Choi, Mira;Choi, A Young;Ahn, Soo-Yeon;Choi, Kwon-Young;Jang, Kyoung-Soon
Mass Spectrometry Letters
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제9권3호
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pp.81-85
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2018
In this study, the chemical composition of bacterial melanin isolated from the Streptomyces glaucescens strain was elucidated by ultra-high-resolution Fourier transform ion cyclotron resonance (FT-ICR) mass spectrometry. Ultra-high-resolution mass profiles of the microbial melanin product were acquired using a 15 Tesla FT-ICR mass spectrometer in positive and negative ion modes via electrospray ionization to obtain more complete descriptions of the molecular compositions of melanin-derived organic constituents. A mass resolving power of 500,000 (at m/z 400) was achieved for all spectra while collecting 400 scans per sample with a 4 M transient. The results of this analysis revealed that the melanin pigment isolated from S. glaucescens predominantly exhibits CHON and CHO species, which belong to the proteins class of compounds, with the mean C/O and C/N ratios of 4.3 and 13.1, thus suggesting that the melanin could be eumelanin. This analytical approach could be utilized to investigate the molecular compositions of a variety of natural or synthetic melanins. The compositional features of melanins are important for understanding their formation mechanisms and physico-chemical properties.
Tyrosinase is an enzyme that catalyzes the biosynthetic pathway of melanin pigments participating in the coloring of skin, hair, and eyes, and is widely distributed in nature. The inhibitory compounds of tyrosinase have been extensively used as a cosmetic agent with a skin-whitening effect. In this paper, several plant extracts were screened using Melan-a cells for the melanin biosynthesis inhibition activity, and Idesia polycarpa was selected. A melanin biosynthesis inhibitor was isolated from I. polycarpa fruits by activity-guided fractionation, and the inhibitor was identified as 6-hydroxy-2-[[[(1-hydroxy-6-oxo-2-cyclohexenl-yl)carbonyl]oxy]methyl]phenyl$\beta$-D-glucopyranoside (idescrapin) by comparing it with reported spectral data. Idescarpin $(IC_{50}=8{\mu}g/ml)$ reduced melanin content compared with the vehicle. In addition, the inhibitory activity of idescarpin for melanin synthesis is mediated by decreasing tyrosinase protein rather than directly inhibiting the tyrosinase activity. These results suggest that idescarpin isolated from I. polycarpa fruits may be used as a skin-whitening agent.
Park, Su Bin;Kim, Ha Na;Kim, Jeong Dong;Park, Gwang Hun;Son, Ho-Jun;Eo, Hyun Ji;Song, Jeong Ho;Jeong, Hyung Jin;Jeong, Jin Boo
한국자원식물학회:학술대회논문집
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한국자원식물학회 2018년도 추계학술대회
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pp.95-95
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2018
In this study, we investigated the effect of branch extracts from Vaccinium oldhamii (VOB) on melanin synthesis in B16F10 cells. VOB promoted melanin production in absence or presence of ${\alpha}$-melanocyte-stimulating hormone (${\alpha}-MSH$) in B16F10 cells. However, VOB did not affect the expression of tyrosinase and TRP-1 associated with melanin synthesis at the mRNA and protein level in B16F10. But, VOB decreased TRP-2 protein level and induced tyrosinase activation in B16F10 cells. Inhibition of tyrosinase activity and tyrosinase knockdown attenuated VOB-mediated melanin synthesis. In conclusion, it is thought that VOB may stimulate melanin synthesis through activating tyrosinase activity.
This study was performed to elucidate the inhibitory effects of Alveopora japonica extract on melanin synthesis by measuring the levels of cell viability, mRNA expression, tyrosinase activity, and melanin production in the B16F10 cell line. The effects of A. japonica extract on tyrosinase-related protein 1 (TYRP1), TYRP2, tyrosinase (TYR), and microphthalmia-associated transcription factor (MITF) mRNA expression levels and melanin content were determined. Quantitative real-time RT-PCR show that A. japonica extract decrease the mRNA expression levels of TYRP1, TYRP2, TYR, and MITF in B16F10 cell line, resulting in lower levels of melanin production compared to α-MSH-treated B16F10 cells. Tyrosinase activity assays reveal that A. japonica extract decrease melanin production in B16F10 cells. These results demonstrate the whitening effects of A. japonica extract on B16F10 cells; thus, A. japonica extract is a potent ingredient for skin whitening. Further research is needed on the mechanism of action of A. japonica extract. Such research will benefit not only cosmetics, but also the health food and medical industries.
