Purpose : Cymbopogon citratus, also known as lemongrass, has widely spread around the world and its essential oil is usually applied in food, perfume, and other industrial purposes. In addition, C. citratus has also been used for the treatment of inflammation, digestive disorders, and diabetes in traditional medicine. In this study, the antioxidative activity of C. citratus ethanol extract (CCEE) was analyzed in RAW 264.7 cells through the induction of one of phase II enzymes, heme oxygenase (HO)-1 by nuclear factor-erythroid 2 p45-related factor (Nrf)2, mitogen-activated protein kinase (MAPK), and phosphoinositide 3-kinase (PI3K)/Akt. Methods : The antioxidative activity of CCEE against oxidative stress and its underlying molecular mechanisms were analyzed by the cell viability assay, intracellular reactive oxygen species (ROS) formation assay, and Western blot analysis in RAW 264.7 cells. Results : The results exhibited that CCEE potently attenuated tert-butyl hydroperoxide (t-BHP) induced intracellular ROS levels in a dose-dependent manner without any cytotoxicity. CCEE treatment significantly induced the expression of HO-1 which is known for its antioxidative capacity. In addition, CCEE treatment significantly upregulated the expression of Nrf2, a corresponding transcription factor for the regulation of antioxidative enzymes, which was in accordance with the HO-1 overexpression. MAPK and PI3K/Akt were also evaluated for their important roles in the regulation of cellular redox homeostasis against oxidative damage. As a result, the potent HO-1 expression was mediated by not extracellular regulated kinase (ERK), c-Jun NH2 terminal kinase (JNK), p38, but phosphoinositide 3-kinase (PI3K) phosphorylation. To confirm the antioxidative activity of CCEE-induced HO-1 expression, oxidative damage was initiated by t-BHP and attenuated by CCEE treatment, which was identified by HO-1 selective inhibitor and inducer. Conclusion : Consequently, CCEE potently induced the HO-1-mediated antioxidative potential through the modulation of Nrf2 and PI3K/Akt signaling pathways in RAW 264.7 cells. These results suggest that CCEE could be a promising strategy for the mitigation against cellular oxidative damage.
Aim: Pendulous monkshood root is traditionally used for the treatment of several inflammatory pathologies such as rheumatisms, wounds, pain and tumors in China. In this study, the anti-inflammatory and anticancer activities and the mechanism of crude ethanol extract of pendulous monkshood root (EPMR) were evaluated and investigated in vitro. Materials and Methods: The cytotoxic effects of EPMR on different tumor cell lines were determined by the MTT method. Cell apoptosis and cell nucleus morphology were assessed by Hoechst 33258 staining. Moreover, nitric oxide (NO) levels and intracellular oxidative stress in peritoneal macrophages were determined to further elucidate mechanisms of action. Results: The data showed that EPMR could produce significant dose-dependent toxicity on three kinds of tumor cells. Furthermore, EPMR displayed obvious anti-inflammatory effects on LPS-induced mouse peritoneal macrophages at the dosage of 4 - 200 ${\mu}g/mL$. The results demonstrated the therapeutic potential of Pendulous Monkshood Root on cancer and inflammatory diseases. Conclusion: Our results indicate that EPMR has anti-inflammatory and anticancer properties, suggesting that pendulous monkshood root may be a useful anti-tumor and anti-inflammatory reagent in the clinic.
Prostaglandin (PG) $E_2$ is an important mediator of skin wound healing without excessive scarring and gastric ulcer healing. However, $PGE_2$ has a short lifetime in vivo because it is metabolized rapidly by 15-hydroxyprostaglandin dehydrogenase (15-PGDH). Ethanol extract of Eriobotryae folium (EFEE) elevated intracellular and extracellular $PGE_2$ levels in HaCaT cells and inhibited 15-PGDH ($ED_{50}$ : $168.4{\mu}g/mL$) with relatively low cytotoxicity ($IC_{50}$ : $250.0{\mu}g/mL$). Real-time PCR analysis showed that mRNA expression of cyclooxygenase (COX)-1 and COX-2 enzymes were increased and prostaglandin transporter (PGT) was decreased in HaCaT cells by EFEE. Moreover, wound healing effect of EFEE ($168.4{\mu}g/mL$) was comparable to that of TGF-${\beta}1$ (300 pg/mL) as a positive control. These results demonstrate that EFEE may be valuable therapeutic materials for the treatment of $PGE_2$ level dependent diseases.
