Triphenyl Tetrazolium Chloride(TCC) reduction test is simple and sensitive to some residual antibiotics (especially to penicillin) in milk, but comparatively insensible to sulfo-namides. The volumn of sample is also large. Thus this study was undertaken to increase the detectable level of sulfonamides in raw milk. In this study, we used small transparent plastic hole and pulp disc instead of 10m1 test tube and made test medium in which was added 0.08%TTC, 0.3% agar, 10% skim milk, approximately $10^6$ CFU/ml streptococcus thermophilus and 5ppm Trimethoprim to enhance the sensitivity for sulfonamides The results of TCC reduction test by disc plate method were summarized as follows : 1. sensitivity to residual sulfonamides were much higher than official TCC reduction test. Detectable limites of sulfamethazine, sulfamerazine, sulfathiazole, sulfachloropy-ridazine, sulfadimethoxine, sulfamononethoxine, sulfadiazine and sulfaquinoxaline were 0.1-0.5ppm levels. 2. Detectable limites to some antibiotics were simillar or good than that of official method as 0.005-0.1ppm to three ${\beta}$ -lactams, 0.25-0.5ppm to one macrolide, 2-10ppm to three aminoglycosides, 0.2-0.5ppm to three tetracycline, 0.1-0.5ppm to chloramphenicol. 3. Only 0.1ml of milk was needed to test and the test medium could be stored appnoximatly 7days in the refrigerator. So test procedure was convenient than offcial method. 4. These results suggest that disc plate method is more useful to detect bacterial growth inhibition substances including sulfonamides in raw milk.
목적: 최근 4년간 서울아산병원에 내원한 소아청소년에서 분리된 폐구균의 항생제 감수성 양상을 파악하여, 3차 의료기관 내원 환자에서 발생한 폐구균 감염증에서 적절한 경험적 항균 요법을 제시하고자 하였다. 방법: 2014년 3월부터 2018년 5월까지서울아산병원어린이병원에폐구균감염으로입원하였던 18세미만의환아를대상으로 연령, 성별, 기저질환 및 폐구균의 ${\beta}-lactams$ 및 macrolide 항생제 감수성 양상을 후향적 의무 기록을 통해 조사하였다. Fallon 등이 제시한 Monte Carlo simulation 모델을 이용하여 경구 amoxicillin의 치료 효과를 예측하였다. 결과: 총 63례의 폐구균 감염증이 연구에 포함되었고, 87.3%(55례)는 기저질환이 있는 환아에서 발생하였다. 20.6%(13례)가 혈액(11례)을 포함한 무균성 체액에서 분리된 침습성 감염증이었으며, 폐구균에 의한 뇌수막염은 발생하지 않았다. Amoxicillin, 정주용 penicillin, cefotaxime 및 erythromycin에 대한 내성률은 각각 50.8%, 31.8%, 25.4% 및 95.2%이었으며, amoxicillin과 cefotaxime에 대한 고도 내성률은 각각 23.8% 및 9.5%이었다. Monte Carlo simulation에 의하면 경구용 amoxicillin을 90 mg/kg/day의 용량으로 투여 시 적절한 치료 효과를 기대할 수 있는 amoxicillin MIC 값은 $2.0{\mu}g/mL$ 이하로서 본 연구에서 포함된 비침습성 폐구균의 46.0%가 이 범위에 속하였다. 결론: 최근 4년간 기저질환을 가진 소아환자에서 분리된 폐구균 중 amoxicillin 및 cefotaxime에 고도 내성을 보이는 균주의 비율이 증가하였으며, erythromycin에 대하여 95% 이상 내성이다. 이에 다양한 기저질환을 동반한 고위험군 환아에서 발생한 폐구균 감염증에서 신중한 경험적 항생제 선택이 필요하겠으며, 침습 감염 및 내성 확산 방지를 위한 적절한 폐구균 백신 접종이 필수적이다.
The purpose of this study was to investigate the prevalence and genetic mechanisms of erythromycin resistance in staphylococci. A total of 102 erythromycin resistant non-duplicate clinical isolates of staphylococci [78. coagulase negative stapylococci (CNS), 24 Staphylococcus aureus] were collected between October 2003 and August 2004 in Istanbul Faculty of Medicine in Turkey. The majority of the isolates were from blood and urine specimens. Antimicrobial susceptibilities were determined by the agar dilution procedure and the resistance phenotypes by the double disk induction test. A multiplex PCR was performed, using primers specific for erm(A), erm(B), erm(C), and msrA genes.. Among the 78 CNS isolates, 57.8% expressed the $MLS_{B}-constitutive$, 20.6% the $MLS_{B}-inducible$, and 21.6% the $MS_B$ phenotypes. By PCR, 78.2% of these isolates harbored the erm(C) gene, 8.9% erm(A), 6.4% erm(B), and 11.5% msrA genes. In S. aureus, the constitutive $MLS_B$ (58.3 %) was more common than the inducible phenotype (20.8%). erm(A) was detected in 50% and erm(C) in 62.5% of the isolates, while 37.5% contained both erm(A) and erm(C). erm(C)-associated macrolide resistance was the most prevalent in CNS, while ermC) and erm(A, C) was the most prevalent in S. aureus.
