Kobayashi, Yasuo;Koike, Satoshi;Taguchi, Hidenori;Itabashi, Hisao;Kam, Dong K.;Ha, Jong K.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.17
no.6
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pp.877-884
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2004
Although gut microbial functions have been analyzed through cultivation of isolated microbes, molecular analysis without cultivation is becoming a popular approach in recent years. Gene cloning studies have partially revealed the mechanisms involved in fiber digestion of individual microbe. The molecular approach finally made it possible to analyze full genomes of the representative rumen cellulolytic bacteria Fibrobacter and Ruminococcus. The coming database may contain useful information such as regulation of gene expression relating to fiber digestion. Meanwhile, unculturable bacteria are still poorly characterized, even though they are main constituents of gut microbial ecosystem. The molecular analysis is essential to initiating the studies on these unculturable bacteria. The studies dealing with rumen and large intestine are revealing considerable complexity of the microbial ecosystems with many undescribed bacteria. These bacteria are being highlighted as possibly functional members contributing to feed digestion. Manipulation of gut bacteria and gut ecology for improving animal production is still at challenging stage. Bacteria newly introduced in the rumen, whether they are genetically modified or not, suffer from poor survival. In one of these attempts, Butyrivibrio fibrisolvens expressing a foreign dehalogenase was successfully established in sheep rumen to prevent fluoroacetate poisoning. This expands choice of forages in tropics, since many tropic plants are known to contain the toxic fluoroacetate. This example may promise the possible application of molecular breeding of gut bacteria to the host animals with significance in their health and nutrition. When inoculation strategies for such foreign bacteria are considered, it is obvious that we should have more detailed information of the gut microbial ecology.
Cytokines play a central role in the mucosal immune response and are involved in regulation of nutrient absorption, metabolism and animal growth. This study investigated the effect of diet manipulation with specialized protein or peptide sources on expression of cytokine (IL-1, IL-6, IL-10, and TNF-${\alpha}$) mRNA abundance in different intestinal regions and at different ages post-weaning in piglets. A total of 48 (17 days of age, $6.16{\pm}0.34kg\;BW$) weanling pigs were fed either a corn-soy/whey protein basal diet, the basal diet supplemented with spray-dried plasma protein (SDPP), or the basal diet supplemented with $Peptiva^{(R)}$, a hydrolyzed marine plant protein. A fourth treatment group was fed the SDPP diet, but the feed intake level was limited (SDPP-LF). Pigs were killed at 3 and 10 d, and intestinal cytokine mRNA was measured by real-time PCR using the relative quantification method. The SDPP-LF group exhibited an increased TNF-${\alpha}$ mRNA abundance compared with the ad libitum SDPP group (p<0.05). The TNF-${\alpha}$ and IL-10 mRNA abundance increased from the proximal to distal part of the intestine, and the mRNA abundance was greater (p<0.01) in the distal intestine as compared with the proximal and middle intestine. The cytokines IL-1-${\beta}$, IL-10 and TNF-${\alpha}$ mRNA abundance also increased from d3 to d10 postweaning (p<0.01). In summary, restricted feeding increased the TNF-${\alpha}$ mRNA abundance in the small intestine, however neither SDPP nor peptide supplementation affected cytokine mRNA expression. Abundance of mRNA for most cytokines examined in this study increased with age post-weaning, suggesting that during 10 d after weaning the mucosal immune system is still under development.
Several studies arduously reported that gayal (Bos frontalis) is an independent bovine species. The population size is shrinking across its distribution. In Bangladesh, it is the only wild relative of domestic cattle and also a less cared animal. Their body size is much bigger than Bangladeshi native cattle and has prominent beef type characters along with the ability to adjust in any adverse environmental conditions. Human interactions and manipulation of biodiversity is affecting the habitats of gayals in recent decades. Besides, the only artificial reproduction center for gayals, Bangladesh Livestock Research Institute (BLRI), has few animals and could not carry out its long term conservation scheme due to a lack of an objective based scientific mission as well as financial support. This indicates that the current population is much more susceptible to stochastic events which might be natural catastrophes, environmental changes or mutations. Further reduction of the population size will sharply reduce genetic diversity. In our recent investigation with 80K indicine single nucleotide polymorphism chip, the $F_{IS}$ (within-population inbreeding) value was reported as $0.061{\pm}0.229$ and the observed ($0.153{\pm}0.139$) and expected ($0.148{\pm}0.143$) heterozygosities indicated a highly inbred and less diverse gayal population in Bangladesh. Prompt action is needed to tape the genetic information of this semi-domesticated bovine species with considerable sample size and try to investigate its potentials together with native zebu cattle for understanding the large phenotypic variations, improvement and conservation of this valuable creature.
