• 제목/요약/키워드: G-BSA

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Protein G와 NHS를 이용하여 고정한 anti-IgG의 검출 성능 비교 (A comparison of detection capabilities of anti-IgG immobilizedby protein G and NHS)

  • 신은정;손영호;손영수
    • 센서학회지
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    • 제19권2호
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    • pp.142-148
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    • 2010
  • We have compared and investigated the detection capabilities of antibody of immunoglobulin G(anti-IgG) immobilized by protein G and N-hydroxysuccinimide(NHS) at the end of the self-assembled monolayer(SAM). Surface plasmon resonance(SPR) sensor has been utilized to measure the interaction between biomolecules. After formation of the protein G and SAM, anti-IgG, bovine serum albumin(BSA) and IgG has been sequently injected. Through the reponse of the SPR, we can conclude that the protein G immobilized anti-IgG better than the SAM. In addition, IgG detection capability of the anti-IgG immobilized by the protein G showed better performance compared with that immobilized by the SAM.

IgE/BSA가 자극한 골수유래 비만 세포에 대한 감태 Ethyl Acetate 분획물의 항알러지 효능 (Anti-allergic Effect of Eckolona cava Ethyl Acetate Fraction of on IgE/BSA-stimulated Bone Marrow-derived Cultured Mast Cells)

  • 한의정;김현수;신은지;김민주;한희진;전유진;지영흔;안긴내
    • 한국키틴키토산학회지
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    • 제23권4호
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    • pp.277-284
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    • 2018
  • 본 연구에서는 제주 자생해조류인 감태로부터 제조한 ethyl acetate 분획물의 비만 세포에 대한 항알러지 활성에 관한 연구를 수행하였다. IgE/BSA로 활성화시킨 비만 세포에서 EC-EtoAc는 세포 독성 없이 비만 세포의 탈과립 지표로 사용되는 ${\beta}$-hexosaminidase의 분비 뿐만 아니라 알러지 유발성 케모카인(TARC)과 사이토카인(IL-$1{\beta}$, IL-4, IL-6, IL-10, IL-13, IFN-${\gamma}$ 및 TNF-${\alpha}$)의 mRNA 발현을 억제하였다. 또한, EC-EtoAc는 비만 세포의 표면 리셉터인 $Fc{\varepsilon}RI$의 발현 및 IgE와 $Fc{\varepsilon}RI$의 결합능을 감소시켰다. 이 모든 결과로부터, 감태 유래 분획물인 EC-EtoAc가 활성화된 비만 세포에서 $Fc{\varepsilon}RI$의 발현 및 IgE와 $Fc{\varepsilon}RI$의 결합능을 감소시킴으로써 알러지 유발성 매개 인자들의 분비와 발현 등을 감소시켜 항알러지 효능을 가진다는 것을 알 수 있었다. 또한, 이 연구 결과는 EC-EtoAc가 항알러지 효능을 보이는 천연 소재로서 이용가치가 있다는 것을 제시한다.

Effect of 65 kDa Buffalo Placental Protein on B-Cell Proliferation and Antibody Response

  • Deepthi, K.;Rajput, Y.S.
    • Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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    • 제15권3호
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    • pp.432-437
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    • 2002
  • Immunosuppressive potential of 65 kDa buffalo placental protein (bPP65) on B-cell proliferation in vitro and antibody response in vivo was evaluated. B-cell proliferation was estimated by measuring incorporation of tritiated thymidine in buffalo lymphocytes while primary antibody responses against phytohaemagglutinin (PHA) or keyhole limpet haemocyanin (KLH) were evaluated in mice. bPP65 suppressed proliferation of lipopolysaccharide (a B-cell specific mitogen)-stimulated buffalo lymphocytes in vitro indicating suppression of B-cells. This suppression was dose dependent over the protein concentration range $25-100 {\mu}g/ml$. Primary antibody responses in mice against PHA and KLH in presence of bPP65 were lower as compared to in its absence but these were not statistically significant. Amino acid composition data of bPP65 and BSA suggested that bPP65 is different from BSA.

