Objectives: This study was designed to investigate the analysis of apoptosis by Scirpi Tuber in Hela cell and MCF-7 cell. Methods: For cytotoxic effect of Scirpi Tuber extract, Scirpi Tuber extract were cultured on NIH3T3 cell in vitro. After treatment with various concentration of Scirpi Tuber, cell growth was evaluated in Hela cell and MCF-7 cell. Hoechst 33342 staining was performed to estimate DNA fragment effect of Scirpi Tuber on the apoptosis in Hela cell and MCF-7 cell. Annexin V/PI apoptosis assay was used to estimate the effects of Scirpi Tuber on the early apoptosis in Hela cell MCF-7 cell. All the stained cells were analyzed by a FACS. RT-PCR was used to estimate the apoptosis gene expression effect of Scirpi Tuber extract on Hela cell and MCF-7 cell. Results: Cytotoxic effect of Scirpi Tuber extract was not found on per NIH3T3 cell. The viability of Hela cell was significantly decreased Scirpi Tuber (500, $1000{\mu}g/m\ell$) in Hela cell 1day, 3day and 5days after treatment (p<0.01). The viability of MCF-7 cell was significantly decresed Scirpi Tuber ($1000{\mu}g/m\ell$) in MCF-7 cell (p<0.01), Scirpi Tuber ($500{\mu}g/m\ell$) in MCF-7 cell only 3days after treatment (p<0.01). In RT-PCR analysis, after treatment of $100{\mu}g/m\ell$ of ACR extract, BCL-2 were decreased and BAX, caspase-3 were increased both in Hela cell and MCF-7 cell. DNA fragmentation was observed the Scirpi Tuber on Hela cell and MCF-7 cell. As time goes on DNA fragmentation incresed. In Annexin V/PI apoptosis assay, after treatment of $1mg/m\ell$ of Scirpi Tuber, the early apoptotic cell increased both in Hela cell and MCF-7 cell. As time goes on apoptotic cell increased. Conclusion: Scirpi Tuber appears to have considerable activity on the apoptosis in Hela cell and MCF-7 cell.
Farrerol은 중국에서 거담제로 사용되어온 전통 한약제로 사용된 산진달래(만산홍, Rhododendron dauricum L.)에서 유래된 플라바논이다. Farrerol은 항산화, 항염증 및 항균 작용을 포함한 다양한 생리 활성이 보고되었다. 하지만 farrerol의 MCF-7에 대한 항암 작용은 아직 보고된 바가 없다. 본 연구에서 인간 유방암 MCF-7 세포에 대한 farrerol의 처리가 세포증식을 억제하고 apoptosis를 유도함을 입증하였다. MCF-7 세포에 ferrerol을 48시간 동안 처리했을 때, 이는 통계적으로 유의한 세포증식 효과를 나타냈으며 이의 IC50 값은 145.04±1.4 μM임을 확인하였다. 또한, farrerol이 세포사멸을 유도함을 TUNEL assay와 FACS를 이용한 Annexin V/PI 염색을 통해 검증하였다. 이러한 항암 효능의 작용기전으로써, farrerol의 처리가 BAX/Bcl-2 및 Caspase-3활성화와 PARP 분절화를 증가시켜 세포자살을 촉진한다는 것을 확인하였다. 결론적으로, 본 연구의 결과는 farrerol이 apopotosis 관련 단백질의 활성 및 발현조절을 통해 MCF-7 유방암세포에 대한 항암 효능을 갖는다는 것을 보여주고 있다.
아스피린과 아스피린의 deacetylated form인 sodium salicylate (NaSal)은 대장암, 폐암 및 유방암을 비롯한 다양한 암의 항암제 활성을 나타내는 것으로 잘 알려져 있다. A549 폐암 세포주에 저농도의 NaSal과 genistein을 함께 복합 처리시 상승작용에 의해 세포사멸을 증가시켜서 NaSal에 의한 암억제 효과를 증대시킴을 이미 밝힌바 있다. 본 연구에서는 A549가 아닌 다른 암세포주와 in vitro solid tumor model인 multicellular spheroids (MTS)을 이용하여 NaSal과 genistein 복합처리 효과를 조사하였다. NaSal/genistein 복합 처리시 A549 세포주와 마찬가지로 HCT116 세포주에서도 세포사멸이 유도되었지만, MCF-7 세포주에서는 유도되지 않았다. 흥미롭게도, MCF-7 세포주는 MTS로 배양되는 동안 NaSal/genistein 복합 처리에 의해 세포 죽음을 나타내었다. 세포 죽음의 형태는 MCF-7 MTS의 발달 단계에 따라 세포사멸 또는 세포괴사로 나타났다. MCF-7 MTS에서의 세포사멸은 불완전한 양상을 보였다. 즉 염색체가 응축되고 쪼개지지만, 핵막은 여전히 관찰되었다. 이상의 연구 결과 NaSal/genistein 복합처리는 MCF-7 MTS 배양 system에서 불완전한 세포사멸과 세포괴사를 일으킴을 알 수 있었다.