Lincomycin as one of the lincosamides antibiotics have been mainly used in human and livestock fields, but have not been used in aquaculture. In this study, the distribution of minimum inhibitory concentration (MIC) values against lincomycin and the detection of the macrolide-lincosamide-streptogramin (MLS) resistance gene were confirmed in bacterial pathogens isolated from cultured olive flounder (Paralichthys olivaceus). Of the 107 strains isolated from Jeju, 36 strains of Gram-positive bacteria and 71 strains of Gram-negative bacteria were identified. Most of Streptococcus spp. was found to have a MIC value of less than or equal to 0.5 ㎍/mL, and Edwardsiella piscicida was found to have a MIC value higher than 1,024 ㎍/mL. V. harveyi and V. alginolyticus mostly showed MIC values of 256 ㎍/mL, but V. scophthalmi displayed values of 8~64 ㎍/mL. In the detection of MLS resistance gene, erm(B) was detected in 9 strains of Streptococcus spp., and erm(A) was confirmed in one strain.
목적: 본 연구는 최근 10년 동안 전주 예수병원에 쯔쯔가무시병으로 입원한 환자를 조사하여 소아와 성인의 임상 양상을 비교하고자 하였다. 방법: 2003년 1월부터 2012년 12월까지, 쯔쯔가무시병의 진단 기준에 포함되는 768명의 환자를 후향적으로 검토하여, 소아 49명, 성인 719명의 임상적 특징과 검사소견 및 합병증 등을 분석 비교하였다. 결과: 연도별 환자의 증가 추세는 소아와 성인 모두에서 뚜렷하게 보이지 않았고, 10월과 11월에 환자가 가장 많이 발생하였다. 남녀비에서 소아는 남아가 많은 반면에, 성인은 여자가 많았고, 거주 지역은 소아가 성인에 비해 도시가 더 많았다. 증상은 소아에서 발진과 가피가 많았고, 근육통은 성인에서 더 많았다. 검사상 소아는 빈혈이 많은 반면에, 혈소판, 간기능, 신기능의 이상 소견이 적었다. 입원 기간과 합병증에서는 성인보다 양호한 결과를 보였다. 소아에서 독시사이클린과 마크로라이드계열 항생제의 치료 효과를 비교하였을 때, 두 약제 간에 유의한 차이는 보이지 않았다. 결론: 쯔쯔가무시병 환자에서 소아는 남아에서 많았고, 발진 및 가피의 발생이 더 많았다. 검사상 이상 소견은 성인에 비해 경하였으며, 입원 기간이 짧고, 합병증이 적으며, 마크로라이드계열 항생제에도 동일한 치료 효과를 보였다. 따라서 유행 시기에, 소아에서 쯔쯔가무시병이 의심될 때에는, 세밀한 이학적 진찰과 혈청학적 검사를 실시하여 빠른 진단을 내릴 수 있도록 노력해야 하며, 상대적으로 부작용이 적은 마크로라이드계 항생제로도 좋은 치료 결과를 기대해 볼 수 있다.
M. pneumoniae는 지역사회폐렴의 중요한 원인균으로 대개 경증의 임상상을 보이지만 급성호흡곤란증후군을 일으킬 정도로 중증의 폐렴을 보이는 경우가 드물게 보고 되고 있다. 저자들은 일반적인 임상적인 경과와 달리 심한 폐침윤과 호흡곤란을 호소한 M. pneumoniae 폐렴 2예를 보고한다. 이들은 M. pneumoniae 폐렴의 전형적인 임상양상을 보이지 않았으나 중증지역사회폐렴의 양상을 보여 처음부터 새로운 퀴놀론이나 마크로라이드가 포함된 경험적 항생제 투여를 시작하였다. 또한 처음부터 M. pneumoniae IgG또는 IgM의 의미있는 상승과 추적검사에서 더욱 상승된 항체가를 보이고 혈청 검사에서 다른 감염증의 가능성을 배제하여 M. pneumoniae 폐렴으로 진단하였으며 합병증을 남기지 않고 치료가 되었다. 두 증례를 통하여 저자들은 M. pneumoniae 감염이 중증의 지역사회폐렴의 원인의 하나로 고려되어야 하며, 중증 폐렴소견을 보이는 경우에도 마크로라이드나 퀴놀론을 포함한 경험적 항생제 치료가 필요할 수 있음을 경험하여 보고한다.