본 연구에서는 베트남에서 자생하고 있는 인삼인 Panax vietnamensis (P. vietnamensis)의 antipigmentation 효능을 확인하였다. 마우스 유래 melanocytes인 B16F10세포에 P. vietnamensis 70% ethanol 추출물을 처리하여 melanin의 생성량을 확인한 결과 250 ㎍/mL 추출물을 처리시 100 ng/mL α-MSH를 처리한 대조군 대비 64.04%의 melanin 생성억제를 확인하였다. 또한 melanin합성에 주요한 단백질인 tyrosinase의 활성 및 발현을 100 ng/mL α-MSH를 처리한 대조군 대비 tyrosinase의 활성은 53.34%, tyrosinase의 발현은 59.39%의 억제율을 보였다. 본 연구결과를 통해 P. vietnamensis 70% ethanol추출물은 α-MSH에 의한 melanin 생성을 방지하여 미백 기능성 소재로써 가치가 있는 것으로 사료된다.
This study was performed to elucidated the inhibitory effects of 6,8-diprenylorobol on melanin synthesis by measuring the levels of cell viability, mRNA expression, tyrosinase activity, and melanin production in the B16F10 cell line. The effects of 6,8-diprenylorobol on tyrosinase-related protein 1 (TYRP1), TYRP2, tyrosinase (TYR), and microphthalmia-associated transcription factor (MITF) mRNA expression levels and melanin content were determined. Quantitative real-time RT-PCR shows that 6,8-diprenylorobol decreases the mRNA expression levels of TYRP1, TYRP2, TYR, and MITF in B16F10 cell line, resulting in lower levels of melanin production compared to α-MSH-treated B16F10 cells. Tyrosinase activity assays reveal that 6,8-diprenylorobol decreases melanin production in B16F10 cells. These results demonstrate the whitening effects of 6,8-diprenylorobol on B16F10 cells; thus, 6,8-diprenylorobol is a potent ingredient for skin whitening. Further research is needed on the mechanism of action of 6,8-diprenylorobol. Such research will benefit not only cosmetics, but also the health food and medical industries.
멜라닌은 생체 내에서 발모 및 피부색을 결정하는데 중요한 역할을 하는 고분자 물질이다. 하지만 활성산소에 의해 과도하게 생성된 멜라닌은 노화와 관련된 기미, 주근깨와 과색소 침착증 등을 야기한다고 알려져 있다. 이와 관련된 천연물 중 서목태 성분의 하나인 polyphosphate는 자외선에 의해 손상되는 피부 노화를 억제한다고 보고되고 있다. 본 연구의 목적은 멜라닌 합성에 대한 RNEE의 직접적인 효과를 조사한 것이다. 본 연구에서 RNEE는 DPPH radical의 소거효과 및 환원력과 같은 항산화 효과는 없는 것으로 나타났다. MTT 실험을 수행한 결과, RNEE는 농도 의존적으로 세포독성을 증가시켰다. 또한, RNEE는 tyrosinase 활성과 DOPA-oxidation 실험 결과에서 멜라닌 합성을 증가시켰다. RNEE는 살아있는 세포에서 L-DOPA에 의한 유발되는 melanin생성 촉진 효과는 없는 것으로 나타났으나, 과산화수소를 처리하여 melanin 생성을 감소시킨 대조군과 비교시 과산화수소 전처리 후 RNEE를 처리한 군에서는 melanin 생성 촉진 효과가 있는 것으로 나타났다. 뿐만 아니라 RNEE는 tyrosinase related protein-2 (TRP-2)의 발현을 증가시키는 것으로 나타났으며, tyrosinase related protein-1 (TRP-1)의 단백질발현도 대조군과 비교시 $16{\mu}g/ml$의 농도에서 증가되는 것으로 나타났다. 특히 superoxide anion을 과산화수소로 변환시키는 SOD-3의 발현을 조사한 결과 $16{\mu}g/ml$ 이상의 농도에서 대조군과 양성 대조군인 ${\alpha}$-MSH보다 단백질 발현이 증가하는 것으로 나타났다. 그러므로, 이상의 결과는 서목태가 흑모와 관련 있는 멜라닌 생성을 촉진하는 기능적인 잠재성을 가지고 있다는 것을 암시한다.
