An efficient plant regeneration system in alfalfa (Medicago sativa L.) through somatic embryogenesis was established. Embryogenic callus was obtained by culture of hypocotyl segments on MS medium with 0.02mg $L^{-1}$ IAA and 1.0mg $L^{-1}$ zeatin after 45 days of culture. Embryogenic calli were converted to the somatic embryos when transferred to either MS medium without plant growth regulators (PGRs) or MS medium containing various cytokinin (BA, kinetin and zeatin). Most of the somatic embryos were developed into plantlets on MS medium supplemented with 0.1 mg $L^{-1}$ kinetin. Also, secondary embryos appeared on the surface of primary embryo but they showed abnormal growth. Regenerated plantlets were transplanted to pots containing vermiculite and perlite for further analysis.
Proceedings of the Korean Society of Grassland Science Conference
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1999.06a
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pp.75.1-75
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1999
제초제 저항성 형질전환 목초 생산을 위하여 유전자총(Gene-gun) 및 Agrobacterium 기법을 이용하여 형질전환을 시도한 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 공시재료 : 알팔파 (cv. Vernal, Anker), 오차드그라스 (합성19호) 2. 캘러스의 유도 및 증식 : 알팔파 종자를 SH-3 배지 (SH기본배지, 2,4-D 3mg/L 포함) 그리고 오차드그라스 종자를 MS-5 배지 (MS기본배지, 2,4-D 5mg/L, 2g casein hydrolysate 포함)에 치상하여 캘러스를 유도하였다. 유도된 캘러스는 증식을 위하여 SH-3 및 MS-3 배지 (MS기본배지, 2,4-D 3mg/L, 2g casein hydrolysate 포함)에서 2주 간격으로 subculture 하였다.(중략)
A sensitive method for the determination of methamphetamine(MA) and amphetamine(AM) in hair was developed by gas chromatography/mass spectrometry using stable isotope-labeled internal standards, amphetamine-d$_{5}$ and methamphetamine-d$_{5}$. Hair sample was washed with MeOH, incubated with MeOH(I% HCI) overnight at $37^{\circ}C$ while stirring and extracted using solid phase extraction column on a vacuum manifold. The extract obtained was pentafluoropropionated, and applied to GC/MS. The calibration curves of MA and AM were linear from 2.5 to 250 ng (r>0.99 for both). The limit of detection was 0.1 ng/mg in hair and cut-off level was set at 0.25 ng/mg for both. Hair samples of 27 MA abusers showed positive results in the range 0.7 to 106.8 ng/mg. AM, its metabolite, was detected in 20 out of 27 samples. The ratio of MA versus AM was 4.6~38.3 in specimens. Hair analysis for methamphetamine by GC/MS is an effective method for identifying long-term drug abusers.
The authors describe a method for monitoring dicyclanil levels in lamb and chicken muscle tissues. The devised procedure involves dicyclanyl extraction by SPE and its detection HPLC-UV/Vis and LC/MS/MS. The method was found to have LOD and LOQ values of $0.02\;mg\;kg^{-1}$ and $0.05\sim0.06\;mg\;kg^{-1}$, respectively. The intraday precision and an accuracy of spiked samples were found to have 2.3~10.4 RSD% and 80.9~105.7%, respectively.
In an attempt to optimize the in vitro-regeneration conditions necessary for the genetic manipulation of tomato species, we examined 'Ailsa Graig' cultivar of Lycopersicon for regeneration ability. The basal medium used for callus formation and shoot regeneration was MS (MS + vitamin) supplemented with six combinations of zeatin 2 mg/l, zeatin 2 mg/l + IAA 0.1 mg/l, zeatin 2 mg/l + IAA 0.5 mg/l, zeatin 4 mg/l, zeatin 4 mg/l + IAA 0.1 mg/l and zeatin 4 mg/l + IAA 0.5 mg/l. When all conditions tested were considered, however, only zeatin 2 mg/l was shown to be the best in shoot regeneration. The morphological characterization from in vitro-cultured callus of Lycopersicon esculentum L. var. 'Ailsa Craig' was investigated with scanning electron microscope (SEM). The surfaces of in vitro-cultured callus had well-defined epidermal cell in condition of zeatin 2 mg/l, but those of different treatments were twisted. These results suggested that shape of callus was involved in efficiency of shoot regeneration in tomato 'Ailsa Craig'.
