• 제목/요약/키워드: Gel Permeation Chromatography

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Aspergillus ustus GR-98이 생산하는 Dextranase의 정제 (Pufification of Cextranase by Aspergillus ustus GR-98)

  • 이종태;도재호;양재원;김찬조
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제23권4호
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    • pp.411-415
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    • 1995
  • The dextranase (EC 3.2.1.11) produced by Aspergillus ustus GR-98 was purified by the following sequential methods; salting-out and dialysis, gel filtration on BIO-GEL P-100, ion exchange chromatography on DEAH-cellulose, affinity chromatography on hydroxyapatite, and preparative electrophoresis. Three active fractions, dextranases 1, 11 and 111, were isolated in electrophoretically pure states, and specific activities of the dextranases were 1,276, 1,154 and 1,125 units/mg, the degrees of yield were 9.0, 3.6 and 2.2%, having 145, 131.1 and 127.8 times as those of culture filtrate in degree of purification, respectively. The enzyme purity was confirmed by the PAGE, SDS-PAGE and get permeation-HPLC.

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닭발의 침지조건이 닭발 젤라틴에 미치는 영향 (Effect of Soaking Condition on the Physicochemical Properties of Chicken Feet Gelatin)

  • 장은경;임주연;김광옥
    • 한국식품과학회지
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    • 제34권3호
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    • pp.425-430
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    • 2002
  • 본 연구에서는 축산 부산물인 닭발을 산과 알칼리에 각각 침지하여 제조한 젤라틴의 이화학적 특성을 조사하였다. 침지조건에 따른 아미노산 함량은 큰 차이가 없었으나 상업적으로 판매되는 돈피나 소가죽 젤라틴과는 그 조성이 달랐다. 이는 원료의 특성과 제조공정의 차이에서 기인하는 것으로 사료된다. 젤라틴의 수율과 젤라틴 겔의 경도는 산성 조건에서 24시간 침지한 경우에, 알칼리 조건에서 1주 침지한 경우에 가장 높다고 평가되었다. 점도와 투명도는 침지기간이 증가함에 따라 산성 조건에서는 증가한 반면 알칼리 조건에서는 감소하였다. 색도는 산처리 닭발 젤라틴 겔이 알칼리처리 젤라팅 겔에 비해 L값은 높고, a값과 b값이 낮아 미관상 더 바람직하다. 이화학적 특성이 우수한 산처리 24시간 침지 시료와 알칼리 처리 1주 침지 시료의 분자량 분포를 Gel permeation chromatography로 살펴본 결과, 두 시료 모두 12개의 획분으로 구성되었다. 가장 많이 발견되는 분자량은 669 kD으로 알칼리 처리 시료가 산처리 시료에 비해 두 배나 많았으며, 300 kD 이하는 산처리 시료가 알칼리 처리군에 비해 현저히 많아 산처리 시료가 알칼리 처리군에 비해 상대적으로 저분자화 되어있었다.

Ceriporiopsis subvermispora 처리에 의한 아스펜 목재 리그닌의 구조 변화 (Structural Analysis of Milled Wood Lignins Isolated From Aspen Wood (Populus tremuloides L.) Biotreated by Ceriporiopsis subvermispora)

  • 최준원;문성희;안세희;최돈하;백기현
    • Journal of the Korean Wood Science and Technology
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    • 제33권6호통권134호
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    • pp.79-86
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    • 2005
  • 아스펜 목재(Populus tremuloides, L.)를 Ceriporiopsis subvermispora로 1, 2, 4, 6주 동안 부후 처리한 후, 목재의 화학적 성상변화를 관찰하였으며, 부후목재로부터 리그닌(MWL)을 단리하여 Gel permeation chromatography (GPC) 분석과 nitrobenzene oxidation (NBO)을 실시하였다. 부후가 진행되면서 목재내 리그닌의 함량은 계속 감소하여 6주 후에는 미처리재와 비교하여 20%까지 감소하였다. 리그닌은 균주처리에 의하여 저분자화되어 알칼리에 쉽게 용출되는 것으로 예측된다. 부후목재의 전섬유소(Holocellulose) 함량은 미처리재와 비교하여 5~6% 정도 감소하였다. 부후 과정 동안 $\alpha$-셀룰로스의 함량은 커다란 변화가 관찰되지 않았으나, xylose의 함량은 대조구의 23.4%에서 6주후에는 18%까지 감소하였다. 아스펜 목재의 리그닌 분자량은 균주처리에 의해서 점차 감소되었다가 부후 6주 이후에는 안정화 단계에 접어드는 경향을 보였다. 단리한 리그닌의 NBO 분석 결과, NBO 분해산물의 수율은 대조구와 비교하여 6주처리 후에는 20% 가량 감소되었다. 특히, 부후 목재 리그닌에서 S-타입 유도체(syringaldehyde+syringic aicd)의 감소량이 두드러졌다. G-타입 유도체(vanillin+vanillic acid)의 수율은 부후가 진행되면서 약 20% 가량 증가되었는데, 이는 부후과정에서 리그닌 분해 효소에 의한 S-리그닌의 탈메톡실화 반응이 진행되었음을 암시한다. 결론적으로, C. subvermispora는 부후 과정동안 G-리그닌보다 S-리그닌을 더욱 선택적으로 분해하는 경향을 나타내었다.