The term 'animation' derived from the Latin 'anima' meaning spirit, life, or vitality. Although its original meaning was somewhat related to creation of life or incorporation of vitality into an inanimate or nonexisting entity by providing mobility through artificial manipulation, it is now used in a rather narrow sense to define collectively the cartoon-based films or tape-recordings and specialists who are involved in animation production or related areas are called animators. The current worldwide market for animation production is progressing and expanding enormously. Although the domestic animation market is ranked as third in the world in terms of overall quantity, the reality is that there are few high quality products that can compete with foreign animation products in the global markets. This issue is further discussed in this paper along with the current status of the domestic animation technology and production. This investigation concerns the comparative analysis of literature data on foreign and domestic animation, which can be a basis for the production of internationally competitive animation work.
This paper implements the standby power control system composed of a master device and slave devices. The standby power is managed by cutting power supply after controlling the relay of a slave device based on the authentication of master device's RFID card. RFID interface and wireless communication module are embedded in a master device, and one master device is linked with many slave devices in wireless. Each slave device executes the operation needed in power control independently. We implements the function of manual power on/off system in a slave device, and the function of user ID enrollment by switch manipulation in a master device. Also this system can communicate bidirectionally in wireless and runs on TinyOS. The result of experiment shows that the user authentication is executed in a master device and this authenticated information is transmitted to a slave device in wireless, and standby power is cutted by controlling the relay of a slave device. Installing this system in a building or an office, we can expect energy saving.
Xu, Zhaoxian;Cao, Changhong;Sun, Zhuzhen;Li, Sha;Xu, Zheng;Feng, Xiaohai;Xu, Hong
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.25
no.11
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pp.1819-1826
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2015
Poly(ε-ʟ-lysine) (ε-PL) is a novel bioactive polymer secreted by filamentous bacteria. Owing to lack of a genetic system for most ε-PL-producing strains, very little research on enhancing ε-PL biosynthesis by genetic manipulation has been reported. In this study, an effective genetic system was established via intergeneric conjugal transfer for Streptomyces albulus PD-1, a famous ε-PL-producing strain. Using the established genetic system, the Vitreoscilla hemoglobin (VHb) gene was integrated into the chromosome of S. albulus PD-1 to alleviate oxygen limitation and to enhance the biosynthesis of ε-PL in submerged fermentation. Ultimately, the production of ε-PL increased from 22.7 g/l to 34.2 g/l after fed-batch culture in a 5 L bioreactor. Determination of the oxygen uptake rate, transcriptional level of ε-PL synthetase gene, and ATP level unveiled that the expression of VHb in S. albulus PD-1 enhanced ε-PL biosynthesis by improving respiration and ATP supply. To the best of our knowledge, this is the first report on enhancing ε-PL production by chromosomal integration of the VHb gene in an ε-PL-producing strain, and it will open a new avenue for ε-PL production.
We have developed an efficient and precise method for genome manipulations in Bacillus subtilis that allows rapid alteration of a gene sequence or multiple gene sequences without altering the chromosome in any other way. In our approach, the Escherichia coli toxin gene mazF, which was used as a counter-selectable marker, was placed under the control of a xylose-inducible expression system and associated with an antibiotic resistance gene to create a "mazF-cassette". A polymerase chain reaction (PCR)-generated fragment, consisting of two homology regions joined to the mazF-cassette, was integrated into the chromosome at the target locus by homologous recombination, using positive selection for antibiotic resistance. Then, the excision of the mazF-cassette from the chromosome by a single-crossover event between two short directly repeated (DR) sequences, included in the design of the PCR products, was achieved by counter-selection of mazF. We used this method efficiently and precisely to deliver a point mutation, to inactivate a specific gene, to delete a large genomic region, and to generate the in-frame deletion with minimal polar effects in the same background.