당과 후기당화합물의 생체 외 사구체여과율 모델에 대한 역할 (Effects of High Glucose and Advanced Glycosylation Endproducts(AGE) on the in vitro Permeability Model)

  • 이준호;하태선
    • Childhood Kidney Diseases
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    • 제10권1호
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    • pp.8-17
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    • 2006
  • 목적 : 생체 외 당뇨병 상태로서 고농도의 당을 포함하는 배양액과 후기당화합물을 적용하여 세포배양하고 이때에 나타나는 병리적 변화, 즉, 세포외 기질의 변화와 형태학적 변화와 함께 투과성(여과율)의 변화를 살펴보았고 동시에 당뇨병성 신증에서의 단백뇨의 기전을 설명하고자 하였다. 방법 : 후기당화합물의 준비를 위해 50mg/mL BSA(Fraction V, Sigma)와 pretense inhibitor를 포함한 PBS(pH 7.4)에 glucose-6-phosphate를 섞어 0.2 M의 용액을 만들었다. BSA를 대조군으로 하였으며, 후기당화합물과 BSA를 $5{\mu}g/cm^2$ surface area의 농도가 되도록 붓고 다음과 같은 비교 대상의 culture dishes를 만들었다(B5; BSA만 첨가 - 5 mM, B30; BSA만 첨가 - 30mM, A5; 후기당화합물만 첨가 - 5 mM, A30; 후기당화합물만 첨가 - 30 mM, A/B 25: osmotic control - 25 mM mannitol). 이틀 배양 후와 일 주 배양 후 각각의 culture dishes에 있는 heparan sulfate proteoglycan (HSPG)양을 ELISA를 이용하여 측정하고 B5를 대준군으로 하여 각각 비교하였다. 각각의 colture dishes에 있는 사구체 상피세포를 scanning EM(Hitachi S-570, Japan)을 이용하여 형태학적 관찰을 하였다. Cellulose semi-permeable membrane을 이용하여 각각의 culture dishes에서 두 시간 동안 apical chamber를 통해 여과되는 BSA양을 sandwich ELISA method로 측정하여 투과성에 대한 분석을 하였다. 결과 : 이틀 동안 배양 후 측정한 대조군을 포함한 다섯 culture dishes의 HSPG양은 통계학적 차이는 없었다. 일 주 배양 후에 이틀 동안 배양한 B5 dish에 비해서 일 주 배양한 A30 dish를 제외한 일 주 배양한 모든 dishes에서 10% 이상의 HSPG양의 증가를 보였다(P<0.05) 일 주 배양한 B5 dish에 비해선 일 주 배양한 A30과 B30 dish에서 각각 HSPG양이 각각 77.8%와 95.3%로 감소하였고(P>0.05), osmotic control group(A/B 25)에선 통계적으로 유의한 차이를 보이지 않았다(P>0.05). 후기당화합물이 첨가된 경우에 SEM상 분리된 세포사이이음(intercellular junction)과 융합된 미세융모를 관찰할 수 있었다. BSA의 투과성은 일 주 배양 후 A30 dish에서만 일 주 배양 후 B5 dish에 비해 19% 증가하는 소견을 보였으나 통계적인 유의성은 없었다(P>0.05). 결론 : 사구체 상피세포의 HSPG 형성의 감소에 고농도의 당과 후기당화합물은 서로 부가적인 역할을 하고 후기당화합물이 더 큰 역할을 함을 알 수 있다. HSPG 감소 소견과 더불어 SEM상 장기간 고혈당을 유지하면 사구체 여과기전에서 size-selective와 charge-selective 장벽에 결함을 유발할 수 있으며 당뇨병에서의 단백뇨의 기전 중 하나로 생각된다.

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5종의 향신료 에탄올 추출물의 항산화 효과 (Antioxidative Effect of Ethanol Extract for 5 Kinds of Spice)

  • 김진;김성애;윤원경;김은정;우미경;이미숙
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제33권9호
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    • pp.1426-1431
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    • 2004
  • 동, 서양에서 널리 사용되고 항균효과가 있는 것으로 알려진 후추, 겨자, 고추냉이, 계피, 정향을 대상으로 DPPH 라디칼 소거활성, linoleic acid를 이용한 지질과산화억제, MDA에대한 단백질 보호효과를 측정하여 각 향신료의 항산화효과가 어느 정도인지 측정해보고, 각 향신료들 간의 항산화효과를 비교한 결과는 다음과 같다. 각 향신료 에탄올 추출물의 DPPH 라디칼 소거 활성을 측정한 결과, 정향(92.9%)과 계피(89.9%)가 높은 저해활성을 보였다. 각 향신료의 에탄올 추출물의 지질과산화억제 활성은 정향만이 55.8%로 강한 linoleic acid의 과산화화 억제 활성을 보인 것으로 나타났고, 고추냉이, 겨자, 정향은 에탄올 추출물의 농도가 증가할수록 지질과산화 저해율이 상승하였으나, 후추와 계피는 1000 ${\mu}g$/assay의 고농도에서는 저해율이 다소 감소하는 경향을 보여 최고의 효과를 보인 농도는 300 ${\mu}g$/assay 수준임을 알 수 있었다. MDA에 대한 단백질 보호효과를 검색한 결과, 겨자와 고추냉이가 각각 73.2%와 72.2%로 MDA-BSA의 교차결합을 효과적으로 차단하였고, 후추도 61.6%의 저해율을 보였다. 이상에서 살펴본 바와 같이, 각 측정법에 따라 항산화 효과에 차이가 있었으나 이들 향신료를 상용함으로서 생체산화와 관련된 질병 및 노화의 예방과 억제효과가 있을 것으로 사료된다.