The purpose of this study is to investigate the effect of a mixture of fermented Artemisiae Argi Folium and fermented Sophorae Radix (FAS) on hydrogen peroxide production within mouse macrophage Raw 264.7 with ethanol (EtOH) and nicotine. Artemisiae Argi Folium is known to have the antibacterial, immune-enhancing properties. And Sophorae Radix is also known to have the antibacterial, anti-inflammatory, anti-allergic properties. EtOH and nicotine are the ones of toxicants which could impair immunocytes like macrophage. EtOH and nicotine reduce the intracellular production of hydrogen peroxide ($H_2O_2$) of Raw 264.7. FAS increased the production of hydrogen peroxide reduced by EtOH and nicotine within Raw 264.7. These results indicate that FAS could restore the immuno-activity of macrophage impaired by EtOH and nicotine.
본 연구는 알코올성 간 손상을 일으킨 흰쥐에게 오미자추출물이 혈중 알코올 분해율과 간 기능 보호에 미치는 영향을 구명하기 위하여 단회성 급성주정중독시험과 장기 주정투여시험을 각각 수행하였다. 급성주정중독시험은 흰쥐에게 급성주정중독량과 오미자추출물을 투여한 후 60분, 90분, 150분, 240분, 300분, 360분의 혈중 에탄올 농도를 측정하여 경시적인 알코올 분해율을 측정하였다. 장기 주정투여시험은 전반기(4주)는 급성주정중독량(22,23)을 참고하여 1/2용량의 시험주정(Chivas Regal, 40%)을 투여하였고, 후반기(4주)는 시험주정과 함께 물과 오미자추출물(150 mg, 1.0 mL)을 각각 투여하였다. 급성주정중독량시험에서 주정투여 후 90분의 혈중 알코올 농도가 가장 높았고, 주정투여 후 알코올의 기준 농도 대비 360분의 혈중 알코올 분해율은 주정단독투여군(A) 81.4%, 오미자투여군(B) 96.1%, 주정+물투여군(C) 85.3%로 오미자투여군이 다른 두 주정투여군보다 평균 13% 더 높았다. 장기 주정투여시험에서 간장무게는 두 주정투여군(A, B)이 일반대조군(C)보다 통계적으로 무거웠다(P<0.05). 혈청과 간 조직의 중성지방(TG) 함량은 일반대조군이 두 주정투여군보다 통계적으로 유의하게 낮았다(P<0.05). 간 조직의 TG 함량은 오미자투여군(B)이 주정대조군(A)에 비해 26.5% 낮았다. 혈청 중 총 콜레스테롤(TC) 함량은 실험군 간에 차이가 없었고, 간 조직의 TC 함량은 B군이 A군보다 18.8% 낮았다. 주정과 오미자추출물을 투여한 후 측정한 ${\gamma}$-GT, AST 및 ALT 활성은 오미자추출물군(B)이 주정대조군(A)보다 각각 26%, 12%, 19% 감소하였다. 혈액학치(CBC)는 혈소판을 제외하고는 실험군 간에 통계적인 차이가 있었다(P<0.05). 간세포 조직의 Steatosis score는 주정대조군이 3점인 반면 오미자추출물군과 일반대조군에서는 각각 1점이었고, 붉게 염색된 지방미세과립이 주정대조군에서는 고도 내지 중등도로 세포질내에 침윤(infiltration)된 반면 오미자추출물군에서는 경도로 침윤되었다. 본 연구에서 오미자추출물은 경시적으로 혈중 알코올 분해율을 높여주고, 간 조직의 중성지방량과 간기능치(${\gamma}$-GT, ALT)를 감소시키는 동시에 알코올성 지방변성을 완화시킨 것으로 나타났다. 본 연구 결과는 향후 오미자 가공식품의 개발과 관련한 기초 및 홍보자료로 활용 가능성이 높을 것으로 기대되는 한편 인체적용시험을 통해 알코올성 간 기능 보효 효과와 관련된 보다 정밀한 후속 연구가 필요할 것으로 사료된다.
본 연구진은 HaCaT-ARE-luciferase 세포를 이용하여 400 여개의 약용식물 에탄올 추출물 중 NRF2/ARE 유도효과가 있는 신규 추출물을 검색하였고 이를 통하여 종대황(Rheum undulatum)과 선복화(Inula japonica)의 주정 추출물이 HaCaT-ARE-luciferase 세포에서 ARE 활성을 강하게 유도하는 것을 관찰하였다. 종대황과 선복화 에탄올 추출물은 HaCaT 세포에서 생존(viability)을 증가시켰고 NRF2/ARE에 의존적인 phase II cytoprotective 효소인 heme oxygenase-1 (HO-1)와 NADPH:quinone oxidoreductase-1 (NQO1)의 전사 및 단백질 발현을 강하게 유도하였다. 또한 종대황과 선복화 추출물은 HaCaT 세포에서 TPA로 유도한 세포 내 활성 산소 및 이를 통하여 생성되는 스트레스 마커인 8-hydroxydeoxyguanosine (8-OH-dG)과 4-hydroxynonenal (4HNE)의 발생을 강하게 억제하였다. 본 연구는 종대황과 선복화의 에탄올 추출물이 인간 피부 세포주인 HaCaT 세포에서 NRF2/ARE에 의존적인 유전자 발현의 유도를 통하여 강력한 항산화 효과를 발휘한다는 것을 증명한다.
