Clonorchis sinearis is a liver fluke which is the most prevalent helminth of humans in Korea. The better diagnostic measure of clonorchiasis is required for its nationwide control program. The present study observed antigenic bands of C. sinensis and reacting immunoglobulins in serum of infected residents. Adult C. sinensis were recovered from experimentally infected rabbits and soluble crude extract of the worms was used as the antigen after supplementation of E-64, a cysteine proteinase inhibitor. SDS- PAGE of the crude antigen resolved more than 20 protein bands between 200 and 14 kDa. The sera of infected humans collected at an endemic village showed specific IgG and IgE antibodies but little IgM and IgA antibodies. The protein bands of 94, 80, 72, 68, 52, 47, 43, 37, 34, and 28-25 kDa strongly reacted with serum Ig(GMA) or IgG antibody and 64, 62, 52, 47,44, 34,28, and 26 kDa bands reacted with serum IgE antibody. However, the 94, 80, 72, 68, 64, 62, 52, 47, and 40 kDa bands of C. sinensis antigen were found non specific. The protein bands of 43, 34, and 28-25 kDa of C. sinensis are primary target molecules of further analysis.
The cholangiocarcinoma (CCA) is a relatively rare cancer worldwide but it is highly prevalent in Thailand where the liver fluke, Opisthorchis viverrini is endemic. There are reports that interleukin 6 (IL-6) may play an important role in the pathogenesis of opisthorchiasis associated CCA. Functionally, IL-6 can act on target cells through its receptor, IL-6R, and IL-6R polymorphisms may affect the functional activity of IL-6 leading to susceptibility to cholangiocarcinogenesis. Therefore, we assessed the association of the 48892 A/C (Asp358Ala) polymorphism in exon 9 of the IL-6R gene in 79 CCA cases compared to 80 healthy controls using the PCR-RFLP technique. The results showed significant differences between CCA cases and controls in overall genotype (p=0.001) and allele frequencies (p=0.0002). Chi-square for trend test revealed a significant association between genotype and CCA susceptibility (p=0.0002). The odds ratios (ORs) for genotype were 0.283 (95% CI=0.131-0.605, AC vs. AA; p=0.0003) and 0.206 (95% CI=0.196-1.245, CC vs. AA; p=0.0416), the OR for alleles was 0.347 (95% CI=0.187-0.633, allele C vs. allele A; p=0.0002) and that for the carrier C variant was 0.272 (95% CI=0.130-0.564; p=0.0001). This study demonstrated a close association between an IL-6R polymorphism, specifically higher A allele, and cholangiocarcinoma.
Yeoh, Kheng-Wei;Promthet, Supannee;Sithithaworn, Paiboon;Kamsaard, Supot;Parkin, Donald Maxwell
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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v.16
no.8
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pp.3413-3418
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2015
Background: Liver fluke infection caused by the parasite Opisthorchis viverrini (O. viverrini), a human carcinogen, is endemic in north-eastern Thailand and remains a major health problem. Objectives: The objectives of the study were to (1) resurvey the prevalence of O. viverrini infection in a field site from the Khon Kaen Cohort Study (in newly recruited subjects as well as previous cohort subjects surveyed in 1992); (2) investigate how subjects' lifestyle habits and their exposure to health promotion initiatives influence changes in prevalence of O. viverrini infection. Materials and Methods: The prevalence of O. viverrini infection in the cohort subjects (as well as new subjects) was investigated using faecal egg counts. Information on demographic factors, lifestyle and awareness of health promotion initiatives were obtained through questionnaires. Results: O. viverrini infection rates in the same individuals of the cohort were lower in 2006 than in 1992. Also, by studying the period effect, the current 35-44 year olds had a 12.4% (95% CI 3.9% to 20.9%) lower prevalence of O. viverrini infection than the 35-44 year olds in 1992 (24.2% versus 11.8%). Lifestyle choices showed that smoking and alcohol consumption were associated with an increased chance of acquiring O. viverrini infection with adjusted odds ratios of 10.1 (95%CI 2.4-41.6) and 5.3 (95%CI 1.2-23.0), respectively. Conclusions: Our study has demonstrated that although the prevalence of O. viverrini infection over a 14-year period has decreased, unhealthy lifestyle was common with smoking and alcohol consumption being associated with increased chances of infection, emphasising the double burden of disease which developing countries are facing.