Kim, Ji Ah;Moon, Heung Kyu;Kim, Yong Wook;Bae, Eun Kyung
Journal of Plant Biotechnology
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v.42
no.3
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pp.235-238
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2015
Adventitious buds were obtained from isolated cotyledons cultured on MS medium with various concentrations of 6-benzylamino purine (BA) and thidiazuron (TDZ). The highest numbers of adventitious buds were obtained on MS medium supplemented with 0.2 mg/L BA. Experimental culturing with half the petiole portion and half with the terminal segments were grown on MS medium contained with 0.2 mg/L BA. Frequency of the adventitious bud induction was variable accordingly to the type of cultured explants. Explants with the half petiole showed the highest adventitious bud induction rate (80%) compared to explants of half with terminal segment (20%). An elongated shoot from the buds and growth of advent roots were both possible on the 1/2 MS medium without a plant growth regulator. These results offer an effective way in which clonal propagation can be accomplished.
Hypocotyl explants from 7 days old seedlings of one $F_1$ hybrid cultivar and two pure lines of cucumber formed embryogenic calli at frequencies of up to 8% when cultured on Murashige and Skoog medium (MS) supplemented with 1 mg/L 2,4-D for 3 weeks. Embryogenic calli gave rise to somatic embryos. When slices of somatic embryos were cultured on the same medium for 4 weeks, they formed embryogenic calli. Embryogenic cell suspension cultures were established with embryogenic calli in MS liquid medium with 1 mg/L 2,4-D. Embryogenic potential of cell suspension cultures was maintained by subculturing every seven days. When the level of 2,4-D in the medium was lowered to 0.2 mg/L by diluting with liquid MS basal medium, embryogenic cell suspension cultures underwent development into numerous somatic embryos. When plated onto MS basal medium, over 95% of somatic embryos developed into plantlets. Plantlets were transplanted to potting soil and grown to maturity.
Cucumber (Cucumis sativus L.) plants were regenerated through organogenesis and somatic embryogenesis in cotyledon and hypocotyl cultures. The shoots were efficiently formed on the basal region of cotyledons cultured on MS medium containing 1.0㎎/L zeatin and 0.1㎎/L IAA in all cultivars used. Embryogenic calli were formed on hypocotyl segments cultured on MS medium containing 1.0㎎/L 2,4-D in cv. group 'Nakhab' and maintained by consecutive subculture on the same medium every 2-3 weeks without loss of embryogenic ability. Upon transfer to MS basal medium, high frequency somatic embryogenesis was achieved easily from embryogenic callus. Regenerated plantlets through organogenesis and somatic embryogenesis were transplanted to pots and gradually acclimatized to greenhouse condition where they subsequently produced fruits.
To investigate the optimal conditions for shoot organogenesis in Astragalus sinicus L., hypocotyl explants were cultured in Murashige & Skoog's (MS) medium supplemented with 0.1, 1.0, 2.0, or 4.0 mg/L 2,4-dichlorophenoxy acetic acid (2,4-D) for 6 weeks. 2,4-D concentration significantly effected morphogenesis: some produced calli with adventitious shoots and roots, some produced calli with adventitious roots, some produced only calli, and some produced deep-brownish calli with roots. The formation of calli with shoots and/or roots was observed at lower levels of 2,4-D, whereas calli without shoots or with deep-brownish roots were formed after treatment with higher levels of 2,4-D. Also, a shoot organogenesis ability of callus clones was observed after treatment with medium with 0.1 or 1.0 mg/L 2,4-D grown in MS medium with combinations of benzyl adenine (BA) and 2,4-D for 4 weeks. Medium with a combination of BA and 2,4-D was effective for shoot formation, whereas root organogenesis from calli decreased. The greatest amount of shoot formation was obtained when calli were cultured in MS medium containing 1.0 mg/L 2,4-D and 0.5 mg/L BA. Upon shoot transfer into 1/2 MS basal medium, plantlets developed, and the plantlets grew well in soil in a greenhouse.
This experiment was carried out to develop rapid mass propagation via shoot organogenesis system from adventitious roots of Rehmannia glutinosa. The induction of adventitious roots from leaf explants was most favorable to MS solid medium supplemented with 2mg/L IBA. However, the growth of adventitious roots was highest when they were cultured on 1/3 strength MS liquid medium supplemented with 2mg/L IBA. When the adventitious roots were grown in 10L bioreactor, 10g roots as initial inoculum was increased to 225g after 6 weeks of culture. The harvested roots were cultured onto solid medium to induce plant regeneration. The optimal adventitious shoot formation was observed on MS medium supplemented with 2mg/L BA. Rooting of individual shoots was induced after transfer to half strength MS medium without growth regulators. Plantlets after acclimatization were successfully transplanted in the field and no phenotypic variation was observed among them.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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