We evaluated the inhibitory effect of Pueraria lobata root ethanol extract (PLREE) on lipid accumulation during 3T3-L1 differentiation to adipocytes by measuring the intracellular expression of adipogenic, lipogenic, and lipolytic markers and lipid accumulation. The total polyphenol and flavonoid content of PLREE were 47 and 29 mg/g, respectively. The electron donating capacity of PLREE at $1,000{\mu}g/mL$ was 48.8%. Treatment of 3T3-L1 preadipocytes with 100, 250, or $500{\mu}g/mL$ PLREE for 8 days dose-dependently promoted the differentiation of 3T3-L1 cells. In contrast, the lipid content of PLREE-treated cells was significantly reduced by 7.8% (p < 0.05), 35.6% (p < 0.001), and 42.2% (p < 0.001) following treatment with 100, 250, and $500{\mu}g/mL$ PLREE, respectively, as compared to differentiated control cells. PLREE upregulated peroxisome proliferator-activated receptor ${\gamma}$ mRNA and protein, and sterol regulator element-binding protein-1c mRNA levels, but did not affect CCAAT/enhancer binding-protein ${\beta}$ and ${\alpha}$ mRNA levels. PLREE also downregulated acetyl-CoA carboxylase mRNA and protein, fatty acid synthase (FAS) protein, and leptin mRNA levels, but did not affect FAS mRNA expression. PLREE upregulated adipose triglyceride lipase mRNA and protein expression, and hormone-sensitive lipase (HSL) protein expression, but did not affect HSL mRNA expression. In conclusion, we found that PLREE enhanced adipogenesis, but reduced lipogenesis, resulting in decreased lipid accumulation in 3T3-L1 cells.
Objectives : The effects of ethanol extract of Plantago asiatica L. were investgated on adipocyte differentiation, lipopogenesis, lipolysis and apoptosis using differnentiated 3T3-L1 adipocytes. Methods : Plantago asiatica L. was extracted with ethanol (CCE). We carried on MTT assay for cell proliferation, Oil Red O staining for determination of cell differentiation and intracelluar adipogenesis. TUNEL staining assay for cell apoptosis, and Western blot analysis for measurement of pAMPK and pACC, $C/EBP{\alpha}$, $PPAR{\gamma}$ protein expressions were performed. Results : The addition of CCE up to 0.2 mg/ml into cell culture media showed no cytotoxicity. Treatment of 0.2 mg/ml CCE significantly inhibited differentiation in 3T3-L1 preadipocytes. Lipid accumulation of the CCE treated cells was decreased compared with that of control. Induction of cell apoptosis was increased in CCE treated cells compared with that of control. AMPK and ACC levels of the cells with 0.2 mg/ml CCE were led to phosphorylation and also expressions of $C/EBP{\alpha}$ and $PPAR{\gamma}$, as adipogenic transcription factors, were suppressed compared with those of control. Conclusions : Taken together, these results provide evidence that CCE has a regulatory role in lipid metabolism that is related to differentiation into adipocytes, adipogenesis and apoptosis.
The present study was designed to evaluate the inhibitory effects of fermented Liriope platyphylla extract on the production of inflammation-related mediators (NO, ROS, NF-${\kappa}B$, iNOS and COX-2) and pro-inflammatory cytokines (TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, IL-6) in lipopolysaccharide-stimulated RAW 264.7 macrophages. Freeze-dried Liriope platyphylla was fermented by Saccharomyces cerevisiae and extracted with 70% ethanol. In lipopolysaccharide-stimulated macrophage cells, the treatment with fermented Liriope platyphylla extract decreased the generation of intracellular reactive oxygen species dose-dependently and increased antioxidant enzyme activities, including superoxide dismutase, catalase and glutathione peroxidase. Fermented Liriope platyphylla extract also inhibited NO production in lipopolysaccharide-stimulated RAW 264.7 cell. The expressions of NF-${\kappa}B$, iNOS, COX-2 and pro-inflammatory cytokines were inhibited by the treatment with fermented Liriope platyphylla extract. Thus, this study shows the fermented Liriope platyphylla extract could be effective at inhibiting the inflammation process.
Puerariae Radix is one of the medicinal plants used in oriental medicine for hangover, It has been claimed for several pharmacological effects including anti-alcohol abuse, antidipsotropic activity and anti-alcohol intoxication. In connection with Puerariae Radix effects, an activity-guided purification of active substance on alcohol dehydrogenase (hnH) was carried-out. The most active compound was isolated as puerarin (C$_{21}$H$_{20}$ O$_{9}$ ), molecular weight 416. Puerarin inhibited ADH noncompetitively against ethanol or NAD$^{+}$./.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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