The purpose of this study was to determine the effects of mitomycin C on conjunctival fibroblast proliferation and apoptosis. Rabbit conjunctival fibroblast mono layers were treated with 48 hours application of mitomycin-C. The viability of cells was evauated by MTT assay. To examine the effect of mitomycin-C on the cell proliferation, immunocytochemistry for BrdU staning was performed. Then, we investigated whether mitomycin-C induced cell's apoptosis by TUNEL staining. As a result of MTT assay, the viability of cells was gradually inhibited in a dose dependent manner by mitomycin-C. The BrdU staining showed that mitomycin-C significantly suppressed the proliferation of conjunctival fibroblast at concentrations of 0.02% or more. When TUNEL assays were performed, the number of apoptotic cells increased 5.6-, 18.5-, and 33.8-fold compared with the control at 0.01, 0.02, and 0.04%, respectively, of mitomycin-C at 48 hours of exposure. Therefore, mitomycin-C may be useful as a regulator in the treatment of corneal diseases that manifest with scar formation and tumor of fibroblast expansion.
Cornis fructus was extracted by successive extraction and then fractionated with hexane extract to get active fractions. This study was performed to determine the cytotoxic effect of hexane extract from Cornis fructus on NIH 3T3 fibroblasts and cancer cell lines using MTT assay. Hexane extract showed cytotoxic effect against A549, B16 melanoma and MDA-MB-231. Futher fractionation with hexane extract was performed to obtain effective fraction, fraction 3 showed the cytotoxic effect against A549 and MDA-MB-231. In antimicrobial test of each fraction of hexane extract, fraction 5 showed antimicrobial activities against P. putida and P. aeruginosa.
목적 : 본 연구의 목적은 폐열해수, 장열번갈, 습열사리, 황달, 옹종정창등의 치료효능이 있는 연교약침액이 사람 기관지 상피세포주인 A549에 TNF-${\alpha}$ 및 IL-4를 투여하여 나타나는 케모카인의 발현에 미치는 영향을 관찰하고자 하는 것이다. 방법 : A549 세포주에 연교약침액을 농도별로 (0, 0.5, 1, 5, 10, 50 ${\mu}g/ml$) 전처치한 후, TNF-${\alpha}$ 및 IL-4를 투여하여 RANTES, eotaxin 및 TARC의 분비를 유도하고, 케모카인 분비량을 ELISA법을 이용하여 측정하였다. 실험에 사용한 연교약침액의 농도에 따른 세포 독성 유무를 관찰하고자 MTT assay를 수행하여 세포생존율을 측정하였다.결과 : 연교약침액의 농도가 세포내에서 독성을 일으키는지 MTT assay로 측정한 결과 세포독성은 관찰되지 않았으며, 연교약침액은 TNF-${\alpha}$ 및 IL-4투여로 인하여 증가된 RANTES, eotaxin 및 TARC의 분비를 통계학적으로 유의하게 감소시킴을 관찰하였다. 결론 : 연교약침액은 천식과 알레르기 질환에 관련이 있는 케모카인의 효과적인 감소를 이끌어 냄을 확인하였으며, 이러한 결과는 연교약침액이 천식 및 알레르기 환자에 대해 효과적인 임상 활용이 가능할 것으로 사료된다.
This study was conducted to investigate the antitoxic component in ethanol extract of Saururus chinesis (S. chinesis). The results were as follows: Generally, detoxication effects by s. chinesis extract increased in proportion to the extract concentration. non 8 $\mu\textrm{g}$/g dosage of S. chinesis extract was administered, it showed the highest antitoxic effects in metallothionein induction. After the extract treatment, body weights generally increased In proportion to the extract concentrations. from the above results, S. chinesis extract Increased Metallothionein concentration and decreased the toxicity of cadmium In rats. In vitro the antitoxic activity of ethanol extract of S. chinesis on NIH3T3 fibroblasts was evaluated by the MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide) and SRB (sulforhodamine B protein) assays. The light microscopic study was carried out to observe morphological changes of the treeated cells. $10^{-2}$mg/ml Concentrations of S. chinesis extract was shown significant antitoxic activity. The number of NIH 3T3 fibroblasts were increased and tend to regenerate. These result suggest that S. chinesis extract retains a potential antitoxic activity.
Ginsenoside Rp1 is one of ginseng saponins with chemotherapeutic activity. In this study, we investigated the effects of Rp1 on spleen cells. Spleen is a major immune organ consisted of crucial immune cells, such as T lymphocytes, B lymphocytes, natural killer cells, and some antigen-presenting cells. Although the anti-tumor potential of Rp1 was studied, the effects of Rp1 on immune cells have not investigated yet. A viability assay using 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT), flow cytometric analysis, Western blot analysis were used to detect cellular changes on Rp1-treated spleen cells. MTT assay showed that Rp1 decreased the viability of spleen cells. To further investigate the effects of Rp1 on activated spleen cells, we treated lipopolysaccharide (LPS) as a representative inflammatory agent and Rp1 on spleen cells in a combination. The surface expression levels of activation markers for lymphocytes, CD25 and CD69 were measured. Apoptotic analysis revealed the cytotoxic effects of Rp1 on both na$\ddot{i}$ve and activated cells, and the expression pattern of some apoptosis-related proteins was correlated to apoptotic events of cells. Taken together, ginsenoside Rp1 increases the cellular death of spleen cells and also inhibits the LPS-induced activation of spleen cells.