Studies on the Maturation of rabbit Follicular Oocytes in Vitro: Effects of Amino Acids and Carbohydrates

  • Bae, In-Ha
    • 한국동물학회지
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    • 제18권4호
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    • pp.181-196
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    • 1975
  • 토끼 여포난자의 성숙을 유도하는데 필요한 배양액의 성분중 아미노산 및 탄수화물의 영향을 규명하기 위해 실험한 결과는 다음과 같다. 1. 기본배양액에 포함된 탄수화물의 pyruvate, lactate 및 glucose는 모두 난자의 성숙유도에 유효한 성분이었으나 필수영양물질은 아님이 밝혀졌다. 아미노산중에 glutamine과 proline은 난자의 성숙을 촉진하였다. 특히 glutamine은 위의 세가지 탄수화물의 전부 또는 그 각각이 포함된 기본 배양액에서 보다 높은 난자의 성숙율을 보였다. 2. 아미노산이 포함된 배양액에 난자를 24시간 배양할 경우 배양 과정중에 생성된 암모니아의 양은 glutamine이 포함된 배양액에서 가장 높았다 (15.2 $\\mu$g/ml). 그러나 이 양은 난자의 성숙을 억제하지는 않았다. 3. 난자의 성숙율은 배양액의 osmole이 270 mOsm일때 가장 높았으나 최적 범위는 250$\\sim$310 mOsm로 넓은폭을 보였다. 4. 토끼여포난자는 0.08$\\sim$2 mM의 glutamine과 소혈청단백(BSA)만이 포함된 기본 배양액에서 능히 성숙이 유도됨을 보았다. 5. $^14 C$-glutamine을 사용한 실험에서 glutamine이 토끼난자의 단백질합성과 에너지 공급원으로 이용된다는 사실이 입증되었다.

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한국산 5종 해조류의 항산화효과와 총 폴리페놀 함량과의 관련성 (The Correlation of Antioxidative Effects of 5 Korean Common Edible Seaweeds and Total Polyphenol Content)

  • 곽충실;김성애;이미숙
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제34권8호
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    • pp.1143-1150
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    • 2005
  • 한국에서 널리 식용으로 이용되고 있는 미역, 다시마, 톳(갈조류), 파래(녹조류), 김(홍조류)의 항산화효과와 총 플라보노이드와 폴리페놀 함량과의 관련성을 알아보고자 건조 상태의 시판 해조류로부터 에탄올 추출시료를 얻은 후 $Fe^{2+}$로 유도된 지질과산화 억제율, DPPH 라디칼 소거율 및 MDA-BSA 결합 저해율을 측정하는 3가지 방법으로 항산화효과를 검정 하였고, 총 플라보노이드와 폴리페놀 함량을 측정하였다. 그 결과, 녹조류인 파래의 항산화효과가 가장 우수하였는데, 특히 지질과산화물이 단백질과 결합하는 반응을 매우 효과적으로 저해하였다. 그 다음 김과 다시마의 항산화효과가 우수하였으며, 미 역과 톳은 항산화효과가 거의 없었다. 총 플라보노이드 함량은 미역이 11.63 mg/g 건조무게로 가장 높았고, 총 폴리페놀 함량은 파래가 8.97 mg/g 건조무게로 가장 높았다. 한편, 3가지 방법에 의해 측정된 해조류의 항산화효과 모두가 총 폴리페놀 함량과 유의한 양의 상관관계를 보였으며, 특히 지질과산화억제율과 매우 높은 상관관계를 나타내어(r=0.9351, p<0.0001), 해조류에서의 항산화효과에 폴리페놀 성분이 크게 기여할 가능성을 보였다.