Mun, Seong Hee;Hur, Jun Wook;Cha, Seung Joo;Hwang, Seong Don;Son, Maeng-Hyun;Kwon, Joon Yeong;Kwon, Se Ryun
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.51
no.1
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pp.47-53
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2018
The presence of pathogens in wild fish is a potential threat to the fish being raised nearby fish farm. Surveillance of these pathogens in the wild is, thus, highly important to keep fish in the farm safe from serious communicable diseases. Fish and crustacean were sampled 4 times at Soyang Lake in 2016. Pathogens for five reportable communicable diseases including KHVD (koi herpesvirus disease), SVC (spring viraemia of carp), EUS (epizootic ulcerative syndrome) and WSD (white spot disease), and parasites were investigated. In Soyang Lake, pale chub Zacco platypus was the most abundant. Forty seven pale chub, 8 Korea piscivorous chub Opsarichthys uncirostris, 3 oily shiner Sarcocheilichthys variegatus wakiyae and 2 crucian carp Cyprinus carassius were investigated for detection of target diseases of fish. Seventeen Caridina denticulata denticulata, 12 Oriental river prawn Macrobrachium nipponense and 1 Chinese mitten crab Eriocheir sinensis were used for detection of WSD. As the result, reportable communicable diseases were not detected in all the freshwater animals. Dactylogyrus was detected in Korea piscivorous chub. Copepoda was also detected in pale chub and Korea piscivorous chub. Metacercaria was detected in the pale chub sampled in September and October. Those were not metacercaria of liver fluke Clonorchis sinensis.
This study was carried out to investigate the prevalence of fascioliasis of slaughtered and farmed cattle in Gwangju area from February to November in 2007. A total of 1,000 cattle fecal samples were collected from slaughter houses (n=805) and farms (n=185). Twelve (1.2%) were found as positive cases with excretion of the egg of Fasciola spp in the fecal specimens, and 128 (12.8%) were positive in intestinal parasitism using the flotation and sedimentation procedures. The infection rate of fluke larvae from the slaughtered cattle at abattoirs in Gwangju was 0.75% (6 out of 805 heads). In histopathology, there were several liver lesions such as inflammation with infiltration of eosinophil, polymorphonuclear cells, mononuclear cells and multinucleated giant cells, proliferation of connective tissue, calcification and abscess formation.
Many immune down-regulatory molecules have been isolated from parasites, including cystatin (cystain protease inhibitor). In a previous study, we isolated and characterized Type I cystatin (CsStefin-1) of the liver fluke, Clonorchis sinensis. To investigate whether the CsStefin-1 might be a new host immune modulator, we induced intestinal inflammation in mice by dextran sodium sulfate (DSS) and treated them with recombinant CsStefin-1 (rCsStefin-1). The disease activity index (DAI) increased in DSS only-treated mice. In contrast, the DAI value was significantly reduced in rCsStefin-1-treated mice than DSS only-treated mice. In addition, the colon length of DSS only-treated mice was shorter than that of rCsStefin-1 treated mice. The secretion levels of IFN-${\gamma}$ and TNF-${\alpha}$ in the spleen and mesenteric lymph nodes (MLNs) were significantly increased by DSS treatment, but the level of TNF-${\alpha}$ in MLNs was significantly decreased by rCsStefin-1 treatment. IL-10 production in both spleen and MLNs was significantly increased, and IL-$10^+F4/80^+$ macrophage cells were significantly increased in the spleen and MLNs of rCsStefin-1 treated mice after DSS treatment. In conclusion, rCsStefin-1 could reduce the intestinal inflammation occurring after DSS treatment, these effects might be related with recruitment of IL-10 secreting macrophages.
Tegumental and excretory-secretory proteins are reported as diagnostic antigens for human opisthorchiasis. Rhophilin associated tail protein1-like (OvROPN1L) protein of Opisthorchis viverrini sperm tail showed potential as a diagnostic antigen. The OvROPN1L recombinant fragments were assayed for diagnostic antigenicity for human opisthorchiasis using indirect ELISA. The strongest antigenic region was a N-terminus peptide of M1 - P56. One synthetic peptide (P1, L3-Q13) of this region showed the highest antigenicity to opisthorchiasis. Sera from other parasitic infections including Strongyloides stercoralis, hookworm, Taenia spp, minute intestinal flukes, Paragonimus spp showed lower reactivity to P1. Peptide P1 is located in the disordered N-terminus of ROPN1L supporting its suitability as linear epitope. In the Platyhelminthes the N-terminal sequence of ROPN1L is diverging with taxonomic distance further suggesting that peptide P1 has potential as diagnostic tool in the genus Opisthorchis/Clonorchis. It should be further evaluated in combination with peptides derived from other O. viverrini antigens to increase its diagnostic power.
