This study has assessed the anti-oxidative activities and cytotoxic effects of Lithospermum erythrorhizon ethanol extract and measured the effects of tyrosinase inhibition activities with a goal of estimating the usage of the medicinal plant as an ingredient of cosmetics. First, to perform a basic test on the extract, pH and UV-spectrum were measured. According to the measurement, the extract had control functions at pH 5.5, and maximum absorbance occurred at 530nm. In particular, DPPH (1-1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl)-inhibiting activity (IC50) and polyphenol content were 149.81 ${\mu}g/mL$ and $51.28{\pm}2.52$ mg/mL respectively. In addition, as extract concentration increased, tyrosinase inhibition activities improved as well. In raw 264.7 cell-based MTT assay, cell survival rates were 98% at 1000 ppm and 153% at 100 ppm. Therefore, it's been confirmed that there is almost no cytotoxin. According to the test results above, it appears that the Lithospermum erythrorhizon ethanol extract would be effective in anti-oxidation and application as a cosmetic ingredient.
본 연구는 galactosamine 투여로 인해 유발된 흰쥐의 간독성에 미치는 자초추출물의 효과를 알아보기 위해 자초 추출물을 각각 200 mg/kg과 500 mg/kg을 매일 1회씩 7일간 복강내 주사한 후, 마지막 자초 추출물 투여일에 galactosamine을 주사하여 다음과 같은 결론을 얻었다. AST, ALT, ALP, GGT와 LDH의 활성도에서는 LE200군이 GalN군에 비해 유의적으로 감소하였다. 그리고 조직학적 변화에서, GalN군은 염증세포의 침윤과 국소적인 괴사성 변화가 나타났지만, LE군들에서는 GalN 투여에 의한 변화가 상당히 경감되었다. 또한 미세구조적 변화에서는 GalN군은 미토콘드리아의 변형, 지방적의 증가, 조면소포체의 분절 등 세포소기관의 변형을 유발하였다. 그러나 LE군들에서는 대조군과 유사한 소견을 보여 주었다. 이상의 결과들로 보아, 자초추출물은 galactosamine 투여로 간독성을 유발시킨 흰쥐의 간 조직에 장애를 주지 않으면서 간독성을 완화시키는 효과가 있다고 사료된다.
Nam, Chunja;Hwang, Jae-Sik;Kim, Myoung-Jun;Choi, Young Whan;Han, Kyoung-Goo;Kang, Jong-Koo
Toxicological Research
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제31권1호
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pp.77-88
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2015
Lithospermum erythrorhizon has long been used in traditional Asian medicine for the treatment of diseases, including skin cancer. The oral toxicity of a hexane extract of Lithospermum erythrorhizon root (LEH) was investigated in Beagle dogs by using single escalating doses, two-week dose range-finding, and 4-week oral repeat dosing. In the single dose-escalating oral toxicity study, no animal died, showed adverse clinical signs, or changes in body weight gain at LEH doses of up to 2,000 mg/kg. In a 2 week dose range-finding study, no treatment-related adverse effects were detected by urinalysis, hematology, blood biochemistry, organ weights, or gross and histopathological examinations at doses of up to 500 mg LEH/kg/day. In the 4 week repeat-dose toxicity study, a weight loss or decreased weight gain was observed at 300 mg/kg/day. Although levels of serum triglyceride and total bilirubin were increased in a dose dependent manner, there were no related morphological changes. Based on these findings, the sub-acute no observable adverse effect level for 4-week oral administration of LEH in Beagles was 100 mg/kg/day.
In this work, the antioxidant activity and total phenolic compound content of 6 fractions of Smallanthus sonchifolius, Agrimonia pilosa, and Lithospermum erythrorhizon extract were investigated. The highest total phenolic compound contents of each plant extracts were obtained from n-butanol ($13.75{\pm}0.21%$) and methylene chloride ($12.89{\pm}1.10%$) fractions (S. sonchifolius), ethyl acetate ($19.69{\pm}1.02%$) and water ($18.72{\pm}0.76%$) fractions (A. pilosa), and n-butanol ($36.26{\pm}1.26%$) and ethyl acetate ($17.66{\pm}0.94%$) fractions (L. erythrorhizon), respectively. As a result of DPPH radical scavenging activity in 10 mg/mL condition, the highest activity were obtained from n-butanol fraction of S. sonchifolius (81.06%), ethyl acetate fraction of A. pilosa (86.32%), and n-butanol fraction of L. erythrorhizon (82.6%), respectively. Also, the highest reducing power was obtained same fractions as well as DPPH adical scavenging activity. Overall, antioxidant activity has relatively closely connected with contents of total phenolic compounds in S. sonchifolius and L. erythrorhizon extracts.
