The aim of this study was to investigate the hepatoprotecive effect of silk protein hydrolysates (SDH), which was prepared by acid hydrolysis, in rats. SDH itself did not exhibit any cytotoxic effect on hepatic tissues. SDH showed a protective effect on tert-butyl hydroperoxide (t-BHP)-induced hepatotoxicity and liver damage. SDH effectively reduced AST (aspartate aminotransferase) and ALT (alanine aminotransferase), which are biomarkers for liver damage, in a dose-dependent manner. Malondialdehyde (MDA), a lipid peroxidation product, was significantly reduced by SDH. A high dose of SDH (2 g/kg) reduced t-BHP-induced MDA production by 40%. Glutathione (GSH), which is an endogenous antioxidant molecule, was effectively increased by SDH treatment. GSH content was enhanced by around 2.5-fold, compared with t-BHP control, upon SDH (2 g/kg) treatment. Lactate dehydrogenase (LDH), which is an enzyme released by cell cytotoxicity, was greatly increased by t-BHP, but significantly decreased by SDH treatment. Furthermore, hematoxylin and eosin (H&E) staining showed that SDH suppressed t-BHP-induced lesions in liver tissue. Taken together, SDH might be used as a protective agent against liver damage.
Thread lifting has become popular as a minimally invasive technique for facial rejuvenation. Commercially available threads are composed of poly-L-lactic acid (PLLA), polycaprolactone (PCL), or polydioxanone (PDO). However, the histological changes that occur in response to implanted threads are unclear. The aim of this study was to evaluate histological changes that occur in response to implantation with three types of bioresorbable threads (PLLA, PCL, PDO) in rat skin. PLLA, PCL and PDO threads were implanted in the dorsal skin of Sprague Dawley rats and tissue samples were harvested 2, 4, 8 and 12 weeks post-implantation. To evaluate histologic changes induced by bioresorbable face-lifting threads, tissue samples were stained with hematoxylin & eosin, Masson's trichrome stain and Herovici's collagen stain. All three threads induced neocollagenesis of type 3 collagen in the rat skin. The amount of collagen induced by the threads was dependent on the thread surface area. The PDO cavern-type thread was most effective in inducing neocollagenesis due to its extensive surface area. Our results suggest that type 3 collagen induced by bioresorbable threads depends on the thread surface area to uphold the dermis and contributes to facial rejuvenation.
The visual cells in the retina of Iksookimia longicorpa (Pisces, Cobitidae) were investigated by light and scanning electron microscopes. The retina ($216.42{\pm}13.36{\mu}m$) has several layers, and the visual cell layer consists of unequal double cones and large rods. In a double cone, two members are unequal such that one cone is longer than the other (long element $26.42{\pm}1.7{\mu}m$, short element $16.82{\pm}1.1{\mu}m$). The cones form a row mosaic pattern in which the partners of double cones are linearly oriented with a large rod. The visual cells observed have an outer segment (hematophilic), inner segment (eosinophilic). In scanning electron microscopy, the outer segment links to inner segment by so-called calyceal piles (calyceal processes) of membrane discs surrounded by double membranes.
This mouse calvarial defected model is frequently used for new scaffold development in the bone regeneration. Most experiments are carried out in this way by measuring the bone regeneration of mouse calvaria defected area. As a next step, hematoxylin and eosin staining is analyzed by sacrificing mice On the other hand, the quantitative analysis for bone regeneration is carried out by micro computed tomography. However, there are several drawbacks with the micro computed tomography. That is, it takes a long time and it is quite expensive for bone regeneration quantitative analysis. This study was performed by simply measuring the quantity of bone regeneration in mouse clavaira defected area on two-dimensional digital x-ray images via Image J. Consequentially, this experimental method by using J program might help bio-technologist researcher regarding new bone regeneration by comparing the quantity of bone regeneration quickly and precisely as well.
