Fruits of Hovenia dulcis T. (Rhamnaceae) was called ′jiguja ′ in oriental medicine which has been used for diuresis, remove of hangover and leaves has been used for detoxified the alcohol. From the MeOH Extraction. five compounds were isolated by column chromatography and elucidated as quercetin quercetin-3-O-rhamnose. quercetin-3-O-gal(6"1") rha, quercetin-3-O-glc(6"${\rightarrow}$1")glc, and kaemferol through specroscopic methods. (omitted)
The advantages of the organism Streptomycs griseus HUT 6037 is that the chitinase and chitosanase using chitinaceouse substrate are capable of hydrolyzing both amorphous and crystalline chitin and chitosan. We attempted to investigate the optimization of induction protocol for high-level production and secretion of chitosanase and the influence of chitin and partially deacetylated chitosan sources (75∼99% deacetylation). The maximum specific activity or chitinase has been found at 5 days cultivation with the 48 hours induction time using colloidal chitin as a carbon source. To investigate characteristic of chitosan activity according to substrate, we used chitosan with various degree of deacetylation as a carbon source and found that this strain accumulates chitosanase in the culture medium using chitosanaceous substrates rather than chitinaceous substrates. The highest chitosanase activity was also presented on 4 days with 99% deacetylated chitosan. The partially 53% deacetylated chitosan can secrete both chitinase and chitosanase which was defined as a soluble chitosan. The specific activities of chitinase and chitosanase were 0.89 at 3 days and 1.33 U/mg protein at 5 days, respectively. It indicate that chitosanase obtained from S. griseus HUT 6037 can hydrolyze GlcNAc-GlcN and GlcN-GlcN linkages by exo-splitting manner. This activity increased with increasing degree of deacetylation of chitosan. It is the first attempted to investigate the effects of chitosanase on various degrees of deacetylations of chitosan by S. griseus HUT 6037. The highest specific activity of chitosanase was obtained with 99% deacetylated chitosan.
An attempt was made to elucidate the stability of serum metabolites and enzyme activities in blood samples taken from rockfish(Sebastes schlegeli), Israeli carp(Cyprinus carpio) and rainbow trout Oncorhynchus mykiss) under different storing conditions. The concentrations of total protein(TP), albumin(ALB), triglyceride(TG), cholesterol(CHOL) glucose(GLC), phosphorus(P) and sodium(Na), and the activities of alanine aminotransferase(ALT) and aspartate aminotransferase(AST) in serum were investigated for 16 days at $15^{\circ}C$(room temp.) and $4^{\circ}C$ (refrigerative) condition, or frozen at $-20^{\circ}C$ for period of 30 days. Though there was a little difference between fish species, the concentrations of TP, ALB, GLC, P, Na in serum were stable at all storing temperatures, while those of TG, CHOL, ALT and AST were not stable, particularly even at the normal temperature. In general, serum components were more stable at refrigerative and frozen conditions than at room temp. storing. However, it was noticeable that the stability of CHOL in rockfish serum was found to be more unstable at $-20^{\circ}C$ than kept at $15^{\circ}C$ or$4^{\circ}C$.
Park, Na-Young;Cha, Jae-Ho;Kim, Dae-Ok;Park, Cheon-Seok
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.17
no.3
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pp.454-460
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2007
Enzymatic properties and substrate specificity of recombinant $\beta-glycosidases$ from a hyperthermophilic archaeon, Sulfolobus shibatae (rSSG), were analyzed. rSSG showed its optimum temperature and pH at $95^{\circ}C$ and pH 5.0, respectively. Thermal inactivation of rSSG showed that its half-life of enzymatic activity at $75^{\circ}C$ was 15 h whereas it drastically decreased to 3.9 min at $95^{\circ}C$. The addition of 10 mM of $MnCl_2$ enhanced the hydrolysis activity of rSSG up to 23% whereas most metal ions did not show any considerable effect. Dithiothreitol (DTT) and 2-mercaptoethanol exhibited significant influence on the increase of the hydrolysis activity of rSSG rSSG apparently preferred laminaribiose $(\beta1\rightarrow3Glc)$, followed by sophorose $(\beta1\rightarrow2Glc)$, gentiobiose $(\beta1\rightarrow6Glc)$, and cellobiose $(\beta1\rightarrow4Glc)$. Various. intermolecular transfer products were formed by rSSG in the lactose reaction, indicating that rSSG prefers lactose as a good acceptor as well as a donor. The strong intermolecular transglycosylation activity of rSSG can be applied in making functional oligosaccharides.