인간유방상피세포에서 H-ras가 침윤성과 세포 이동성을 유도한다는 것을 이 전연구에서 밝혔다. Phosphatidylinositol 3-kinase(PI3K)는 세포 이동성에서 중요한 역할을 하는 것으로 보고되고 있다. 본 연구에서 인간유방상피세포인 MCF10A에서 H-ras에 의해 유도된 침윤성에 PI3K가 어떠한 영향을 미치는지 살펴보고자 하였다. PI3K의 활성은 PI3K의 downstream molecule인 Akt의 인산화를 Western blot으로 확인하였다. Akt는 MCF10A, H-ras, N-ras MCF10A 세포에서 같은 정도로 발현되는 반면, 인산화된 Akt는 MCF10A 세포에 비해 H-ras MCF10A 세포와 N-ras MCF10A 세포에서 현저히 높게 나타났다. 이상의 결과로서 H-ras, N-ras 둘 다 PI3K를 활성화시키며, 침윤성과 세포이동성이 없는 N-ras MCF10A 세포에서도 PI3K가 활성화되었으므로, PI3K의 활성은 세포침윤성과 이동성을 유도하는데에 있어서 충분하지는 않음을 말해준다. PI3K의 저해제인 LY294002와 wortmannin을 세포에 처리하였을 때 세포침윤성과 이동성이 유의성 있게 감소되었다. 이상의 결과는 MCF10A 세포의 침윤성과 이동설에 있어서 PI3K의 활성이 충분하지는 않지만 반드시 필요하다는 것을 알 수 있었다.
Objectives : This study was carried out to investigate anti-proliferative effects on MCF-7 human breast cancer cells of Anemarrhenae Rhizoma (AR) extract. Breast cancer is the most common disease in Korean women. Despite remarkable improvements in treatment strategies against various cancers during the past 40 years. breast cancer still remains as one of the main causes of cancer mortality among women the whole world over. Methods : Be investigated the effects of AR on cytotoxicity of MCF-7 human breast cancer cells in various extract conditions (n-hexane, ethyl acetate, butanol and water fraction). Results : The extract of Anemarrhenae Rhjzoma inhibits the proliferation of MCF-7 cells in a dose dependent manner. Especially. the ethyl acetate fraction of Anemarrhenae Rhizoma showed specific Cytotoxicity on MCF-7 cells. Conclusions : In conclusion. it can be concluded that Anemarrhenae Rhizoma extract has an anti-proliferative effect on MCF-7 human breast cancer cells. Especially. the ethyl acetate fraction is most effective to inhibit proliferation of MCF-7 cells.
Objectives : This investigation was undertaken to evaluate the anti-proliferation of CURCUMAE LONGAE Rhizoma extracts using MCF-7, human breast cancer cells. Methods : MCF-7 cells were cultured in Dulbecco's modified Eagle's medium/F12 supplemented with 10% fetal bovine serum and antibiotics. At varying times after extract treatment, cells were harvested with scraper and processed for analysis of proliferation, cytotoxicity. Results : The extract of CURCUMAE LONGAE Rhizoma strongly inhibits the proliferation of MCF-7 cells in a dose and time-dependent manner. Sulforhodamine B assay showed that the addition of ethanol extract of CURCUlVIAE LONGAE Rhizoma reduced the viability of MCF-7 cells in a dose-dependent manner. Conclusion : So, it can be concluded that CURCUMAE LONGAE Rhizoma have an inhibitive effect on MCF-7 human breast cancer cells.
Objectives: This study aimed to evaluate the effects of Cuscutae Semen water extract (CS) on MCF-7 human breast cancer cells. Methods: To clarify the results, we cultivated MCF-7 cells in cell culture plates. And then we extracted each of $100{\mu}g/ml$, $300{\mu}g/ml$, $600{\mu}g/ml$ CS, gave it to MCF-7 cell. After these process we performed MTT assay to elucidate the ability of apoptosis. The result of mRNA was analyzed by RT-PCR. Results: Each of concentrated extracts CS decreased the survival rate of MCF-7 cells. CS decreased Bcl-2 which is known as a blocking cell apoptosis. Bax, caspase-3, P21 and RIP-1 that accelerate apoptogenic activity factors increased by CS. CS did not change the condition of caspase-8, caspase-9, P53 factors on MCF-7 cells. Furthermore caspase-8, caspase-9, P53 factors on MCF-7 cells does not make it more active but turn it on. Conclusions: According to the above results, we could suggest that CS can occur the apoptosis on MCF-7 cells.