For the better success of biomedical implant surgery, we used a modified solution combustion method to synthesize Hydroxyapatite (HA) and Chromium ($Cr^{3+}$) modified Cr-HA with different concentrations of 0.5, 1.0, 1.5, 2.0 and 2.5. The Cr-HA nanopowder was characterized by TGA, XRD, SEM-EDS and TEM. The HA and Cr-HA powders were subjected to in vitro biological studies to determine their biocompatibility and hemocompatibility. The cytotoxicity of HA and Cr-HA were evaluated on Hela (Cervical cancer) cells and L929 (mouse fibroblast) cells by using MTT assay. Hemocompatibility studies demonstrated a noticeable haemolytic ratio below 5%, which confirms that these materials are compatible in nature with human blood. The results of the present work confirm that the synthesised HA and Cr-HA are biocompatible and can be extensively used in the biomedical field to improve overall material biological properties.
면역 결핍 바이러스와 허피즈 바이러스 -1,2에 대한 한약의 항바이러스 작용을 관찰하기 위하여, 세포 바이러스 검색에 초기 독성과 감염 바이러스의 생존 세포 수를 비교적 단기간내 볼 수 있는 96-well plate를 이용한 MTT assay로 측정하였다. 본 실험은 예비 실험 단계에서 사용된 총 85가지의 한약중 단미제 6가지와 복합처방 44가지를 선정하였으며 복합처방은 유사한 치법으로 분류하였고 한약의 시료 추출은 순수하게 물로 전탕하여 여과하였다. 실험 결과 파두와 맥아가 면액 결핍 바이러스에 대해 감염초기 유의성이 있었으며 호장근, 갈근우방자탕과 형방패독산이 허피즈 바이러스-1,2에 대해 감염초기 유의성이 있었으나 실험의 시간 경과에 따른 지속적인 약효 안정성을 보이지는 못하였다. 이 실험을 통하여 한약을 이용한 우수한 바이러스 치료를 개발하기 위해서는 단미제나 복합 처방에서 항바이러스 작용이 큰 유효성분의 대량 분리와 세포 실험에 있어서 오차를 줄 일 수 있는 세포면역학적 실험의 도입 등이 필요할 것으로 사료된다.
Low level laser therapy has various therapy effects. This paper performed the basic study for developing the Low Level Laser Therapy Equipment for medical treatment. The apparatus has been fabricated using the laser diode and microprocessor unit. This equipment was fabricated using a micro-controller and a laser diode, and designed to enable us to control light time, frequency and so on. In this study, the designed device was used irradiation to find out how 850 nm laser diode affected the cell proliferation of RAT bone-marrow cells. Experiment was performed to irradiation group and non-irradiation group for Rat bone marrow cells. MTT assay method was chosen to verify the cell increase of two groups and the effect of irradiation on cell proliferation was examined by measuring 590 nm transmittance of micro plate reader. As a result, the cell increase of Rat bone marrow cells was verified in irradiation group as compared to non-irradiation group. The fact that specific wavelength irradiation has an effect on cell vitality and proliferation is known through this study.
Seok-jeong (SJ) is a solution of various metal ions and numerous other organic substances produced through extraction and fermentation of herbs and soil using geo-microbes, and it has been shown to improve symptoms of senile dementia. In this study, we investigated the protective effects of SJ against neurotoxicity of cadmium in HT22 hippocampal neuron cell line. SJ significantly protected from the cadmium-induced decreased cell viability measured by MTT assay (p<0.01). The protective effects of SJ against cadmium toxicity were confirmed through observing morphological changes using inverted microscope. Additionally, SJ significantly repressed the formation of lipid peroxidation induced by high concentration of cadmium, and likewise, significantly repressed the reduction of glutathione by cadmium in HT22 cells. Vitamin C at the concentration found in SJ did not show any protective effect against cadmium toxicity in HT22 cells, indicating that vitamin C may not have a major role in the protective mechanism of SJ. Taken together, these results suggest that SJ may be a valuable agent for the protection of cadmium toxicity on the neuronal cells, and that the mechanism of the action of SJ may be due to reduced lipid peroxidation and increased glutathione level.
To investigate the mutation inducibility of surfactin C, we performed the chromosome aberration assay with Chinese hamster lung cells in vitro. The colorimetric MTT screening assay was carried out to determine the cytotoxicity index ($IC_{50}$) of surfactin C. The $IC_{50}$ value was $125{\mu}g/ml$. For the chromosome aberration test of surfactin C, the maximum concentration was employed as $125{\mu}g/ml$, followed by 62.5 and $31.25{\mu}g/ml$ for the lower concentrations, with or without metabolic activation (S9). Cyclophosphamide and mitomycin C were used as positive controls in the presence and absence of S9 metabolic activation, respectively. These results showed that surfactin C was not capable of inducing chromosome aberration, as measured by the chromosome aberration test using Chinese hamster lung cell line. There is no evidence for surfactin C to have a genotoxic potential.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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