This study was performed to observe the role of Pneumocystis carinii as an etiologic agent of interstitial pneumonia in immunocompromised hosts. Total 90 male Sprague-Dawley rats, approxi. mately 150-180 g, were used. Fifteen of them were used as control group and remaining 75 (5 groups) were as immunosuppression groups; group 1 received prednisolone (25 mg/kg twice weekly) only; group 2 Prednisolone and tetracycline (75 mk/kg/day) ; group 3 Prednisolone, tetracycline and trimethoprim-sulfamethoxasole (50~250 mg/kg/day) : group 4 prednisolone and trimethoprim-sulfamethoxasole; and group 5 prednisolone and griseofulvin (300 mg/kg/day) until death. The survival days of each group rat were calculated, and upon death their lungs were removed immediately and then stamp smears were prepared and stained by Giemsa or toluidine blue O. For histopathologic observation, lungs were fixed in 10% formalin, cut into sections and stained with Gomori's methenamine silvei, hematoxylin-rosin, and Brovkn & Brenn stain. The results obtained were as follows: 1. The mean survival time of each group rat was 19.3$\pm$5.2 days (group 1), 41.1$\pm$14.0 days (group 2), 50.5$\pm$18.4 days (group 3), 43.0$\pm$22.9 days (group 4) or 21.8$\pm$5.1 days (group 5). Significant differences were noted between group 1 and group 2(p<0.01), group 1 and group 3 (p<0.01), and group 1 and group 4 (p<0.01), which represented bacterial infections were most fatal in immunocompromised rats. Group 5 revealed no difference in the survival day from group 1, while significant differences were noted between group 2 and group 5(P<0.01), group 3 and group 5(p<0.01), and group 4 and group 5(p<0, 01), which represented little importance of fungal infection as the cause of death of the rats. 2. The first fatality due to p. carinii pneumonia occurred 17 days after the beginning of the immunosuppression. The occurrence rate of P. carinii pneumonia in the decreasing order was 92.9% (group 3), 80.0% (group 2 and group 5), 78.6% (group 4) and 33.3% (group 1). With regard to the pathological stage of P. carinii pneumonia, the stage 1 was 11.3%, the stage 2, 28.3%, and the stage 3, 60.4%. 3. Viewing from the duration of immunosuppression, bacterial pneumonia chieay appeared in 1 month, mixed infections (P. carinii and bacteria, or p. carinii and fungi) in 1~2 months, and pure P. carinii pneumonia after 2 months. The present study revealed that P. carinii pneumonia was the most important cause of death of immunocompromised rats later than 1 month after the start of immunosuppression.
The ultrastructure of the integumental epidermis of Korean planaria (Dugesia japonica) is studied by light microscope, scanning electron microscope and transmission electron microscope. The planaria has mono-layered integumental epidermis in which most of cells exhibit irregularly columnar shape. The epidermal cells of the integument are classified into six types on the basis of cytochemical and ultrastructural characteristics. 1) Ciliated epithelial cells: These cells have cilia in their free surfaces. The axonemes of cilia exhibits fundamental 9+2 microtubular pattern. 2) Eosinophilic cells: These cells contain a few large eosinophilic granules. The core of eosinophilic granule is consisted of sparsely dispersed fibrillar structures in relatively electron-lucent ground material. 3) Mucous cells: These cells are filled with irregularly shaped, PAS-positive mucous granules which have an average size of $0.8\\times0.3 \\muM$. 4) Rhabdite-forming cells: These cells possess a few strongly-eosinophilic large rhabdite granules. The rhabdite granules are synthesized either in the rhabdite-forming cells which constitute integumental epidermis or in the corresponding cells which are developed in the parenchyma and later transferred to epidermal cells of integumental epidermis through basement membrane. 5) A-type of basophilic granule cells: These granule cells possess round or irregularly-shaped granules which are strongly stained with Alcian blue. These electron-dense granules have an average size of $1.5\\times1.0 \\muM$. This type of cells is derived from parenchymal tissue. 6) B-type of basophilic granule cells: These basophilic granule cells with PAS-positive granules, are found in the epidermis of lateral body wall. The granules, which are about $0.7\\times0.4 \\muM$ in size, occupying most part of this cell type are originated from the parenchyma.
