• 미생물학회지
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• 제35권3호
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• pp.226-230
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• 1999

무지개송어 등의 연어과 어류에서 발생하는 전염성 조혈기괴사증 바이러스의 국내분리주인 IHNV-PRT 의 특성을 규명하기 위하여 IHNV-PRT 의 당단백질인 G를 암호화하고 있는 유전자의 일부를 PCR로 증폭한 후 cDNA를 클로닝하여 이들의 염기서열을 분석하였다. 이 PCR product 는 442 bp의 크기이었다. IHNV-PRT 의 G의 염기서열을 IHNV 의 다른 strain 과 비교 분석한 결과 IHNV-RB-76, IHNV-RB, IHNV-LR-73, IHNV-K, IHNV-WRAC, IHNV-SRCV, IHNV-CoI-85들의 G와 각각 95,94,94,94,93,93%의 상동성을 보였다. 그러나 넙치로부터 분리된 fish rhabdovirus 인 hirame rhabdovirus 의 G와는 81%의 사동성을 보였다. 이 결과로부터 IHNV 의 G 유전자는 비록 HRV 의 G 유전자와 유사성은 높지 않지만, IHNV 의 strain 에 관계없이 유사하다는 것을 알 수 있다.

• 한국어병학회지
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• 제23권1호
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• pp.1-8
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• 2010

무지개 송어 발안란의 이동 이력과 IHNV G gene 염기서열의 계통학적 분석에 의해 IHNV의 국내 이동에 대해서 처음으로 조사되었다. IHNV RtWanju09 분리주는 IHNV RtPy91과 RtJe00의 JRt Shizuoka lineage에 속하는 것으로 나타났으며, 강원도에서 분리된 IHNV RtPy91과 RtWanju09 사이의 G gene의 유전적 차이는 1.77%였고, 약 20년간 우리나라의 JRt Shizuoka lineage에 속하는 한국 분리주들은 최대 3.03%의 유전적 차이를 나타내 계속적으로 바이러스가 진화하는 것을 알 수 있었다. 또한 전라북도 지역에서 분리된 IHNV RtWanju09 분리주는 IHNV가 오염된 강원도 지역산 발안란이 전라북도에 전파되었을 것으로 사료된다.

• 한국어병학회지
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• 제35권2호
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• pp.157-165
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• 2022

Single-cycle viruses generated by reverse genetic technology are replication-incompetent viruses due to the elimination of gene(s) essential for viral replication, which provides a way to overcome the safety problem in attenuated viruses. Infectious hematopoietic necrosis virus (IHNV) is a major pathogen causing severe damage in cultured salmonid species. In the present study, we generated a single-cycle IHNV lacking the transmembrane and cytoplasmic domain in the G gene (rIHNV-GΔTM) and evaluated the prophylactic potential of rIHNV-GΔTM in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss). To produce rIHNV-GΔTM, IHNV G protein-expressing Epithelioma papulosum cyprini (EPC) cells were established. However, as the efficiency of rIHNV-GΔTM production in EPC cell clones was not high, fish were immunized with a low-tittered single-cycle virus (1.5 × 10² PFU/fish). Despite the low dose, the single-cycle IHNV induced significant protection in rainbow trout against IHNV infection, suggesting high immunogenicity of rIHNV-GΔTM. No significant difference in serum ELISA titers against IHNV between the rIHNV-GΔTM immunized group and the control group suggests that the immunized dose of rIHNV-GΔTM might be too low to induce significant humoral adaptive immune responses in rainbow trout. The involvement of adaptive cellular immunity or innate immunity in the present significantly higher protection by the immunization with rIHNV-GΔTM should be further investigated to know the protection mechanism.

• 한국어병학회지
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• 제36권2호
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• pp.389-394
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• 2023

Infectious hematopoietic necrosis virus (IHNV) is s significant viral pathogen affecting cultured rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) in Korea. In this study, five monoclonal antibodies (mAbs) (IHNV-1, 2, 3, 4, and 5) were produced using purified IHNV. Reactivities of these mAbs were analyzed by western blot (WB), enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), and indirect fluorescent antibody test (IFAT). These mAbs recognized glycoprotein (69 kDa, IHNV-1), nucleocapsid protein (39 kDa, IHNV-3, 4, and 5), or phosphoprotein (27 kDa, IHNV-2) of IHNV by WB analysis. ELISA results indicated that these five mAbs were specific to IHNV without showing any cross-reactivity against other fish viruses (hirame rhabdovirus, infectious pancreatic necrosis virus, and viral hemorrhagic septicemia virus). IFAT demonstrated specific fluorescence signals of IHNV-infected epithelioma papulosum cyprini (EPC) cells, whereas no reactivity of normal EPC cells was observed. These mAbs can be very useful for immuno-diagnosis of IHNV infection.