황연(黃連)이 Cationic Bovine Serum Albumin 투여로 유발된 Membranous Nephropathy Mouse Model에 미치는 영향 (Effects of the Coptidis Rhizoma Extract on the Membranous Nephropathy induced by Cationic Bovine Serum Albumin in Mice)

  • 채은영;조충식;김철중
    • 대한본초학회지
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    • 제24권1호
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    • pp.99-110
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    • 2009
  • Objectives : The current treatment regimens for patients with nephrotic syndrome due to membranous nephropathy(MN) are based on steroids or immunosuppressive therapy with the aim of reducing proteinuria and improving outcome. Although these treatments attenuate the deterioration of renal function in MN patients, it has been suggested that all are burdened by significant toxicity. Therefore, more specific and less toxic therapies are needed. This study was to evaluate the effects of Coptidis Rhizoma Extract(CRE) on the MN induced by cBSA in mice. Methods : Mice were divided into 4 groups. One group named for 'Normal' was injected with a saline solution not to be immunized. The rest groups were treated as follows; After mice were immunized with 0.2 mg of cBSA and Freund's complete adjuvant one time every two weeks for 6 weeks, they received intra-peritoneal injection of 10 mg/kg of cBSA daily for 4 weeks. Also, they were divided into 3 groups. The first named for 'Control' was not given CRE. The second for 'CRE-250' was given oral administration of 250 mg/kg of CRE daily for 4 weeks. The third for 'CRE-500' was given 500 mg/kg of CRE. All of mice were sacrificed 4 weeks after the first immunization. We measured a body weight and 24hrs proteinuria as well as serological analysis. The morphologic changes of renal glomeruli were also observed with a light microscope and an electron microscope. Results : The levels of 24 hrs proteinuria, triglyceride, IgG, IL-6 were significantly decreased in both CRE groups. And the level of IgM was significantly decreased in CRE-250 group. In histological findings of kidney tissue, thickening of GBM and deposition of electron-density were consideraly decreased in both CRE groups. Conclusions : The present study suggests that CRE is highly effective when treating mice with MN induced by cBSA. More clinical data and studies are to be done for efficient application.

Thiolated protein G로 개질된 SPR 센서 칩을 이용한 IgG 검출 (Detection of IgG Using Thiolated Protein G Modified SPR Sensor Chip)

  • 신은정;이연경;손영수
    • 센서학회지
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    • 제20권6호
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    • pp.434-438
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    • 2011
  • A portable surface plasmon resonance(SPR) based immunosensor using thiolated protein G and protein G was developed for the detection of immunoglobulin G(IgG). The protein G has specific affinity with Fc fragment of IgG and was thiolated by 2-Iminothiolane for introduction of thiol groups. Anti-IgG, bovine serum albumin(BSA), and IgG have been sequently injected after surface modification of gold sensor chip with protein G and thiolated protein G. The output signal was increased with the injection of each protein and the actual signal was measured by subtracting signal of reference channel from signal of sample injected channel. The experimental results showed the higher detection capability of IgG using thiolated protein G compared with protein G. From these results, we can conclude that the current surface modification technique and the portable SPR sensor system can be applied to various immunosensors for diagnosis.

소 혈청 단백질 분획들의 기포분리 현상에 관한 연구 (Foam Separation of Bovine Serum Protein Fractions)

  • 이부용;이철호
    • 한국식품과학회지
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    • 제19권3호
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    • pp.225-230
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    • 1987
  • 기포분리 조작을 이용하여 소 혈청 단백질의 분리농축 현상을 전기영동 패턴에 의하여 분석하였다. 기포분리가 이루어지는 소 혈청 단백질 농도범위는 $20{\mu}g/ml$ $800{\mu}g/ml$이었으며 용액의 pH5부근에서 기포분리액의 부피는 최대가 되며 단백질 농축율은 최소치를 기록하였다. 기포분리 온도가 높아질수록 분리액의 부피는 감소하고 농축율은 증가하였으며, 가스유입속도가 25ml/min에서 100ml/min으로 증가 할 수록 기포분리액의 부피는 감소하고 농축율은 증가하였다. 염을 첨가할 때 이온강도 $1{\sim}3$부근에서 농축율은 최대치를 나타내었으며 이는 표면장력의 저하효과와 관계가 있었다. 일반적으로 소수성이 분자량이 작은 BSA, ${\alpha}_1$, 및 ${\alpha}_2-globulin$ 분획이 선택적으로 기포 분리 되는 경향을 나타내었으며 단백질 분획의 이동은 pH, 분리온도 가스유입속도, 첨가한 염의 이온강도 등에 따라 다르게 나타났다.

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