벼에서 문제시되는 도열병과 잎집무의마름병을 생물학적으로 방제하기 위해 병원균과 생태학적 지위가 비슷한 벼 뿌리에서 내생하는 S. marcescens 23 균주를 분리하였다. 선발 균주들을 공시하여 R. solani와 P. grisea에 대한 길항능력을 검정하여 R. solani와 P. grisea에 각각 83.9%. 88.3%의 높은 억제율을 보인 RSm220 균주를 선발하였다. 선발된 RSm220은 생리ㆍ생화학적 특성 검정결과 S. marcescens type strain과 높은 상관성을 나타내었고. 16S rDNA sequencing에 의한 계통 분석에 의해 S. marcescens의 16S rDNA sequence에 98.2% 유사성을 나타내어 S. marcescens로 동정되었다 내생성 S. marcescens RSm220은 벼 도열병과 잎집무늬마름병에 대한 생물학적 방제제로의 사용이 가능할 것으로 사료된다.
The phylogenetic position of Gliocladium and its related taxa were investigated, using the neighbor-joining method of the sequences from internal transcribed spacers (ITS1 and ITS2) and 5.8S ribosomal DNA (rDNA). It was focused especially on the generic concept by comparing with the related genera such as Trichoderma, Hypocrea, Verticillium, Penicillium and Talaromyces. Gliocladium species and its related genus were divided into three groups by the phylogenetic analysis using the neighbor-joining method. The first group includes Penicillium-like strains such as Penicillium, Tararomyces, Verticillium and one species of Gliocladium (G. cibotii JCM 9203 and JCM 9206). Especially, Gliocladium cibotii JCM 9203 is thought to be the similar species with Verticillium bulbillosum JCM 9214. Between these two species, Gliocladium cibotii and Verticillium bulbillosum, the intraspecies concept needs to examined with culture condition. and morphological properties. The second group includes two species Verticillium, Verticillium tricorpus and Verticillium albo-atrum which extracted from the GenBank database in NCBI (National Center for Biotechnology Information). Trichoderma-like strains, such as Trichoderma, Hypocrea and several species of Gliocladium are included in the third group. Also, Gliocladium penicillioides IFO 5869 and Gliocladium catenulatum ATCC 10523 formed the subgroup of Trichoderma-like strains. The species of Gliocladium were dispersed in Trichoderma-like and Penicillinum-like group, and only one species of Gliocladium cihotii used in our study was located in Penicillium-like genus group. The species of Verticillium appeared in all three groups and the species of Trichoderma formed the monophylogeny with Hypocrea (telemorph). Also, Gliocladium virens was grouped with Trichoderma harzianum with a high bootstrap value, supporting that Gliocladium virens is to be placed in Trichoderma. The results suggest that Gliocladium is polyphyletic, and is more Trichoderma-like than Penicillium-like.
평택일원의 6개의 배 저장고로부터 300개의 부패된 배를 수집 하여 병반부위로부터 곰팡이를이분리 하여 조사한 결과 Penicillium 균이 이병배중에서 84%가 분리되었다. 84 Penicillium 균주를 대상으로 URP2R primer로 균주 간의 DNA 다양성을 조사한결과 18 type의 Penicillium 균주를 검출 할 수 있었으며 URP1F, URP2F, URP2R, URP4R의 PCR 다형성밴드를 이용한 유전적 유연관계분석으로 4 group으로 나눌 수 있었다. 18 Penicillium균주의 형태적특징을 조사한결과 3가지의 특징적인 배양적 특징을 갖는 것으로 확인 되었으며 포자형성과 포자형태에서도 3가지 type이 관찰 되었는데 SP-15균주 type, KP-1-1 균주 type, SP-17 type으로 PCR 다형성결과와 유사한 경향을 나타내었다. SP-15형은 형태적, rDNA의 ITS 염기서열 분석에서 P. expansum로 동정 되었으며 분리된 Penicillium 균주 중 70%를 차지하는 우점종인 것으로 나타났으므로 향 후 URP-PCR profile은 종간, 종내 계통 분류에 유용하게 이용 할 수 있다.
Pleurotus eryngii, known as king oyster mushroom has been widely used for nutritional and medicinal purposes. This study was initiated to screen the suitable conditions for mycelial growth and to determine the phylogenetic relationship of the selected strains. Optimal mycelial growth was observed at $30{^{\circ}C}$ and minimum mycelial growth observed at $10{^{\circ}C}$. This mushroom tolerates a broad pH range for mycelial growth, with most favorable growth observed at pH 6. Results also indicated that glucose peptone, yeast malt extract and mushroom complete media were favorable growth media, while Hennerberg and Hoppkins media were unfavorable. Dextrin was the best and xylose the least effective carbon sources. Results revealed that inorganic nitrogen sources were less effective than organic sources for the mycelial growth of P. eryngii. Investigation of genetic diversity is necessary to identify the strains. The ITS region of rDNA were amplified using PCR. The size of the ITS1 and ITS2 regions of rDNA from the different strains varied from 214 to 222 bp and 145 to 236 bp, respectively. The sequence of ITS2 was more variable than that of ITS1, and the 5.8S sequences were identical. A phylogenetic tree based on the ITS region sequences indicated that selected strains could be classified into six clusters. Fourteen IUM and ATCC- 90212 strains were also analyzed by RAPD with 20 arbitrary primers. Fourteen of these primers were efficiently amplified the genomic DNA. The number of amplified bands varied with the primers and strains, with polymorphic fragments in the range from 0.2 to 2.3 kb.