• 한국어병학회지
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• 제31권1호
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• pp.1-8
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• 2018

Causative agent of infectious hematopoietic necrosis (IHN) belonging to genus Novirhabdovirus (Rhabdoviridae). Economic losses caused by IHNV are serious in mainly Oncorhynchus spp. including rainbow trout O. mykiss and Atrantic salmon Salmo salar. IHNV was initially found by endemic presence in U.S. West Coast for sockeye salmon fry O. nerka and chinook salmon fry O. tshawytscha in the 1950s, and it has spread to Japan, Korea and Taiwan in the 1970s, and also to Italy and France in the 1990s. Currently, IHNV is detectable in many parts of the world, including Russia and South America. Mortality due to IHNV infection in fish with ${\leq}0.5g$ of body weight reaches 60% to 100%, while the mortality reduces by fish growing. In recent years, onset of IHNV infection has increased also in fish with large sizes. Here, we introduce molecular epidemiology and virulence changes of IHNV in East Asia, furthermore, we discuss on future prospects in IHNV researches.

• 한국어병학회지
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• 제7권1호
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• pp.13-22
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• 1994

우리나라에 존재하며 외국에서 분리된 것과 다른 특성을 보이는 IHNV를 대상으로 하여 이 바이러스의 면역유도단백질을 확인하고자 하였다. 먼저 우리나라에서 분리된 4종류의 IHNV를 미국에서 분리된 3종류의 IHNV(OSV, SRCV 및 RB-76)와 SDS-PAGE상에서 구조단백질의 크기와 혈청학적 특성 등을 비교하였다. 그 결과 우리나라에서 분리된 4종류의 IHNV중 2종류(PRT, MRT)의 IHNV는 미국에서 분리된 IHNV와 차이가 있었으며 (Park et al., 1993), IHNV-PRT를 대상으로 면역유도단백질을 확인하기 위해 IHNV-PRT에 대한 monoclonal antibodies(MAbs)를 만들었다. 이들 중 4종류의 hybridoma를 선택하여 hybridoma cell들이 분비하는 MAbs가 어떤 class인지를 ELISA 실험을 통하여 확인한 결과 4종류 모두 IgG class에 속하는 것으로 확인되었다. 이와같이 만들어진 4종류의 MAbs가 IHNV-PRT 구조단백질들 중 어떤 것에 대한 것인지를 western blotting 실험을 통해 확인한 결과, 2종류의 MAbs는 G단백질과 특이성이 있는 것들이었고, 나머지 2종류는 G보다 조금 큰 size의 단백질에 대한 것들이었다. 다음은 IHNV-PRT에 감염된 무지개송어의 혈청을 뽑아 여기에 존재하는 IHNV-PRT에 대한 항체를 western blotting 방법으로 분석을 한 결과 G, $M_1$, $M_2$ 및 G 보다 조금 큰 size의 단백질에 대한 항체가 존재하는 것으로 나타났다. 이상의 결과로부터 IHNV-PRT의 구조단백질들 중 G, $M_1$, $M_2$ 및 G 보다 조금 큰 size의 단백질들이 면역 유도 특성이 있음을 확인할 수 있었다.

• 한국어병학회지
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• 제25권3호
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• pp.257-262
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• 2012

본 연구에서는 어체내 IHNV 모니터링에 LAMP법의 사용이 가능 하는지를 검토하기 위해 IHNV를 무지개송어에 인위적으로 감염시킨 후 시간 경과에 따라 LAMP법과 어류세포를 사용한 분리배양법을 이용하여 IHNV 검사를 실시하였다. IHNV를 $10^{6.5}\;TCID_{50}$/fish, $10^{5.5}\;TCID_{50}$/fish, $10^{4.5}\;TCID_{50}$/fish로 복강 주사한 결과, 40%, 0%, 0%의 누적폐사율이 관찰되었다. 폐사어 및 IHNV 접종 후 16일과 28일째에 각 실험구에서 채집한 생존어 5마리를 대상으로 한 IHNV 검사 결과, 폐사어에서 IHNV가 100% (8/8 마리) 분리되었고 (감염가: $10^{4.3}-10^{6.8}\;TCID_{50}/ml$), RT-LAMP법에서도 100% 검출되었다. 16일째 생존한 개체를 대상으로 한 IHNV 검사 결과에서는 $10^{6.5}\;TCID_{50}$/fish, $10^{5.5}\;TCID_{50}$/fish, $10^{4.5}\;TCID_{50}$/fish의 IHNV로 접종한 실험구에서 각각 60% (3/5 마리, 감염가: $10^{2.8}-10^{5.05}\;TCID_{50}/ml$), 20% (1/5 마리, $10^{1.05}\;TCID_{50}/ml$), 60% (3/5 마리, $10^{1.05}-10^{4.8}\;TCID_{50}/ml$) 의 검출율을 보였으나 LAMP법에서는 20% (1/5 마리), 0% (0/5 마리), 20% (1/5 마리) 의 검출율을 나타내었다. 28일째 생존한 개체 및 대조구의 어류에서는 IHNV가 분리 검출되지 않았다. 이상의 연구결과로 LAMP법은 IHNV-생존어에서 바이러스를 모니터링 하는데 한계가 있으나 병어로부터 IHNV를 검출하는데 유용하게 사용될 수 있을 것으로 사료되었다.