Traditionally, the root of Lithospermum erythrorhizon Sieb. et Zucc(L.E) has been used as efficacious therapy for inflammation, burns, frostbite and skin ailments (e.g eczema and psoriasis). It contains isohexenylnaphthoquinone derivatives (shikonin and its esters) and furylhydroquinones (shikonofurans) in lipophilic fractions and caffeic acid oligomers (rosmarinic acid, lithospermic acid B) in polar fractions. Recently, new preparative isolation and analysis procedures of shikonin along with its oligomers from the extract of L. erythrorhizon by the combination of high-speed counter-current chromatography with high-performance liquid chromatography-diode array detection have also been introduced. Although there have been many reports on the wound healing, antiinflammatory, and anticancer effects, the research on the effects of anti-atopic dermatitis of the root of L. erythrorhizon were relatively scarce. However, in recent years, new information gathered from research efforts, on the anti-atopic dermatitis properties of the extract or constituents of L. erythrorhizon has been accumulated. In this paper, the findings and advance on the in vitro and in vivo activities of L. erythrorhizon and its constituents especially focused on antiinflammatory and anti-atopic dermatitis effects are summarized. The phytochemical constituents of L. erythrorhizon or its tissue cultures are also presented. Although there are few to verify or refute its activity in human, one result of clinical study of the extract of L. erythrorhizon on the atopic dermatitis patients was introduced to assess the possibility of its clinical use. The reported mechanisms of action and in vivo pharmacological studies in different animal models for the various types of extracts or constituents of L. erythrorhizon are supportive of its therapeutic potential or dietary supplement, however, more evidence from clinically relevant models, as well as systemic studies on the active constituents or the various types of standardized extracts at the cellular and molecular level, are required.
유전자발현 조절 수준에서 멜라닌 색소 생합성 억제물질을 탐색하고자 지치 뿌리로부터 유용성 물질을 추출${\cdot}$분획하여 tyrosinase 프로모터를 지닌 B16 mouse melanoma cell에 처리한 결과 그 메탄을 추출물은 $10{\mu}g/mL$의 농도에서 약 $33\%$ 이상의 tyrosinase프로모터 활성 억제효과를 나타내었으며, 세포 활성능이 $100{\mu}g/mL$의 농도에서 약 $108\%$로 매우 안전하였다. 그리고 methylene chloride, ethyl acetate, butyl alcohol, 물 등의 용매 분획물들도 농도에 따라 차이는 있었지만 $100{\mu}g/mL$또는 $500{\mu}g/mL$의 고농도에서 tyro-sinase 프로모터의 활성을 억제하였다 또한, 지치 메탄올 추출물의 농도를 달리하여 3일 동안 처리하였을 때 멜라닌색소의 생성능은 $10{\mu}g/mL$와 $100{\mu}g/mL$의 농도에서 대조군 세포에 비 해 각각 약 $11\%$와 $24\%$로 크게 감소하는 결과를 보여주었다.
The methanolic extract of the roots of Lithospermum erythrorhizon (Boraginaceae) was found to show inhibitory activity towards farnesyl protein transferase (FPTase). Bioassay-guided fractionation of the methanolic extract resulted in the isolation of three naphthoquinone compounds, as inhibitors of FPTase. These compounds inhibited the FPTase activity in a dose-dependent manner.
