or urea were C14:0, C16:0, C16:1, C18:0, C18:1, C18:2, C20:5, and C22:6. However, the C16:1 content in the $NaNO_3$-supplemented culture was very low. This study highlights that the nitrogen source can strongly influence lipid production in N. oceanica and its fatty acid composition.
미세조류 Chlorella vulgaris는 바이오 디젤 생산을 위한 중요한 대체원료 중 하나로 간주되어 왔으나, 이러한 미생물의 산업적 적용은 낮은 바이오 매스와 지질 생산성에 의해 제약을 받아왔다. 따라서 이러한 문제를 극복하기 위해 본 연구는 자외선을 이용한 무작위 돌연변이 유발 기술을 통해 높은 지질 및 바이오 매스 생산성을 가지는 C. vulgaris 균주를 분리하고 그 특성을 규명하였으며, 두 가지 유형의 대량 생산 시스템을 이용하여 바이오 매스 및 지질 함량의 산출량을 비교하였다. 분리된 돌연변이 균주 중, 특히 실험실 조건에서 UBM1-10으로 명명된 돌연변이 균주는 야생형 균주에 비해 약 1.5배 높은 세포 수율 및 지질 함량을 보였다. 이러한 결과를 바탕으로 UBM1-10을 선택하여 TBPR (tubular photobioreactor)과 OPR (open pond type reactor)의 두 가지 유형의 반응기를 사용하여 실외 배양 조건에서 배양하였다. 그 결과 TBPR에서 재배된 돌연변이 균주의 세포 수율은($2.6g\;l^{-1}$) OPR에서 배양된 균주의 세포 수율($0.5g\;l^{-1}$)과 비교하였을 때 약 5배 이상의 높은 세포 수율을 나타내었으며, 대량 배양 후, UBM1-10 및 모 균주의 조 지방 함량 및 조성 등에 대해 추가로 조사를 실시하였다. 그 결과 C. vulagris UBM1-10균주의 지질함량(0.3% w/w)이 모 균주의 지질함량(0.1%)에 비해 약 3배 이상의 조 지방 함량을 보유함을 확인하였다. 따라서 이 연구는 바이오 디젤 생산 자원으로서 C. vulgaris의 경제적 잠재성이 photoreactor type의 선택 및 전략적 돌연변이 분리 기술을 통해 증가 될 수 있음을 보여 주었다.
본 연구는 도광판의 간격이 Chlorella vulgaris (C. vulgaris)의 증식률에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. C. vulgaris (FC-16) ($3-8{\mu}m$)는 Jaworski's Medium 에 $22^{\circ}C$에서 15일 증식시킨 뒤 사용하였다. 실험을 위하여 네 개의 샘플을(Run 1: 225 mm 간격, Run 2: 150 mm 간격, Run 3: 112.5 mm 간격, Run 4: 90 mm 간격) 준비하여 도광판의 간격이 C. vulgaris의 증식률에 미치는 영향을 비교 실험하였다. 광효율은 Run 1이 86%, Run 2가 90%, Run 3가 92% 그리고 Run 4가 94%의 광효율을 나타내어 도광판의 간격이 짧을수록 광효율은 높았으며, 도광판의 간격에 따라 Run 1은 7일째, Run 2는 5일째, Run 3는 3일째 그리고 Run 4는 2일째에 최대 바이오매스 증식률을 나타내었다. 또한, 최대 증식률은 Run 4가 Run 1에 비해 3배 높았다. 그러나, 증식속도, 셀 당 클로로필 함량 및 단위면적 당 Cell volume 그리고 Doubling time은 Run 1과 Run 2에 비해 Run 3와 Run 4가 높았지만 Run 3과 Run 4는 크게 차이가 없었다. 따라서 경제적인 부분을 고려한다면 바이오매스의 대량생산을 위하여 Run 3의 사용이 가장 효율적이라 생각된다. measured, and the results for the toxic effect was not observed.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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