Invasion and metastasis is the major cause of tumor recurrence, difficulty for cure and low survival rate. Excavating key transcription factors, which can regulate tumor invasion and metastasis, are crucial to the development of therapeutic strategies for cancers. PU.1 is a master hematopoietic transcription factor and a vital regulator in life. Here, we report that, compared to adjacent non-cancerous tissues, expression of PU.1 mRNA in metastatic hepatocellular carcinoma (HCC), but not primary HCC, was significantly down-regulated. In addition, levels of PU.1 mRNA in metastatic hepatoma cell lines MHCC97L and MHCC97H were much lower than in non-metastatic Hep3B cells. Transwell invasion assays after PU.1 siRNA transfection showed that the invasion of hepatoma cell lines was increased markedly by PU.1 knockdown. Oppositely, overexpression of PU.1 suppressed the invasion of these cells. However, knockdown and overexpression of PU.1 did not influence proliferation. Finally, we tried to explore the potential mechanism of PU.1 suppressing hepatoma cell invasion. ChIP-qPCR analysis showed that PU.1 exhibited a high binding capacity with miR-615-5p promoter sequence. Overexpression of PU.1 caused a dramatic increase of pri-, pre- and mature miR-615-5p, as well as a marked decrease of miR-615-5p target gene IGF2. These data indicate that PU.1 inhibits invasion of human HCC through promoting miR-615-5p and suppressing IGF2. These findings improve our understanding of PU.1 regulatory roles and provided a potential target for metastatic HCC diagnosis and therapy.
본 연구에서는 방사선 손상 경감효과를 나타내는 기호식품을 발굴하고자 국내에서 주로 음용되고 있는 녹차의 방사선 손상 경감효과를 확인하기 위하여 고선량 및 저선량 방사선을 마우스에 조사하고 소장움 생존, 내재성 비장 조혈세포집락 형성 및 apoptosis 유발 등을 관찰하였으며, 그 효과를 방사선 방호효과가 알려져 있는 diethyldithiocarbamate(DDC)와 비교$.$관찰하였다. 생존 소장움의 수는 방사선 조사 전 녹차 투여군(경구투여군 : p<0.01, 복강내 투여군 : p<0.01) 및 DDC 투여군(p<0.005)에서 유의성있게 증가되었다. 내재성 조혈세포집락 형성은 방사선 조사 대 조군에 비하여 조사 전 복강내 투여한 군(p<0.05)에서만 유의성 있는 증가를 나타냈으며, DDC 투여군에서는 효과를 관찰할 수 없었다. 방사선에 의한 apoptotic cell의 형성은 방사선 조사 전 녹차 투여군(경구 투여군 : p<0.005, 복강내 투여군 : p<0.05)및 DDC투여군 (p<0.005)에서 통계적으로 유의성 있게 감소되었다. 이상의 결과에서 녹차의 방사선 손상 경감효과를 조혈세포의 생존과 회복, 소장움 세포 생존 및 방사선에 의한 apoptosis 유발억제를 통하여 확인하였으며, 이는 독성이 적은 천연물이라는 관점에서 방사선 손상 경감 음료로서 적용이 가능할 것으로 사료되며 추후 유효 분획 및 성분에 관한 연구가 요구된다.