Pine tree death caused by pine wood nematode(PWN) involves phoretic relationships between PWN and its vector Japanese pine sawyer beetle(JPS). In an effort to understand the diversity of fungi involved in PWN life cycle, a total of 176 fungal isolates were collected from PWNs, adults and larvae of JPS, PWN-diseased Japanese black pine that was cut down in 2005 at Jinju, Korea. Based on microscopic observation and colony morphology, and sequence analysis of the ITS rDNA, the fungal isolates were identified at the level of genus. Three genera including Mucor, Ophiostoma, and Penicillium were identified from PWN. Two genera of Ophiostoma and Penicillium were discovered from JPS larvae. Frpm JPS adult beetles, nine genera of Aspergillus, Gibberalla, Hypocrea, Irpex, Leptosphaeria, Ophiostoma, Penicillium, and Plectosphaerella and unknown basidio-mycetes were found. Ten genera from PWN-infected weed were confirmed as Bionectria, Botrytis, Camarops, Fusarium, Hypocrea, Nectria, Mucor, Ophiostoma, Penicillium, and Trichoderma. Penicillium and Ophiostoma were commonly distributed on PWN and its vector and host. This is first report of the fungi associated with PWN and its vector and host in Korea.
본 연구에서는 충남, 제주, 경남, 충북 등에서 새우난초(Calanthe discolor)와 은대난초(Cephalanthera longibracteata)의 뿌리를 채취하여 표면살균한 후 내생균을 순수분리 하였다. 분리된 내생균의 형태학 특징을 관찰하고 internaltranscribed spacer (ITS) rDNA영역의 염기서열을 ITS1F와 ITS4프라이머를 이용하여 분석하였다. 서로 다른 지역에서 채집한 새우난초와 은대난초이지만, 공통적으로 Leptodontidium orchidcola가 높은 상대수도와 빈도를 나타냈으며, 내생균류의 군집차이를 분석할 결과, 지역적 차이보다는 숙주에 의한 차이가 더 큰 영향을 미치는 것으로 나타났다.
ITSI-5.8S-ITSII rDNA region was amplified from the reference strains and clinical isolates with ITS1 and ITS4 primers. These primers amplified DNA fragments of 550 bp in Microsporum audouinii and Trichophyton violaceum, 700 bp in Microsporum gypseum, Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton rubrum, and Trichophyton tonsurans, and 750 bp in Microsporum ferreugineum and Microsporum canis. The restriction enzyme patterns of PCR products digested with 13 restriction enzyme including PstI were distint among the genera, whereas identical in the same species. Examination of the ITS (Internal Transcribed Spacers)1 nucleotide sequence revealed that there was the genetic difference in each genera and species. Phylogenetic relationship among each species showed that the Trichophyton mentagrophytes was more closely related Trichophyton tonsurans than Trichophyton rubrum, and Microsporum gypseum was less related than Microsporum spp..
This study aimed to describe the morphological and molecular characteristics of Paralecithodendrium longiforme (Digenea: Lecithodendriidae) adults and cercariae isolated in Thailand. Adult flukes were isolated from the Chinese pipistrelle bat (Hypsugo sp.), and cercariae were detected in the viviparid snail (Filopaludina martensi martensi) from Chiang Mai province. The morphological characteristics were observed and described using conventional methods, and the molecular characteristics with internal transcribed spacer 2 (ITS2) and 28S rDNA gene sequences. The adult flukes were fusiform, 0.84-0.98 mm in length, and 0.37-0.49 mm in width, and were distinguishable from other species by the presence of longitudinal uterine coils. The cercariae were nonvirgulate xiphidiocercariae, with the oral sucker bigger than the acetabulum, the tail without fin fold, a body size of 117.5-138.3×48.3-52.2 ㎛, and a tail size of 100.7-103.7×15.0-18.9 ㎛. Molecular studies revealed that the adults and cercariae shared 99.3% (ITS2) and 99.6% (28S rDNA) homology with each other. They were phylogenetically close to P. longiforme with an identity of 94.5% for ITS2 and 98.7% for 28S rDNA. This study provides new information on the natural definitive host and first intermediate host of P. longiforme in Thailand. The discovery of its cercarial stage in Filopaludina snails highlights the importance of monitoring the associated second intermediate host and prevention and control of this potentially zoonotic trematode.
참외 경작지 토양으로부터 순수 분리된 선충포식성 곰팡이 Kan-23 균주는 배양 30일 이후에 분생포자가 형성되는 증식이 매우 더딘 특성을 나타내었다. 주사전자현미경(SEM)을 이용하여 Kan-23 균주의 미세형태 구조를 관찰한 결과 분생포자병의 각 가지마다 $5{\sim}10$개의 분생포자를 형성하였으며, 분생포자는 3개의 격막을 형성하고 타원형을 나타내었고, 수축성 고리형태(constricting ring)의 포식 구조체를 형성하는 특징을 나타내었다. 다양한 배지를 이용하여 포식 구조체의 형태학적 특성을 비교 검토한 결과 GPA 배지에서 2배 이상 크기의 대형 수축성 고리 형태의 포식 구조체를 형성하는 특징을 나타내었다. Kan-23 균주의 rDNA의 ITS 영역의 염기서열을 분석한 결과, Drechslerella 속의 계통군에 속하였으며, 특히 Drechslerella brochopaga (U51950)와 99%의 높은 염기서열 유사도를 나타내어 Drechslerella brochopaga로 동정되어 국내 미기록종임이 확인되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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