Kim, Soon-Ja;Kim, In-Woo;Kwon, Yong-Nam;Yun, Eun-Young;Hwang, Jae-Sam
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.22
no.2
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pp.264-269
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2012
Recently, we reported that the synthetic Coprisin analog peptide 9-mer dimer CopA3 (consisted of all-L amino acid sequence) was designed based on a defensin-like peptide, Coprisin isolated from Copris tripartitus. The 9-mer dimer CopA3 (L-CopA3) had antibacterial activity and induced apoptosis in human leukemia cells via a caspase-independent pathway. In this study, all of amino acid sequences of L-CopA3 were modified to all D-form amino acids (DCopA3) to develop a more effective antimicrobial peptide. We investigated whether D-CopA3 had antimicrobial activities against pathogenic microorganisms and pro-apoptotic effects in human leukemia cells (U937, Jurkat, and AML-2). The synthetic peptide D-CopA3 had antimicrobial activities against various pathogenic bacteria and yeast fungus with MIC values in the 4~64 ${\mu}M$ range. Moreover, D-CopA3 caused cell growth inhibition, and increased the chromosomal DNA fragmentation and the expression of inflammatory cytokines, TNF-${\alpha}$ and IL1-${\beta}$, transcripts in human leukemia cells. The all-D amino acid peptide DCopA3 proved as effective as the L-CopA3 reported previously. These results provide the basis for developing D-CopA3 as a new antibiotic peptide.
High levels of xylanase activity (143.98 IU/ml) produced by the newly isolated Paenibacillus campinasensis G1-1 were detected when it was cultivated in a synthetic medium. A thermostable xylanase, designated XynG1-1, from P. campinasensis G1-1 was purified to homogeneity by Octyl-Sepharose hydrophobic-interaction chromatography, Sephadex G75 gel-filter chromatography, and Q-Sepharose ion-exchange chromatography, consecutively. By multistep purification, the specific activity of XynG1-1 was up to 1,865.5 IU/mg with a 9.1-fold purification. The molecular mass of purified XynG1-1 was about 41.3 kDa as estimated by sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). Sequence analysis revealed that XynG1-1 containing 377 amino acids encoded by 1,134 bp genomic sequences of P. campinasensis G1-1 shared 96% homology with XylX from Paenibacillus campinasensis BL11 and 77%~78% homology with xylanases from Bacillus sp. YA-335 and Bacillus sp. 41M-1, respectively. The activity of XynG1-1 was stimulated by $Ca^{2+}$, $Ba^{2+}$, DTT, and ${\beta}$-mercaptoethanol, but was inhibited by $Ni^{2+}$, $Fe^{2+}$, $Fe^{3+}$, $Zn^{2+}$, SDS, and EDTA. The purified XynG1-1 displayed a greater affinity for birchwood xylan, with an optimal temperature of $60^{\circ}C$ and an optimal pH of 7.5. The fact that XynG1-1 is cellulose-free, thermostable (stability at high temperature of $70^{\circ}C{\sim}80^{\circ}C$), and active over a wide pH range (pH 5.0~9.0) suggests that the enzyme is potentially valuable for various industrial applications, especially for pulp bleaching pretreatment.
Park, Jung Shin;Park, Sook-Young;Park, Chan-Ho;Kondratyuk, Sergii Y.;Oh, Soon-Ok;Hur, Jae-Seoun
Mycobiology
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v.45
no.4
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pp.270-285
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2017
The crustose lichen genus Pertusaria comprises over ca. 800 species worldwide. In total, 20 Pertusaria species were localized to the Mt. Sorak and Jeju-do in Korea. To date, information regarding the distribution of Pertusaria species in the South Korean peninsula is scarce. In this study, we collected Pertusaria species across South Korea and identified them based on morphological, chemical, and molecular characteristics. Of the 387 samples collected, we identified 24 taxa and 1 variety, of which 17 were previously recorded, and 6 taxa were newly found in South Korea (P. leioplaca, P. leucosora var. violascens, P. texana, P. thiospoda, P. thwaitesii, and P. xanthodes), 2 known species were transferred to Varicellaria (Varicellaria lactea and V. velata), one species was transferred to Variolaria as a new record (Variolaria multipunctoides) and one was a new species (P. jogyeensis J. S. Park & J.-S. Hur, sp. nov.). Characteristics of the newly discovered species, P. jogyeensis, are as follows: smooth to bumpy thallus, scattered to crowded poriform apothecia, blackish ostioles, definitely sunken, thin yellowish green rims around ostioles, 8-spored ascus, and the presence of perlatolic acid and thiophaninic acid (chlorinated xanthone). Phylogenetic studies on P. jogyeensis based on the mitochondrial small subunit sequence revealed proximity to P. flavicans and P. texana, and supported its classification as a new species within the genus Pertusaria. Additionally, we describe the chemical composition and morphology of all listed species in detail and provide an artificial key for identification.