형질전환 동물에 있어서 외래 유전자의 조절되지 않은 과다 발현은 생리적인 부작용이나 독성을 나타내게 된다. 본 연구에서는 이러한 문제를 해결하기 위하여 외래 유전자 발현 조절 system인 tetracycline-inducible expression system(Tet system)을 도입하였다. 그러나 종래의 Tet system을 이용한 유전자 발현 조절은 system 자체의 구성 요소로 인한 미미한 leaky 현상 때문에 완벽하게 이루어지지 않는다. 본 연구에서는 보다 완벽한 외래 유전자의 발현 조절 system을 구축하기 위하여 rtTA 대신 진일보한 형태의 $rtTA2^SM2$를 도입하고 TRE 부분을 TRE-tight로 대체하였다. 확립된 retrovirus vector system을 이용하여 다양한 표적세포와 형질전환 닭으로부터 혈소판 생산의 일차적인 조절자이며, 조혈간세포의 생존과 증식에 있어서 매우 중요한 역할을 하는 human thrombopoietin(hTPO)를 생산하고자 하였다. In vitro 상의 연구에서, CEF 세포에서 발현되는 hTPO가 가장 높은 발현량과 발현 유도율을 나타내었으며, 상업적으로 판매되고 있는 hTPO나 다른 표적세포에서 생산된 hTPO에 비해 생물학적 활성이 가장 높은 것으로 확인되었다. 고농도로 농축한 재조합 retrovirus를 stage X단계의 계란의 배반엽 층에 미세주입하여 대리 난각 방법으로 배양한 결과, 미세주입한 138개의 계란 중 21일 후에 15개의 계란에서 병아리가 부화하였으며, 그 중 8마리가 형질전환 개체로 확인되었다. 이 형질전환 닭은 사료 1 g 당 0.5 mg의 doxycycline을 첨가하여 2주간 식이하였으며, 그 후 혈액을 채취하여 hTPO 농도를 측정한 결과 200ng/mL로 확인되었다. 또한 형질전환 개체 중 수컷의 정자에서 hTPO 유전자의 존재를 확인함으로써 germLine transmission의 가능성을 입증하였다. 이상의 연구 결과는 사람의 cytokine 단백질의 대량생산을 위한 생체반응기로서의 형질전환 닭의 생산 가능성을 제시한 데 의의가 있다.
Osteoporosis is the leading underlying cause of fractures, particularly in postmenopausal women, due to the loss of estrogen-mediated suppression of bone resorption. More than 50% of adults 50 years of age or older are estimated to have osteoporosis. Osteoclast which is main target for treatment of osteoporosis is originated from hematopoietic cell line. Aloe has been widely used in worldwide country as a coadjuvant medicine. Extracts of the leaves of Aloe have been used in condition to improve dermatologic problem such as seborrheic dermatitis, aphthous stomatitis, xerosis, lichen planus and has been known to exert anti-inflammatory, anti-oxidant and anti-tumor effects. However, despite the popularity of aloe as a plant food supplements, the evaluation of its efficacy as a possible therapeutic option for osteoporosis remains scarce. Thus, we evaluated the effect of Aloe on receptor activator of nuclear factor-${\kappa}B$ ligand (RANKL)-induced osteoclast differentiation. Here we found that Aloe significantly inhibited osteoclast differentiation induced by RANKL. Aloe suppressed the activation of p38 pathway and $NF{\kappa}B$ in bone marrow macrophages (BMMs) treated with RANKL. Also, Aloe significantly inhibited the mRNA expression of c-Fos, tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP), osteoclast-associated receptor (OSCAR), nuclear factor of activated T cells (NFAT)c1 and cathepsin K in BMMs treated with RANKL. Particularly, Aloe greatly inhibited the protein expression of c-fos and NFATc1. Taken together, our results suggested that Aloe may be useful tool for treatment of osteoporosis by inhibition of osteoclast differentiation.
Osteoporotic fracture became a serious social problem, which related with mortality and morbidity in old age population. Osteoclast which is responsible for bone resorption is originated from hematopoietic cell line and plays a key role osteoporotic bone loss. Cynanchum wilfordii (Asclepiadaceae) roots have been used in Korean folk medicine for the treatment of diabetes mellitus and aging progression. Also, recent studies have shown that the extract and fractions of Cynanchi Wilfordii Radix have various pharmacological actions including scavenging free radicals, enhancing immunity, reducing high serum cholesterol, and anti-tumor activity. However, the effect of extract of Cynanchi Wilfordii Radix in osteoclast differentiation had not been reported. Thus, we evaluated the effect of Cynanchi Wilfordii Radix on receptor activator of nuclear factor-${\kappa}B$ ligand (RANKL)-induced osteoclast differentiation. Through our study, we found that Cynanchi Wilfordii Radix significantly inhibited osteoclast differentiation induced by RANKL. Cynanchi Wilfordii Radix suppressed the activation of p38 pathway and $NF{\kappa}B$ in bone marrow macrophages (BMMs) treated with RANKL. Also, Cynanchi Wilfordii Radix significantly inhibited the mRNA expression of c-Fos, tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP), osteoclast-associated receptor (OSCAR), nuclear factor of activated T cells (NFAT)c1 and cathepsin K in BMMs treated with RANKL. Particularly, Cynanchi Wilfordii Radix inhibited the protein expression of c-fos and NFATc1. Taken together, our results demonstrated that Cynanchi Wilfordii Radix may be useful treatment option of bone-related disease such as osteoporosis leads to fracture of bone and rheumatoid arthritis.