The optimum conditions for the analysis of the difenoconazole fungicide on soil and crops were investigated and the residues of that in apple and soil were identified by using the gas chromatography. The extract with acetonitrile was separated with saturated NaCl and n-hexane solution after filtered, and concentrated. Obtained fungicide residues were transfered to the florisil column and eluted with acetone and n-hexane mixed solution for the analysis by GLC(ECD). From the standard addition experiments with 0.20 and 1.0ppm, the average recoveries were 86~92% and the detection limit was 0.01 ppm. It seems to be safely used when difenoconazole is treated three times until 15 days before harvest of apple. In this case residual amounts of difenoconazole in apple was from 0.037ppm to 0.044ppm. The soil samples extracted with methanol and ammonium hydroxide mixed solution were partitioned with dichloromethane and saturated sodium chloride solution. The organic phase was concentrated and redissolved with toluene and analyzed with GLC(FID) after cleaned with Sep-Pak column. From the standard addition experiments with 0.10, 0.50 and 1.0ppm, the average recoveries were 101.2~103.7% and the detection limit was 0.025ppm.
To study the stress response of coho salmon (Oncorhpohus kisutch) during transportation, the stress responses of the fish confined in a container box filled with freshwater or $5{\%{\circ}}$ salt-water were monitored pre and post 10 hours transportation. Changes of cortisol as the first stress indicator, and glucose (GLC), lactate (LAC), triglyceride (TG), cholesterol (CHOL), sodium ($Na^+$), chloride ($Cl^-$), alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST) and lactate dehydrogenase (LDH) as the second stress indicators were compared between the fish in two hauling media. Results showed significantly lower levels of cortisol, GLC, LAC, TG, CHOL and AST in salt-water group than freshwater group, It was shown that using salt-water for transportation could lessen the stress level of the coho salmon.
This report describes the structures of high-mannose-type N-linked oligosaccharides in glycoproteins synthesized by the microfilariae of Diroflcrio immitis. Microfilariae of D. immitis were incubated in vitro in media containing 2-(3H) mannose to allow metabolic radiolabeling of the oligosaccharide moieties of newly synthesized glycoproteins. Glycopeptides were prepared from the radiolabeled glycoproteins by digestion with pronase and fractionation by chromatography on concanavalin A Sepharose. Thirty eight percent of 2- (3H) mannose incorporated into the microalariae of D. immitis glycopeptides was recovered in high mannose-type asparagine-linked oligosaccharides which were bound to the immobilized lectin. Upon treatment of 2-(3H) mannose labeled glycopeptides with endo - β- N- acetylglu co saminidase H , the high mannose type chains were released and their structures were determined by high performance liquid chromatography and exoglycosidase digestion. The major species of high mannose-type chains synthesized by microfilariae of D. immitis have the composition Man5GlcNAc2, Man6ClcNAc2, Man7GlcNAc2, and Man8GlcNAc2. Structural analyses indicate that these oligosaccharides are similar to high mannose-type chains synthesized by vertebrates.