High-flow gas insufflation to get a bloodless field during off-pump coronary artery bypass may have adverse effects on the coronary endothelium. This study was designed (1) to elucidate the effect of carbon dioxide gas insufflations on the coronary endothelium at different flow rates and (2) to assess the protective effect of humidifcation against the coronary endothelial damage. Material and Method: In nine pigs, the left anterior descending coronary artery (LAD) was exposed after a median sternotomy. The LAD was divided into 4 segments and a coronary arteriotomy was made in each LAD segment in the beating heart. The far distal arteriotomy was exposed to room air for 10 minutes and was harvested as a control. Non-humidified carbon dioxide gas at a continuous flow rate of 5 L/min (Group I), humidified carbon dioxide gas at a continuous flow rate of 5 L/min (Group II), and humidified carbon dioxide gas at a continuous flow rate of 10 L/min (Group III) were insufflated for 10 minutes on each coronary arteriotomy site, respectively. After harvesting the coronary segments, hematoxylin-eosin staining, elastic fiber staining, and immunostaining with a CD34 monoclonal antibody were performed to evaluate the depth of endothelial damage and to count the residual endothelial cells, Result: In all three groups (Group I, II, and III), internal elastic laminae were preserved, however, the endothelial layers were significantly damaged by carbon dioxide gas insufflation. The mean percentages of remaining endothelial cells were 20,9$\pm$16.7%, 39.3$\pm$19.6%, and 6.8$\pm$5.3%, in groups I, II, and III, respectively. The percentages of remaining cells were significantly higher in group II than in groups I and III (p=0.008). The percentages of remaining cells were significantly higher in group I than in group III (p=0.008). Conclusions: The harmful effect of carbon dioxide gas insufflation on the coronary endothelium was dependent on the flow rate. The addition of humidification did not protect the coronary endothelium from denudation injury caused by high flow carbon dioxide gas insufflations.
목적 : 근관 치료의 최종 목적인 근관계의 영구적인 충전을 위해 사용되는 근관 봉함제는 많은 연구와 개선을 거쳐서 현재는 다양한 성분의 봉함제가 시판되고 있다. 이중에서 레진이 주성분인 봉함제는 조작이 편리하고 흐름성이 좋으며 근관의 벽에 높은 밀폐성을 보이고 충분한 작업시간과 높은 방사선 불투과성을 가지는 장점을 가짐에도 불구하고 높은 초기 생체 독성을 나타내는 단점을 가지고 있다. 본 실험에서는 기존의 상용화된 제품 중 레진이 주성분인 두 종류의 봉함제(AH 26, AH plus)와 산화아연이 주성분인 봉함제(Pulp Canal Sealer EWT)와 국내에서 새로이 개발한 제품으로서 레진이 주성분인 두 종류의 봉함제(Adseal-1,2)를 생체조직에 매식하여 국소적인 반응을 비교하여 생체친화성을 알아보고자 하였다. 방법 : 수종 봉함제의 생체 친화성을 알아보기 위하여 64마리의 Sprague-Dawley rat을 사용하였다. 봉함제의 피하조직 매식을 위해 길이와 직경이 각각 5와 1.5mm인 폴리에틸렌 테프론 관을 사용하였으며 이를 에탄올과 증류수로 세척 한 후 고압증기멸균을 시행하였다. Rat에 대하여 케타민으로 복강내 마취를 시행한 후 배부를 면도하고 iodine으로 소독한 다음 네 곳에 절개를 시행하였으며 blunt dissection을 통해 깊이 10mm이상의 피하조직 pocket을 형성하였다. 각각의 봉함제를 제조사의 지시 에 따라 혼합 후 즉시 멸균된 테프론 관에 주사기를 이용하여 담은 다음에 봉함제가 흐르지 않게 유의하며 pocket내로 삽입하였으며 이때 16개의 관을 대조군으로 사용하기 위해 봉함제를 넣지 않은 상태로 삽입하였다. 이 후 절개 부위를 surgical gut suture로 봉합하였으며 1주일 후에 발사하였다. Rat을 1, 2, 4, 12주 후에 각 군 당 세 마리 씩 에테르 흡입을 통해 희생하였으며 이 때 한 마리씩의 대조군도 포함시켰다. 이 후 매식된 관을 주위 조직과 함께 제거하고 포르말린에서 48시간 고정시킨 후 파라핀에 포매한 다음에 micro-tome을 사용하여 6$\mu\textrm{m}$로 serial section을 시행하였다. 정중선 부위의 시편에 Hematoxylin-Eosin staining을 시행한 후 Olsson, Orstavik 그리고 Mjor 등의 방법에 따라 조직학적 변화를 관찰한 후 slight(1), moderate(2), severe inflammation(3)의 단계로 분류하였다. 얻어진 결과를 통계처리 프로그램인 Jandel사의 Sigmastat을 이용하여 Kruskal Wallis Test로 통계처리를 하였다. 결과 : (Table omitted) 결론 : 1) Pulp Canal Sealer를 제외한 모든 군에서 시간이 지남에 따라 유의성 있게 염증이 감소되는 양상을 보였다(p<0.05). 2) Pulp Canal Sealer는 1주, 2주, 12주에서 강한 염증반응을 보였다. 3) AH 26과 AH Plus에서는 1주, 2주에서 강한 염증반응을 보였으나 12주에서는 염증반응이 감소하였다. 4) 새로 개발된 봉함제 Adseal-1,2는 1주, 2주에서는 가장 약한 염증반응을 보이나 4주, 12주 후에는 AH Plus와 비슷한 수준의 염증 반응을 보였다. 5) Pulp Canal Sealer를 제외한 모든 군에서 인정할 만한 생체친화성을 보였다. 6) Adseal-2가 Adseal-1에 비하여 전반적으로 낮은 염증반응을 보였다. 7) 각 군간 결과의 차이에 통계적 유의성은 없었다(p>0.05).