첨단 의료 장비의 보급으로 의료 분야의 방사선 활용도가 증가하면서 천연물을 활용한 방사선 방호제 연구는 사회적으로 중요한 과제가 되고 있다. 천연물인 셀레늄(Se)이 전립선에서 높게 발현되며 전립선 세포에 필수적인 역할을 한다는 것으로 알려져 있다. 전립선 조직을 대상으로 셀레늄에 의한 방사선 방호 효과를 연구하기 위하여 10 Gy의 방사선을 조사 시킨 후 1, 7, 21일 기간에 따른 혈구성분 및 항산화효소(Superoxide Dismutase; SOD) 활성 변화와 조직학적 변화를 관찰하였다. 방사선조사군(Rad)에 비해 셀레늄 투여 후 방사선조사군(Se+Rad)에서 조혈면역계의 손상을 경감시키는 유의한 방호 효과가 있었다(p<0.05). 셀레늄이 항산화효소인 Superoxide Dismutase(SOD)의 활성을 증가시키는 유효한 성분이며, 방사선 조사에 의한 전립선비대증의 발현을 억제하는 효과가 있음을 확인하였다. 셀레늄이 부득이하게 수반되는 방사선 피폭으로 인한 전립선 관련 질병의 예방과 방사선 방호제로서 유용성이 있을 것이라 사료된다.
Byun, Hwa Kyung;Yoon, Hong In;Cho, Jaeho;Kim, Hyun Ju;Min, Yoo Hong;Lyu, Chuhl Joo;Cheong, June-Won;Kim, Jin Seok;Kim, Hyo Sun;Kim, Soo-Jeong;Yang, Andrew Jihoon;Lee, Byung Min;Lee, Won Hee;Lee, Joongyo;Ahn, Ki Jung;Suh, Chang-Ok
Radiation Oncology Journal
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제35권3호
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pp.257-267
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2017
Purpose: Pulmonary toxicities, including infectious pneumonia (IP) and idiopathic pneumonia syndrome (IPS), are serious side effects of total body irradiation (TBI) used for myeloablative conditioning. This study aimed to evaluate clinical factors associated with IP and IPS following TBI. Materials and Methods: Fifty-eight patients with hematologic malignancies who underwent TBI before allogeneic hematopoietic stem cell transplantation between 2005 and 2014 were reviewed. Most patients (91%) received 12 Gy in 1.5 Gy fractions twice a day. Pulmonary toxicities were diagnosed based on either radiographic evidence or reduced pulmonary function, and were subdivided into IP and IPS based on the presence or absence of concurrent infection. Results: Pulmonary toxicities developed in 36 patients (62%); 16 (28%) had IP and 20 (34%) had IPS. IP was significantly associated with increased treatment-related mortality (p = 0.028) and decreased survival (p = 0.039). Multivariate analysis revealed that the risk of developing IPS was significantly higher in patients who received stem cells from a matched unrelated donor than from a matched sibling donor (p = 0.021; hazard ratio [HR] = 12.67; 95% confidence interval [CI], 1.46-110.30). Combining other conditioning agents with cyclophosphamide produced a higher tendency to develop IP (p = 0.064; HR = 6.19; 95% CI, 0.90-42.56). Conclusion: IP and IPS involve different risk factors and distinct pathogeneses that should be considered when planning treatments before and after TBI.