A clonorchiasis case in a captive leopard cat, Prionailurus bengalensis euptilurus, was confirmed by ultrasonographic findings and egg morphologies found in the bile juice sample in the Korea. The leopard cat was introduced from the wild habitat of Gyeongsangnam-do, to Cheongju Zoo in Cheongju-si, Chungcheongbuk-do, Korea in August 2014. Physical examinations were basically performed for quarantine and check-up health. The cat was comparatively good in health except anorexia. The cyst-like bile duct dilation and the increased echogenicity of gall bladder wall and hepatic parenchyma were observed by ultrasonography. Ultrasound-guided needle biopsy was conducted for collecting bile juice and the specimens were observed under light microscope. The numerous small trematode eggs were detected in the bile juice sample of the light microscopy. The eggs were $25-33(28{\pm}3){\mu}m$ by $18-22(20{\pm}1){\mu}m$ in size and showed typical characteristics of Clonorchis sinensis egg, i.e., a dominantly developed operculum, shoulder rim and dust-like wrinkles in surface. To treat the liver fluke infection, 20 mg/kg of praziquantel was orally administered only once to the case. Follow-up studies including fecal examinations were conducted during 2 years after treatment. But no more eggs were detected from the case. In the present study, we described the first clonorchiasis case of leopard cat, which was confirmed by ultrasonographic findings and egg morphologies from the bile juice sample in Korea.
Clonorchis sinensis is a food-borne trematode that infects more than 15 million people. The liver fluke causes clonorchiasis and chronical cholangitis, and promotes cholangiocarcinoma. The underlying molecular pathogenesis occurring in the bile duct by the infection is little known. In this study, transcriptome profile in the bile ducts infected with C. sinensis were analyzed using microarray methods. Differentially expressed genes (DEGs) were 1,563 and 1,457 at 2 and 4 weeks after infection. Majority of the DEGs were temporally dysregulated at 2 weeks, but 519 DEGs showed monotonically changing expression patterns that formed seven distinct expression profiles. Protein-protein interaction (PPI) analysis of the DEG products revealed 5 sub-networks and 10 key hub proteins while weighted co-expression network analysis (WGCNA)-derived gene-gene interaction exhibited 16 co-expression modules and 13 key hub genes. The DEGs were significantly enriched in 16 Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes pathways, which were related to original systems, cellular process, environmental information processing, and human diseases. This study uncovered a global picture of gene expression profiles in the bile ducts infected with C. sinensis, and provided a set of potent predictive biomarkers for early diagnosis of clonorchiasis.
Epigenetic writers including DNA and histone lysine methyltransferases (DNMT and HKMT, respectively) play an initiative role in the differentiation and development of eukaryotic organisms through the spatiotemporal regulation of functional gene expressions. However, the epigenetic mechanisms have long been suspected in helminth parasites lacking the major DNA methyltransferases DNMT1 and DNMT3a/3b. Very little information on the evolutionary status of the epigenetic tools and their role in regulating chromosomal genes is currently available in the parasitic trematodes. We previously suggested the probable role of a DNMT2-like protein (CsDNMT2) as a genuine epigenetic writer in a trematode parasite Clonorchis sinensis. Here, we analyzed the phylogeny of HKMT subfamily members in the liver fluke and other platyhelminth species. The platyhelminth genomes examined conserved genes for the most of SET domain-containing HKMT and Disruptor of Telomeric Silencing 1 subfamilies, while some genes were expanded specifically in certain platyhelminth genomes. Related to the high gene dosages for HKMT activities covering differential but somewhat overlapping substrate specificities, variously methylated histones were recognized throughout the tissues/organs of C. sinensis adults. The temporal expressions of genes involved in eggshell formation were gradually decreased to their lowest levels proportionally to aging, whereas those of some epigenetic tool genes were re-boosted in the later adult stages of the parasite. Furthermore, these expression levels were significantly affected by treatment with DNMT and HKMT inhibitors. Our data strongly suggest that methylated histones are potent epigenetic markers that modulate the spatiotemporal expressions of C. sinensis genes, especially those involved in sexual reproduction.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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