Malignant catarrhal fever (MCF) is a systemic disease of ruminants caused by a gamma herpesvirus, ovine herpesvirus 2 (OvHV-2). Four 1-year old goats (Capra hircus), which were infected with MCF virus, OvHV-2, by being housed together with MCF virus-infected seep, were referred with a I-month history of chronic dermatitis. On the other hand, MCF virus-negative goats, which were isolated for negative control, had not those kinds of skin problems. Examination of the affected goats revealed generalized alopecia, patchy erythema, and superficial erosions with histologic evidence of mural folliculitis. Fungal culture tests and external parasite tests with the scraping skin samples were negative. However, polymerase chain reaction revealed the existence of MCF virus DNAs in the lesion. These results suggested that MCF virus may induce mural folliculitis and alopecia in goat.
The objective of this study is to evaluate the synergic effects of combined treatment with taurine and cisplatin in human breast cancer, MCF-7 cells. For this study, MCF-7 cells were treated with taurine (5, 10, and 20 mM) and cisplatin (0.5 ${\mu}M$) for 48 and 72 hrs. Co-treatment of cisplatin with taurine decreased cell proliferation more compared with cisplatin alone. Reduced cell proliferation was caused by apoptosis. Therefore we investigated the apoptotic cells. After treatment of cisplatin and taurine, apoptotic cells were slightly increased. Apoptosis-related proteins, cleaved caspases and cytochrome c were increased. The present study suggests that combination treatment of cisplatin with taurine enhance anticancer activity of cisplatin in MCF-7 cells.
Ras는 세포의 성장과 분화 등 여러 필수적인 세포기능에 없어서는 안될 중요한 역할을 담당하며 Ras가 mutation되면 암 등의 치명적인 결과를 초래한다. Ras 발현은 유방암에서 tumor aggressiveness의 지표로 간주되고 있으며 유방세포의 침습성과 연관이 있다고 알려져 있으므로 ras가 전이과정에 미치는 영향에 관한 연구는 중요한 의미를 갖는다. 본 연구의 선행연구결과, H-ras와 N-ras 모두 transformed phenotype을 나타내지만 H-ras 만이 암전이에 있어서 중요한 침윤성을 유도하는 것을 밝혔다. 이 결과는 MCF10A 세포에서 H-ras와 N-ras에 의한 신호전달경로가 각각 다른 생물학적 전이활성을 나타냄을 시사한다. 세포의 이동성은 침습성에 있어서 결정적인 역할을 하므로, 본 연구에서 H-ras와 N-ras로 형질전환된 MCF10A세포에서 이동성을 시험한 결과, 세포의 이동성이 N-ras가 아닌 H-ras MCF10A 세포에서만 크게 증가된다는 것을 보았다. 이는 침습성을 나타내는 H-ras가 세포의 이동성을 증가시키는데 작용한다는 것을 말한다. H-ras에 의해 유도된 침습성과 이동성에 대한 분자적 기전에 관하여 연구하기 위하여 H-ras MCF10A와 N-ras MCF10A 세포에서 Ras의 downstream effector들, 특히 mitogen-activated protein kinases(MAPKinases)들인 JNK1, ERK, p38의 활성화를 살펴본 결과 p38 MAPKinase가 H-ras MCF10A 세포에서 현저하게 활성화됨을 보았다. p38 MAPKinase 저해제인 SB203580를 처리하던지 dominant negative p38 (DN p38) transfectant로 p38을 불활성화시켰을 때 세포침습성 및 이동성이 저해되는 결과를 얻었다. SB203580 처리한 H-ras MCF10A 세포에서 전이에 관여하는 효소인 MMP-2 분비가 감소되었다. H-ras에 의해 유도된 침습성과 이동성은 DN JNK1 transfectant에서는 변화가 없었으나 DN MEK transfectants에서는 유의성있게 감소되었다. 이상의 결과를 종합하면, MCF10A 세포의 침윤성과 이동성에는 p38 MAPKinase 활성이 중심적인 역할을 하며, JNK 활성은 영향을 미치지 않고, ERK-1/2 활성은 충분하지는 않으나 필요하다는 것을 알 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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