포도주에 함유된 항보체 활성 다당류 (Anti Complementary Polysaccharides in Grape Wines)

  • 박소연;이준수;유광원;한남수;이호;고종호;신광순
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제35권9호
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    • pp.1232-1236
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    • 2006
  • 포도주에 함유된 항보체 활성 다당류를 규명 및 분리하기 위하여 포도와 관련된 과실주로부터 조다당 획분을 시판되고 있는 적포도주, 백포도주 및 머루주로부터 농축과 에탄올 침전을 통하여 조제하였다. 항보체 활성의 검토 결과, 적포도주의 조다당 획분(RW-0)이 백포도주의 획분(WW-0)보다 더 높은 활성을 보여주었다. 항보체 활성을 갖는 포도주의 조다당 획분 중 Sephadex G-75의 gel permeation chromatography를 통하여 고분자 획분으로 RW-1과 WW-1으로, 저분자 획분으로 RW-2와 WW-2로 분획되었으며 머루주의 경우에는 분획되지 않았다. 분획된 획분 중 RW-1이 가장 높은 활성을 보여주었으며 91.3%의 당이 함유되어 있음을 확인할 수 있었다. 적포도주의 항보체 활성이 백포도주의 획분보다 높은 활성을 갖는 것은 펙틴과 헤미셀룰로오즈 등이 함유된 포도껍질로부터 활성 다당이 기인하는 것으로 보이며, 높은 당 함량과 수율을 보이는 고분자 획분, RW-1과 WW-1이 저분자 획분보다 활성이 높음을 알 수 있었다.

Purification and Characterization of Vitellin from the Red Flour Beetle, Tribolium castaneum Herbst

  • Kim, Seong-Ryul;Choo, Young-Moo;Lee, Seong-Jin;Jin, Byung-Rae;Kim, Jeong-Ho;Heo, In-Bum;Shon, Hung-Dae
    • International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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    • 제2권1호
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    • pp.55-59
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    • 2001
  • The vitellin of the red flour beetled Tribolium castaneum Herbst was purified and characterized. The vitellin of T. castaneum was purified by the FPLC techniques, anion exchange chromatography and gel permeation chromatography. In native-polyacrylamide gel electrophoresis, vitellin of T. castaneum was detected as a single band. This native vitellin has molecular weight of 440 kDa. The vitellin of T. castaneum is composed of three polypeptides, designated Vnl (178 kDa), Vn2 (168 kDa) and Vn3 (52 kDa) in SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. Three subunits of vitellin were presented in the female adult hemolymph and egg extracts, but not observed in the male. These three polypeptides gradually decreased during embryogenesis. Polyclonal antiserum raised against purified vitellin reacted with the three polypeptides, Vnl, Vn2 and Vn3. Antisera raised against Vn1 and Vn2 cross-reacted with the two large subunits, Vnl and Vn2, respectively. Another subunits Vn3, however, was not cross-reacted with these two antisera. Also, antiserum raised against Vn3 did not cross-react with the Vn1 and Vn2.

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해양방선균으로부터 Haloperoxidase의 검색과 특성 (Screening and Partial Purification of Haloperoxidase from Marine Actinomycetes)

  • 조기웅
    • 미생물학회지
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    • 제44권2호
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    • pp.116-121
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    • 2008
  • Haloperoxidase를 생산하는 미생물을 분리하기 위하여 국내 연근해와 남북극 등의 해양시료에서 분리된 방선균 균주를 대상으로 탐색을 수행하여 남해 백도 해조류 추출물로부터 분리된 한 종류의 방선균(#1460)에서 높은 haloperoxidase 활성이 확인되었다. 본 균주의 생리.생화학적 특성은 Streptomyces 속과 유사하며 생산되는 haloperoxidase는 세포 조 추출물로부터 ammonium sulfate precipitation, High-Q column chromatography, gel permeation chromatography, Hydroxyapetite chromatography 그리고 hydrophobic interaction chromatography를 통하여 42%의 수율과 purification fold 70으로 정제하였다. 본 효소의 최적 반응 pH는 7이고 pH 8에서 더 높은 안정성을 보여 $60^{\circ}C$에서 1시간 반응에 효소활성의 50%가 생존한다. 또 cyanide와 azide 이온에 의해 강한 저해현상을 보인다.