Background: Cellular remnants in the bioprosthetic heart valve are known to be related to a host's immunologic response and they can form the nidus for calcification. The extracellular matrix of the decellularized valve tissue can also be used as a biological scaffold for cell attachment, endothelialization and tissue reconstitution. Thus, decellularization is the most important part in making a bioprosthetic valve and biological caffold. Many protocols and agents have been suggested for decellularization, yet there ave been few reports about the effect of a treatment with hypotonic solution prior to chemical or enzymatic treatment. This study investigated the effect of a treatment with hypotonic solution and the appropriate environments such as temperature, the treatment duration and the concentration of sodium dodecylsulfate (SDS) for achieving proper decellularization. Material and Method: Porcine aortic valves were decellularized with odium dodecylsulfate at various concentrations (0.25%, 0.5%), time durations (6, 12, 24 hours) and temperatures ($4^{\circ}C$, $20^{\circ}C$)(Group B). Same the number of porcine aortic valves (group A) was treated with hypotonic solution prior to SDS treatment at the same conditions. The duration of exposure to the hypotonic solution was 4, 7 and 14 hours and he temperature was $4^{\circ}C$ and $20^{\circ}C$, respectively. The degree of decellularization was analyzed by performing hematoxylin and eosin staining. Result: There were no differences in the degree of decellularization between the two concentrations (0.25% 0.5%) of SDS. Twenty four hours treatment with SDS revealed the best decellularization effect for both roups A and B at the temperature of $4^{\circ}C$, but there was no differences between the roups at $20^{\circ}C$. Treatment with hypotonic solution (group A) showed a better ecellularization effect at all the matched conditions. Fourteen hours treatment at $4^{\circ}C$ ith ypotonic solution prior to 80S treatment revealed the best decellularization effect. The treatment with hypotonic solution at $20^{\circ}C$ revealed a good decellularization effect, but his showed significant extracellular matrix destruction. Conclusion: The exposure of porcine heart valves to hypotonic solution prior to SDS treatment is highly effective for achieving decellularization. Osmotic treatment with hypotonic solution should be considered or achieving decellularization of porcine aortic valves. Further study should be carried out to see whether the treatment with hypotonic solution could reduce the exposure duration and concentration of chemical detergents, and also to evaluate how the structure of the extracellular matrix of the porcine valve is affected by the exposure to hypotonic solution.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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