The cause and the degree of the cis to trans isomerization were investigated about soybean oil (SBO), corngerm oil (CGO), cottonseed oil (CSO), margarine (MG) and shortening (ST). All samples treated with various conditions were analyzed to determine physicochemical characteristics (AV, POV, IV, RI), fatty acid composition, total trans fatty acid content and change of trans fatty acid composition by GLC, IR and HPLC. The results were obtained as follows; 1. Physicochemical constants were changed with a gentle slope according to incubating period at 40${\pm}$2$^{\circ}C$ and physicochemical constants of margarine and shortening were changed, significiantly. 2. The saturation degree in the unsaturated fatty acid composition determined by GLC gradually were increased during incubation and heating periodically. For palmitic-and stearic acid content at the samples stored in the incubator, the saturation degrees were gradually increased. But for the case of heat treatment, they were increased more rapidly than other fatty acids. 3. Total trans fatty acid contents in each samples were determined by GLC, IR and HPLC, the amount of trans fatty acids were measured with discrepancy. It was caused by deviation of analytical instruments, methods and the kinds of samples. Trans fatty acids were measured more definitly in IR more than GLC and HPLC. On the other hand, total trans fatty acid contents in average levels for SBO, CGO, CSO, MG and ST stored for 35 days and heated for 24 hours were 1.3%, 1.1%, 0.9%, 22.6% and 13.8%, and 3.6%, 3.0%, 2.8%, 41.2% and 20.8%, respectively.
Kim, Do-Hyung;Seok, Young-Mi;Kim, In-Kyeom;Lee, In-Kyu;Jeong, Seong-Yun;Jeoung, Nam-Ho
BMB Reports
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v.44
no.6
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pp.415-420
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2011
Diabetes is a well-known independent risk factor for vascular disease. However, its underlying mechanism remains unclear. It has been reported that increased influx of the hexosamine biosynthesis pathway (HBP) induces O-GlcNAcylation of proteins, leading to insulin resistance. In this study, we determined whether or not O-GlcNAc modification of proteins could increase vessel contraction. Using an endothelium-denuded aortic ring, we observed that glucosamine induced OGlcNAcylation of proteins and augmented vessel contraction stimulated by U46619, a thromboxane $A_2$ agonist, via augmentation of the phosphorylation of MLC20$MLC_{20}$, MYPT1(Thr855), and CPI17, but not phenylephrine. Pretreatment with OGT inhibitor significantly ameliorated glucosamine-induced vessel constriction. Glucosamine treatment also increased RhoA activity, which was also attenuated by OGT inhibitor. In conclusion, glucosamine, a product of glucose influx via the HBP in a diabetic state, increases vascular contraction, at least in part, through activation of the RhoA/Rho kinase pathway, which may be due to O-GlcNAcylation.
A Brevibacterium lactofermentum gene coding for a glucose-specific permease of the phosphoenolpyruvate-dependent phosphotransferase system (PTS) was cloned, by complementing an Escherichia coli mutation affecting a ptsG gene with the B. lactofermentum genomic library, and completely sequenced. The gene was identified as a ptsG, which enables an E. coli transformant to transport non-metabolizable glucose analogue 2-deoxyglucose (2DG). The ptsG gene of B. lactofermentum consists of an open reading frame of 2,025 nucleotides encoding a polypeptide of 674 amino acid residues and a TAA stop codon. The 3' flanking region contains two stem-loop structures which may be involved in transcriptional termination. The deduced amino acid sequence of the B. lactofermentum enzyme $II^{GIe}$ specific to glucose ($EII^{GIe}$) has a high homology with the Corynebacterium glutamicum enzyme $II^{Man}$ specific to glucose and mannose ($EII^{Man}$), and the Brevibacterium ammoniagenes enzyme $II^{GIc}$ specific to glucose ($EII^{GIc}$). The 171-amino-acid C-terminal sequence of the $EII^{Glc}$ is also similar to the Escherichia coli enzyme $IIA^{GIc}$ specific to glucose ($IIA^{GIc}$). It is interesting that the arrangement of the structural domains, IIBCA, of the B. lactofermentum $EII^{GIc}$ protein is identical to that of EIIs specific to sucrose or $\beta$-glucoside. Several in vivo complementation studies indicated that the B. lactofermentum $EII^{Glc}$ protein could replace both $EII^{ Glc}$ and $EIIA^{Glc}$ in an E. coli ptsG mutant or crr mutant, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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