• Journal of Microbiology
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• 제34권3호
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• pp.253-269
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• 1996

Infection of fish cells with IHNV resulted in gradual increase in cytosolic free Ca$\^$2+/ concentration ([Ca$\^$2+/)] in CHSE, gradual decrease in [Ca$\^$2+/] in FHM, and no significant change in RTG cells. The degree of [Ca$\^$2+/] increase or decrease was dependent on the amount of infectious virus, and these [Ca$\^$2+/] variations were maximal at 16 hours after virus infection (p. i.) in both cell lines. When the fish cells were infected with inactivated IHNV, evident variation in [Ca$\^$2+/] was not observed. Thus, infectivity of IHNV appears to correlate with changes in [Ca$\^$2+/] in virus-infected cells. These IHNV-induced [Ca$\^$2+/] changes were partially blocked by cycloheximide, but not affected by cordycepin. It seems to be that virus-induced Ca$\^$2+/ variations were more related with protein synthesis than RNA synthesis. Various Ca$\^$2+/ related drugs were used in search for the mechanisms of the [Ca$\^$2+/], changes following IHNV infection of CHSE cells. Decreasing extracellular Ca$\^$2+/ concentration or blocking Ca$\^$2+/ influx from extracellular media inhibited the IHNV-induced increase in [Ca$\^$2+/], in CHSE cells. Similar results were obtained with intracellular Ca$\^$2+/ sources are important in IHNV-induced [Ca$\^$2+/] increase in CHSE cells.

• 한국어병학회지
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• 제25권3호
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• pp.143-150
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• 2012

Infectious haematopoietic necrosis virus (IHNV) is an important fish pathogen that infects both wild and cultured salmonids. Since the first isolation of IHNV from rainbow trout and masu salmon in 1991, a series of IHN disease outbreak has been reported in Korea. In 2011, we isolated two IHNV isolates from rainbow trout cultured in Korea. The full open-reading frame (ORF) encoding the glycoprotein (G) of them were sequenced and the amino acid sequences were phylogenetically analyzed. Phylogenetic analysis of the G revealed that both IHNV isolates were grouped into an Asian genogroup containing Korean IHNV isolates and Japanese IHNV isolates. However, based on their sequence variation, they were divided into different subgroup. While one isolate was similar to other Korean isolates, the other isolate showed a high level of similarity with Japanese isolates, suggesting the possibility of influx of new IHNV strain into Korea.

• 미생물학회지
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• 제34권1_2호
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• pp.64-68
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• 1998

한국에서 분리된 전염성 조혈괴저바이러스(infectious hematopoietic necrosis virus, IHNV)인 IHNV-PRT의 특성을 규명하기 위하여 IHNV-PRT의 matrix 단백질인 M1 및 M2를 암호화하고 있는 cDNA를 클로닝하여 이들의 염기서열을 분석하였다. M1은 693 bp 크기의 open reading frame을 포함하였으며 이로부터 230개의 아미노산으로 구성된 25.9 kDa의 분자량을 가진 단백질이 합성될 수 있다. M2는 588 bp 크기의 open reading frame을 지니고 있으며 195개의 아미노산으로 구성된 21.9 kDa의 분자량을 지닌 단백질이 합성될 수 있다. IHNV-PRT의 M1과 M2의 아미노산 서열을 외국에서 분리된 IHNV들과 비교 분석한 결과 M1은 92-93%, M2는 97%의 상동성을 보였다. 이러한 사실은 IHNV의 M 단백질 유전자들은 IHNV의 strain에 관계없이 매우 보존되어 있음을 나타내준다.