Microbulbifer agarilyticus GP101 was isolated from the gut of a marine invertebrate Turbo cornutus and capable of degrading polysaccharide such as agar, alginate, and ${\kappa}$-carrageenan constituting algal cell wall. To obtain genomic basis of polysaccharide-degrading activity, we sequenced genome of strain GP101. The genome consists of 4,255,625 bp, 3,458 coding sequences with 55.4% G + C contents. BLASTP search revealed the presence of seven agarases, five alginate lyases, ten glucanases, four chitinases, two xylanases, one ${\kappa}$-carrageenase, and one laminarinase. The genomic data of strain GP101 will provide potential uses in the bioconversion process of diverse polysaccharide into bioenergy and biochemicals.
Tegumental and excretory-secretory proteins are reported as diagnostic antigens for human opisthorchiasis. Rhophilin associated tail protein1-like (OvROPN1L) protein of Opisthorchis viverrini sperm tail showed potential as a diagnostic antigen. The OvROPN1L recombinant fragments were assayed for diagnostic antigenicity for human opisthorchiasis using indirect ELISA. The strongest antigenic region was a N-terminus peptide of M1 - P56. One synthetic peptide (P1, L3-Q13) of this region showed the highest antigenicity to opisthorchiasis. Sera from other parasitic infections including Strongyloides stercoralis, hookworm, Taenia spp, minute intestinal flukes, Paragonimus spp showed lower reactivity to P1. Peptide P1 is located in the disordered N-terminus of ROPN1L supporting its suitability as linear epitope. In the Platyhelminthes the N-terminal sequence of ROPN1L is diverging with taxonomic distance further suggesting that peptide P1 has potential as diagnostic tool in the genus Opisthorchis/Clonorchis. It should be further evaluated in combination with peptides derived from other O. viverrini antigens to increase its diagnostic power.
A cDNA (SeMIPS) encoding myo-inositol 1-phosphate synthase has been isolated from developing sesame (Sesamum indicum L. cv. Dan-Baek) seeds and its structure and function analyzed. The SeMIPS protein was highly homologous with those from plant species (88-94%), while a much lower degree of sequence homology (60%) was found with that of human. The functional domains commonly found in MIPS protein were identified and their amino acid residues were compared with each other. Northern blot indicated that the expression of the SeMIPS gene might be organ-specifically regulated. A complementation assay based on a yeast mutant system confirmed that the SeMIPS gene encodes a myo-inositol 1-phosphate synthase (MIPS) of sesame by showing functional expression of the SeMIPS cDNA in the yeast mutants containing the disrupted INO1 gene.
L-asparaginase (EC 3.5.1.1) catalyzes the hydrolysis of the amide group of L-asparagine, releasing aspartate and $NH_4{^+}$. We isolated a low temperature-inducible cDNA sequence encoding L-asparaginase from soybean leaves. The full-length L-asparaginase cDNA, designated GmASP1, contains an open reading frame of 1,258 bp coding for a protein of 326 amino acids. Genomic DNA blotting and fluorescence in situ hybridization showed that the soybean genome has two copies of GmASP1. GmASP1 mRNA was induced by low temperature, ABA and NaCl, but not by heat shock or drought stress. E. coli cells expressing recombinant GmASP1 had 3-fold increased L-asparaginase activity. A possible function of L-asparaginase in the early response to low temperature stress is discussed.