Separation and Purification of Lipase Inhibitory Peptide from Fermented Milk by Lactobacillus plantarum Q180

  • Kim, Seulki;Lim, Sang-Dong
    • 한국축산식품학회지
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    • 제40권1호
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    • pp.87-95
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    • 2020
  • In this study, we separated and purified lipase inhibitory peptide from fermented milk by Lactobacillus plantarum Q180 with the aim of developing a new functional anti-lipase activity yogurt product. L. plantarum 180 was inoculated into 10% reconstituted skimmed milk and incubated at 37℃ until the pH of the culture reached pH 4.4. The lipase activity was measured using porcine pancreatic lipase. The lipase inhibitory peptides were gradually isolated by ultrafiltration, reversed phase column chromatography (RPC), reversed phase high-performance liquid chromatography (RP-HPLC), and gel permeation high-performance liquid chromatography (GP-HPLC) from the fermented milk by L. plantarum Q180. An ODS-AQ column was used for the RPC, a Vydac C18 column for the RP-HPLC, and a Superdex Peptide HR column for the GP-HPLC. The peptide was composed of Asp, Thr, Ile, Ser, Ala, and Gln, and the anti-lipase activity (IC50) was 2,817 ㎍/mL.

Purification, Structural Characterization, and Biological Activity of Polysaccharides from Lentinus velutinus

  • Udchumpisai, Wascharin;Bangyeekhun, Eakaphun
    • Mycobiology
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    • 제48권1호
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    • pp.51-57
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    • 2020
  • A polysaccharide (LVP) was purified from fruiting body of Lentinus velutinus by ethanol precipitation fractionation and DEAE and Sephadex G-100 column chromatography. The yield of purified polysaccharide was 0.025%. Molecular characteristics of LVP were determined by gel permeation chromatography, FT-IR spectroscopy, and thin-layer chromatography. Our results revealed that LVP is a polysaccharide composed of only glucose units, and has a molecular weight of 336 kDa. Biological activity assays indicated that LVP exhibits both cytotoxic and antioxidant activity. LVP showed specific cytotoxicity against cancer cells (HeLa and HepG2 cells), and alterations in cancer cell morphology were found after LVP treatment.

Isolation of an Angiotensin Converting Enzyme Inhibitory Substance from Lycium chinense Miller

  • Lee, Sehee;Song, Kyung-Bin
    • Preventive Nutrition and Food Science
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    • 제9권1호
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    • pp.95-97
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    • 2004
  • An angiotensin converting enzyme (ACE) inhibitory substance was isolated and purified from Lycium chinense Miller. A crude water extract of Lycium chinense Miller was prepared by adding it to water shaking at $25^{\circ}C$ for 1 hr, followed by centrifugation at 8000 ${\times}$ g for 30 min. The crude extract was then filtered using YM-3 and YM-1 membranes. An ACE inhibitor was isolated using consecutive chromatographic methods including: ion exchange chromatography, gel permeation chromatography, and FPLC. The inhibitor was identified to have a molecular mass of 862 daltons by mass spectrometry.

Purification of an ACE Inhibitory Peptide from Hydrolysates of Duck Meat Protein

  • Kim, So-youn;Kim, Sun-hye;Song, Kyung-Bin
    • Preventive Nutrition and Food Science
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    • 제8권1호
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    • pp.66-69
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    • 2003
  • An angiotensin converting enzyme (ACE) inhibitory peptide was isolated and purified from the hydrolysates of duck meat protein. Duck meat protein was hydrolyzed using trypsin at 37$^{\circ}C$ for 2 hrs. An ACE inhibitory peptide was purified using membrane filtration, anion exchange chromatography, gel permeation chromatography, fast protein liquid chromatography, normal phase HPLC. The purified inhibitory peptide was identified to be a tetrapeptide, Glu-Asp-Leu-Glu having $IC_{50}$/ value of 85.9 $\mu$M.