This study investigates the effect of supercritical fluid extract (CMPB803-C) of Lithospermum erythrorhizon, shikonin and acetylshikonin isolated from Lithospermum erythrorhizon on IL-$1{\beta}$-induced chondrocytes and monosodium iodoacetate (MIA)-induced osteoarthritis in rat. Shikonin ($50{\mu}m$) and acetylshikonin ($3{\mu}M$) treatment reduced significantly the mRNA expression and enzyme activity of matrix metalloproteinase (MMP)-1, -3 and -13 in IL-$1{\beta}$-induced SW1353 chondrosarcoma cells. The chondro-protective effects of CMPB803-C and acetylshikonin were than analyzed in a rat OA model using a single intra-articular injection of MIA (1mg) in the right knee joint. CMPB803-C (200mg/kg) or acetylshikonin (5mg/kg) was orally administered daily for two weeks starting after 1 week of MIA injection. In the histological observation, CMPB803-C and acetylshikonin clearly improved OA lesions being comparable to or better that control group. Our results demonstrated that CMPB803-C and acetylshikonin as active compound of Lithospermum erythrorhizon have a strong chondro-protective effect in OA rats, which likely attributes to its anti-inflammatory activity and inhibition of MMPs production.
본 연구에서는 식중독 유발세균에 대한 항균활성이 우수한 천연 항균성 물질을 검색하기 위해 예로부터 민간과 한방에서 널리 이용되어 온 지치를 각종 유기용매로 추출하여 식중독 유발세균에 대한 항균활성을 조사해 보았다. 지치를 methanol로 추출한 후, petroleum ether, chloroform, ethly acetate를 이용하여 실온에서 각각 용매별로 계통 분획하고, 열수추출물을 얻은 후, 9종의 식중독 유발세균(S. aureus, B. cereus, Sal. enteritidis, S. flexneri, E. coli, Sal. typhimurium, S. dysenteriae, P. aeruginosa, S. sonnei)에 대하여 항균효과를 조사하였다. 지치 추출물의 농도별 항균 활성 검색에서는 지치의 ethyl acetate 추출물이 가장 큰 항균 효과를 보였으며 S. aureus와 S. dysenteriae가 가장 민감하게 반응하는 균주였다. 지치의 ethyl acetate 추출물과 산두근의 ethyl acetate 추출물을 혼합하여 항균력을 측정해 본 결과 두 추출물을 섞어 첨가했을 경우가 단독으로 사용했을 시 보다 상승효과를 나타내었다. 또한 지치의 ethyl acetate 추출물이 식중독 유발세균의 성장에 미치는 효과를 검정하기 위해 S. aureus 및 S. dysenteriae의 배양액에 지치의 ethyl acetate 추출물을 각각 4,000ppm 농도로 첨가했을 시, S. aureus의 생육이 48시간 이상까지 억제됨을 관찰할 수 있었고, S. dysenteriae의 생육도 12시간까지 지연시킬 수 있었다.
This study was performed to investigate the enhancement of immunomodulatory activities of Lithospermum erythrorhizon by extreme process. The extracts are WE100 (water extract for 24 hours at $100^{\circ}C$), WE80 (water extract for 24 hours at $80^{\circ}C$), EE (70% ethyl alcohol extract for 24 hours at $80^{\circ}C$) and EPE (extreme process for 30 minutes at $25^{\circ}C$, 500 MPa after 70% ethyl alcohol extracts for 3 hours at 40, 50, $60^{\circ}C$). Extraction yield was increased up to 5~10% by extreme process, compare to the normal extraction such as water solvent extraction, 70% ethyl alcohol solvent extraction. The cytotoxicity of the extracts was showed in the range of 12.68~15.89% at $1.0mg/m{\ell}$ for human lung cell (HEL299). The EPE40 was showed the lowest cytotoxicity 12.68%. The EPE60 extracted by extreme process increased the growth of human B and T cells up to $12.12{\times}10^4\;cells/m{\ell}$ and $14.88{\times}10^4\;cells/m{\ell}$, respectively and the EPE60 greatly increased the cytokine secretion of both IL-6 and TNF-${\alpha}$. The extracts by extreme process also exhibited higher levels of nitric oxide production from macrophages than the lipopolysaccaharides. It can be concluded that Lithospermum erythrorhizon has immune activities and The extreme process could increase higher immune activities possibly by immunomodulatory compounds.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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