Erm 단백질은 23S rRNA의 특정 아데닌 잔기 $N_6$ 위치에 methylation을 일으켜 임상적으로 중요하게 사용되는 macrolide-lincosamide-streptogramin B계 항생제에 내성을 유발시킨다. 최근 ErmC'에서 N-말단 catalytic domain과 C-말단 substrate binding domain를 연결하는 오목한 홈 형성부위에 존재하는 잘 보존된 아미노산 잔기가 기질과 상호작용하는 것으로 제안되었다. 우리는 ErmSF에서 두 domain의 연결 부위의 오목한 홈에 위치하여 기질과의 상호작용이 예상되며 또한 Erm 단백질들 사이에서 매우 높게 보존되어있는 237번 아르지닌 잔기를 치환하여 그 기능을 in vivo, in vitro상에서 검색하여 분석하였다. R237A 변이 단백질을 발현하는 세균은 야생형 단백질을 발현하는 세균과 비교하여 in vivo 상에서는 차이를 나타내지 않았으나 순수분리 한 후 in vitro에서의 효소 활성은 야생형에 비하여 51%만을 나타내어 그 잔기가 기질 부착 기능을 수행하고 있다고 제안할 수 있었다.
ErmSF는 23S rRNA의 A2058 (E. coli numbering)에 methylation을 유발하여 macrolide-lincosamide-streptogramin B ($MLS_B$)계 항생제의 부착을 저해함으로써 항생제 활성을 억제하는 내성인자 단백질인 Erm 단백질들 중의 하나이다. Erm 단백질들 사이에서 공통적으로 나타나는 $^{222}FXPXPXVXS^{230}$ (ErmSF numbering) 서열은 Erm 단백질인 ErmC'와 DNA methyltransferase인 M. Taq I의 구조를 분석한 연구에서 타깃인 adenine과 직접적으로 상호작용하는 부위로 제안되거나 확인되었다. 따라서 이 부분 중 Erm 단백질 사이에서 잘 보존되어있지는 않지만 염기성인 잔기의 특성상 기질인 RNA와 상호작용이 예상되는 223, 227번 arginine을 alanine으로 위치 지정 치환한 변이 단백질을 이용하여 그 잔기의 효소 활성에서의 역할을 확인하였다. 두 변이 단백질은 생체 내에서 그 활성을 여전히 유지하고 있어서 항생제인 erythromycin에 대하여 내성을 나타내었으나 in vitro 상에서는 R223A 또는 R227A가 야생형 ErmSF에 비하여 약 50%, 88%의 활성을 각각 나타내어 효소 활성에서 각 잔기가 결정적이지는 않지만 중요한 역할을 수행하고 있음을 확인하였다.
ERM 단백질은 23S rRNA의 A2058에 methylation시킴으로써 macrolide-lincosamide- streptogramin B $(MLS_B)$계 항생제의 부착을 저해하여 항생제의 활성을 억제하는 내성 인자 단백질로 monomethylase와 dimethylase로 나누어진다. Dimethylase와 비교되는 monomethylase의 특성을 밝히기 위해 dimethylase (ErmSF)와 monomethylase (TlrD)를 동시에 보유한 Streptomyces fradiae에서 tlrD를 클론하고 대장균에서 최초로 대략생산을 시도하여 $37^{\circ}C$에서 세포내 전체 단백질의 55%를 차지할 정도로 대량생산된 불용성 단백질을 얻어내었다. 그러나 ErmSF와는 달리 낮은 온도에서 대량생산된 단백질이 용해성 단백질로 전환되지 않고 불용성 단백질로 남아있었다. Thioredoxin과 샤페론인 GroESL은 모두 ErmSF의 경우와 마찬가지로 용해성 단백질로의 전환에 도움을 주지 않았다. 이러한 차이점은 천재까지 전혀 밝혀지지 않은 단백질내의 구조적 특성에 의한 monomethylase와 dimethylase의 차이점을 밝힐 수 있다는 가능성을 말해주는 것으로 추정된다. 그러나 ErmSF의 경우와 동일하게 SDS-PAGE에서 검색되지 않은 미량의 발현된 용해성 단백질이 TlrD를 함유한 세포에 항생제에 대한 내성을 나타내게 하였고 이렇게 발현된 내성은 monomethylase에 의한 내성에서 기대되는 내성과 일치하였다.
Methicillin-resistant coagulase-negative staphylococci (MRCNS) were isolated from the respiratory sites of chickens in 4 farms and slaughter house located in Chungnam provinces. Isolation of coagulase-negative staphylococci (CNS) was positive for 61 (26.6%) of the 229 chickens tested, and isolation of MRCNS was positive for 17 (27.9%) of the isolated CNS. A total of 17 MRCNS isolates were selected and subjected to identification. Of the 17 MRCNS isolates selected, 6 were identified as Staphylococcus cohnii, 2 as S. saprophyticus, 3 as S. simulans, 3 as S. lentus, 2 as S. carnosus, and 1 as S. xylosus. The MRCNS isolates were resistant to many beta-lactam antibiotics, and some isolates were also resistant to macrolide and aminoglycoside antibiotics. The mecA gene was detected in some isolates of each MRCNS strains. The mecA-positive isolates were classified into five staphylococcal cassette chromosome mec (SCCmec). SCCmec types I to IV were detected in isolates from chickens.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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