인간의 장내 상재 세균이며 인간에게 다양한 건강 증진 효과를 부여하는 것으로 알려진 Bifidobacterium속을 유아의 분변으로부터 분리하여 세포질, 세포벽 및 배양액의 고분자 획분을 대상으로 in vitro에서 장관면역계를 경유한 골수세포 증식활성을 검토하였다 분리한 6종의 Bifidobacterium속 중에서 Bifidobacterium SL-21의 세포벽 성분(CWP)이 농도 의존적으로 가장 높은 골수세포의 증식을 나타내었다. 한편, 골수세포 증식은 Peyer's patch를 매개로 일어나는 반응이므로 Peyer's patch에 의해 생성되는 cytokine류의 활성을 측정하였다. B. bifidum SL-21의 세포벽 성분과의 반응에 의해 GM-CSF, IL-2 및 IL-6 등의 cytokine류의 생산 증가가 확인되었으며 cytokine의 생산은 반응한 세포벽 성분에 농도 의존적 경향을 보였고 골수세포 증식이 증가할수록 높은 cytokine 생산 증가를 나타냈다. 불용성인 B. bifidum SL-21 세포벽을 lysozyme 처리하여 수용화시켜 분자량에 따른 활성을 검토한 결과, 분자량 30-50 kDa의 획분에서 가장 높은 골수세포 증식활성이 측정되었다. 이와 같은 결과를 토대로 하여 B. bifidum SL-21 세포벽 성분이 Peyer's patch의 림프구를 활성화시키고 이들 활성화된 림프구에서 생성되는 cytokine류에 의해 골수세포 증식이 이루어짐을 확인할 수 있었다. 또한 이들 활성화된 면역세포는 CM-CSF, IL-2 및 IL-6 등의 전신순환 면역계의 증강에 중요한 역할을 갖는 cytokine류를 생산하였다.
Background: Psoriasis is a multifactorial autoimmune skin disease with a pathogenesis that has remained obscure. Recently, T cells bearing natural killer receptors (NKRs) were precisely and strongly targeted as new putative pathogenic immunocytes in psoriasis. Among NKRs, killer cell immunoglobulin-like receptor (KIR) is the major molecule recognizing HLA class I allotypes and might be closely related to psoriasis. Methods: To investigate the association of KIR genotype and patients with psoriasis in Korean, we defined the 14 KIR genotypes in 96 patients with psoriasis and 86 healthy controls using PCR-SSP methods. Results: The frequencies of KIR2DS4 and KIR3DL1 were significantly decreased in psoriasis compared with controls (RR=0.21, p<0.02). When patients were divided into two subgroups at the age of onset, type I (<30 years) and type II ($({\geq}30$ years) respectively, these phenomena were similarly observed independent of groups divided (type I: RR=0.26, p<0.005; type II: RR=0.14, p<0.0006). When the patients were divided into subgroups according to the age of onset and family history, the frequencies of KIR2DS4, KIR3DL1, and KIR2DS3 were significantly decreased in type I compared with type II psoriasis (3DL1, 2DS4: p<0.004; 2DS3: p<0.04) and were significantly decreased in psoriasis without family history compared to with family history (3DL1, 2DS4: p<0.007; 2DS3: p<0.05). The frequency of haplotype combination BB was significantly increased in psoriasis compared with controls (RR=2.74, p<0.009). Conclusion: These results suggest that KIR genotype is a factor for the occurrence and development of psoriasis and in future how combinations of HLA and KIR genes influence psoriasis needs to be defined.
본 연구는 타히보 추출물이 천연 방사선 방호제로써 수컷 쥐의 전립선 내에서 일으키는 영향을 알아보기 위한 연구이다. 타히보 추출물은 유방암, 전립선 암의 세포라인에 대해 세포성장을 억제하는 능력이 있다고 알려져 있다. 수컷 쥐의 전립선을 채택하여 타히보 추출물에 의한 방사선 방호효과를 알아보기 위해 X-선 7 Gy를 조사한 날로부터 1 일, 7 일, 21 일 후의 혈액학적 변화, 외부독성평가, 항산화 효소(SOD)활성 변화 및 조직학적 변화를 관찰하였다. 타히보 투여 후 방사선 조사군은 방사선 조사군에 비해 더 큰 림프구 수치를 나타내었으며, 이 결과는 타히보가 조혈면역계의 회복능력에 영향을 미치는 것으로 사료된다. 외부독성평가결과로 타히보 추출물의 가장 높은 독성은 18.129±5.16 %, 가장 낮은 독성은 13.6945±4.43 %로 나타났다. 이는 타히보 추출물의 독성이 미미한 것으로 판단된다. 대조군 및 타히보 투여군의 전립선 세포핵 및 세포질의 구성은 균질하였으며, 이에 반해 방사선 조사군의 전립선 내 세포 핵 응집현상과 세포질내 염증반응이 나타났다. 타히보 투여 후 방사선 조사군은 방사선 조사군에 비해 전립선 내 세포질 염증반응은 적게 나타났으나 세포핵의 응집현상이 나타났다. 이는 타히보 추출물이 전립선의 세포에 대해 방사선 방호효과가 있음으로 판단된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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