Liquid phase adsorption equilibria of amines in an aqueous solution onto high silica zeolite pellets (HSZ), macroreticular resin particles (MR) and granular activated carbon (GAC) were determined using a batch bottle technique at 298K. The isotherm curves of HSZ-amines and GAC-amines indicate the nonlinear relationship of unfavorable adsorption type of HSZ-amines and favourable one of GAC-amines. However the curves of MR-amines represent the linear pattern of an adsorption isotherm. Among various equilibrium isotherms, the three parameters of the Redlich-Peterson equation and the two parameters of the Freundlich equation are found to be the most satisfactory within the range of this study. The two parameters of the Langmuir isotherm were not applicable to the present adsorption systems. The amines were adsorbed on the HSZ, MR and GAC in the following sequence of adsorptivity; aromatic amines > primary amines > secondary amines. The product of the Freundlich constants, k and n, proportionally increased with the boiling point, molar volume and dissociation constants of amines adsorbed on HSZ, MR and GAC.
Apolipoprotein B-100 (Apo-B100) is a major component of low density lipoprotein (LDL). Apo B-100 protein has 4,536 amino acid sequence and these amino acids are classified into peptide groups A to G with subsequent 20 amino acids (P1-P302). The peptide groups were act as immunoglobulin (Ig) antigens which oxidized via malondialdehyde (MDA). The mimetic peptide P1 (EEEMLENVSLVCPKDAT RFK) out of D-group peptides carrying the highest value of IgG antigens were selected for structural studies that may provide antigen specificity. Circular Dichroism (CD) spectra were measured for peptide secondary structure in the range of 190-250 nm. Experimental results show that P1 exhibit partial of ${\beta}-sheet$ and random coil structure. Homonuclear (COSY, TOCSY, NOESY) 2D-NMR experiments were carried out for NMR signal assignments and structure determination for P1. On the basis of these completely assigned NMR spectra and distance data, distance geometry (DG) and Molecular dynamics (MD) were carried out to determine the structures of P1. The proposed structure was selected by comparisons between experimental NOE spectra and back calculated 2D NOE results from determined structure showing acceptable agreement. The total Root-Mean-Square-Deviation (RMSD) value of P1 obtained upon superposition of all atoms was in the range $0.33{\AA}$. The solution state P1 has mixed structure of ${\beta}-sheet$ (Glu[1] to Cys[12]) and random coil (Pro[13] to Lys[20]). These NMR results are well consistent with secondary structure from experimental results of circular dichroism. Structural studies based on NMR may contribute to the studies of atherosclerosis and observed conformational characteristics of apo B-100 in LDL using monoclonal antibodies.
Proceedings of the Korean Institute of Electrical and Electronic Material Engineers Conference
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2004.11a
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pp.276-279
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2004
Plasma enhanced chemical vapor deposition (PECVD) of silicon nitride (SiN) is a proven technique for obtaining layers that meet the needs of surface passivation and anti-reflection coating. In addition, the deposition process appears to provoke bulk passivation as well due to diffusion of atomic hydrogen. This bulk passivation is an important advantage of PECVD deposition when compared to the conventional CVD techniques. A further advantage of PECVD is that the process takes place at a relatively low temperature of 300t, keeping the total thermal budget of the cell processing to a minimum. In this work SiN deposition was performed using a horizontal PECVD reactor system consisting of a long horizontal quartz tube that was radiantly heated. Special and long rectangular graphite plates served as both the electrodes to establish the plasma and holders of the wafers. The electrode configuration was designed to provide a uniform plasma environment for each wafer and to ensure the film uniformity. These horizontally oriented graphite electrodes were stacked parallel to one another, side by side, with alternating plates serving as power and ground electrodes for the RF power supply. The plasma was formed in the space between each pair of plates. Also this paper deals with the fabrication of multicrystalline silicon solar cells with PECVD SiN layers combined with high-throughput screen printing and RTP firing. Using this sequence we were able to obtain solar cells with an efficiency of 14% for polished multi crystalline Si wafers of size 125 m square.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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