Yeast Dekkera/Brettanomyces bruxellensis is probably the most common contaminant in wineries and ethanol production processes. The considerable economic losses caused by this yeast, but also its ability to produce and tolerate high ethanol concentrations, make it an attractive subject for research with potential for industrial applications. Unfortunately, efforts to understand the biology of D. bruxellensis and facilitate its broader use in industry are hampered by the lack of adequate procedures for delivery of exogenous DNA into this organism. Here we describe the development of transformation protocols (spheroplast transformation, LiAc/PEG method, and electroporation) and report the first genetic transformation of yeast D. bruxellensis. A linear heterologous DNA fragment carrying the kanMX4 sequence was used for transformation, which allowed transformants to be selected on plates containing geneticin. We found the spheroplast transformation method using 1M sorbitol as osmotic stabilizer to be inappropriate because sorbitol strikingly decreases the plating efficiency of both D. bruxellensis spheroplast and intact cells. However, we managed to modify the LiAc/PEG transformation method and electroporation to accommodate D. bruxellensis transformation, achieving efficiencies of 0.6-16 and 10-20 transformants/${\mu}g$ DNA, respectively. The stability of the transformants ranged from 93.6% to 100%. All putative transformants were analyzed by Southern blot using the kanMX4 sequence as a hybridization probe, which confirmed that the transforming DNA fragment had integrated into the genome. The results of the molecular analysis were consistent with the expected illegitimate integration of a heterologous transforming fragment.
Wang, Liang;Liu, Qinghua;Du, Yangguang;Tang, Daoquan;Wise, Michael J.
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.46
no.3
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pp.194-200
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2018
Glycogen plays important roles in bacteria. Its structure and storage capability have received more attention recently because of the potential correlations with environmental durability and pathogenicity. However, the low level of intracellular glycogen makes extraction and structure characterization difficult, inhibiting functional studies. Bacteria grown in regular media such as lysogeny broth and tryptic soy broth do no accumulate large amounts of glycogen. Comparative analyses of bacterial media reported in literature for glycogen-related studies revealed that there was no consistency in the recipes reported. Escherichia coli $DH5{\alpha}$ is a convenient model organism for gene manipulation studies with respect to glycogen. Additionally, M9 minimal salts medium is widely used to improve glycogen accumulation, although its composition varies. In this study, we optimized the M9 medium by adjusting the concentrations of itrogen source, tryptone, carbon source, and glucose, in order to achieve a balance between the growth rate and glycogen accumulation. Our result showed that $1{\times}M9$ minimal salts medium containing 0.4% tryptone and 0.8% glucose was a well-balanced nutrient source for enhancing the growth and glycogen storage in bacteria. This result will help future investigations related to bacterial physiology in terms of glycogen function.
Background: Conventional spinal saddle block is performed with the patient in a sitting position, keeping the patient sitting for between 3 to 10 min after injection of a drug. This amount of time, however, is long enough to cause prolonged postoperative urinary retention. The trend in this block is to lower the dose of local anesthetics, providing a selective segmental block; however, an optimal dose and method are needed for adequate anesthesia in variable situations. Therefore, in this study, we evaluated the question of whether only 1 min of sitting after drug injection would be sufficient and safe for minor anorectal surgery. Methods: Two hundred and sixteen patients undergoing minor anorectal surgery under spinal anesthesia remained sitting for 1 min after completion of subarachnoid administration of 1 ml of a 0.5% hyperbaric bupivacaine solution (5 mg). They were then placed in the jack-knife position. After surgery, analgesia levels were assessed using loss of cold sensation in the supine position. The next day, urination and 11-point numeric rating scale (NRS) for postoperative pain were assessed. Results: None of the patients required additional analgesics during surgical manipulation. Postoperative sensory levels were T10 [T8-T12] in patients, and no significant differences were observed between sex (P = 0.857), height (P = 0.065), obesity (P = 0.873), or age (P = 0.138). Urinary retention developed in only 7 patients (3.2%). In this group, NRS was $5.0{\pm}2.4$ (P = 0.014). Conclusions: The one-minute sitting position for spinal saddle block before the jack-knife position is a safe method for use with minor anorectal surgery and can reduce development of postoperative urinary retention.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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