Kojic acid was investigated for its antifungal activity against the human pathogenic fungi including Candida albicans, Cryptococcus neoformans and Trichophyton rubrum. For C. albicans, C. neoformans and T. rubrum, the MIC(minimum inhibitory concentration) of kojic acid was 640, 80 and 160 ${\mu}g/ml$, respectively. In C. neoformans, melanin-producing yeast, kojic acid-treated nonmelanized cell was more susceptible to magainin than melanized cell, suggesting melanin give a protective function against microbial peptide.
Purified melanin pigment from Klebsiella sp. GSK was characterized by thermogravimetric, differential thermal, X-ray diffraction and elemental analysis. This melanin pigment is structurally amorphous in nature. It is thermally stable up to $300^{\circ}C$ and emits a strong exothermic peak at $700^{\circ}C$. Its carbon, hydrogen and nitrogen composition is 47.9%, 6.9% and 12.0%, respectively. It was used to scavenge metal ions and free radicals. After immobilizing the pigment and using it to adsorb copper and lead ions, the metal ion adsorption capacity was evaluated by atomic absorption spectroscopy (AAS) and the identity of melanin functional groups involved in the binding of metal ions was determined by Fourier transform infrared (FT-IR) spectroscopy. Batch adsorption studies showed that 169 mg/g of copper and 280 mg/g of lead were adsorbed onto melanin-alginate beads. The metal ion adsorption capacity of the melanin-alginate beads was relatively significant compared to alginate beads. The metal ion desorption capacity of HCl was greater (81.5% and 99% for copper and lead, respectively) than that of EDTA (80% and 71% for copper and lead, respectively). The ability of the melanin pigment to scavenge free radicals was evaluated by inhibition of the oxidation of 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) and 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS) and was shown to be about 74% and 98%, respectively, compared with standard antioxidants.
Although statins, inhibitors of 3-hydroxy-3-methylglutaryl-coenzyme A (HMG-CoA) reductase, have been shown to increase melanin synthesis, the exact mechanism of this action is not fully understood. In this study we investigated the possible involvement of intracellular $Ca^{2+}$ signal in the mechanism of stimulation of melanin synthesis induced by lovastatin in B16 cells. Lovastatin stimulated the production of melanin in a dose-dependent manner in the cells. Treatment with mevalonate, FPP and GGPP, precursors of cholesterol, did not significantly suppress the lovastatin-induced melanin production, suggesting that inhibition of cholesterol synthesis may not be involved in the mechanism of the action of lovastatin. In addition, lovastatin did not significantly alter the cAMP concentration and the stimulated production of melanin by lovastatin was not significantly changed by treatment with H89, a potent inhibitor of protein kinase A, which demonstrates that cAMP pathway may not be involved. However, lovastatin increased intracellular $Ca^{2+}$ concentration in a dose-related fashion. Treatment with EGTA, an extracellular $Ca^{2+}$ chelator did not significantly alter the lovastatin-induced intracellular $Ca^{2+}$ increase and melanin synthesis, whereas intracellular $Ca^{2+}$ reduction with BAPTA/AM and intracellular $Ca^{2+}$ release blockers (dantrolene and TMB-8) completely blunted these actions of lovastatin. Taken together, these results suggest that the intracellular $Ca^{2+}$ release may play an important role in the lovastatin-induced stimulation of melanin synthesis in B16 cells. These results further suggest that lovastatin may be useful for the treatment of hypopigmentation disorders, such as vitiligo.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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