In a relatively short period, monoclonal antibodies have made dramatic success as therapeutics for various diseases such as cancers and autoimmune diseases and become an important development items for many pharmaceutical companies. In order to develop antibody drug, it is important to investigate the structural characteristics of both antibody and antigen. NMR studies on antibody are extremely challenging due to big huddles such as a big size of protein and isotope labeling, nevertheless, several studies have been reported in 10 years. Here, we analyzed 95 papers dealing with antibody-related NMR studies reported in recent 10 years. We categorized papers into 3 types: 1) structural characterization of antibody, 2) structural characterization of antigen using antibody, 3) amyloidosis caused by fragment of antibody. This work would shed new light on antibody-related NMR studies.
A PCR-founded genetic analysis aim and principle was used to foster a hierarchical polar dendrogram of the Euclidean genetic distances (GDs) for two arkshell populations, Scapharca broughtonii (YEOSU, Yeosu population and JINHAE, Jinhae population). Five oligonucleotides primers were make use of to craft 354 and 390 scorable bands in the Yeosu and Jinhae populations, respectively, outspreading in DNA fragment size from 100 bp to 1,600 bp. The bandsharing (BS) results disclosed that the Jinhae population had a higher average BS value (0.700) than that for the Yeosu population (0.692). The GD between individuals supported an adjacent association in grouping II (JINHAE 12 - JINHAE 22). The observation of a noteworthy GD between the two Scapharca populations verified that this PCR-generated technique could be a profitable attempt for within- and between-population-grounded biological DNA scrutiny. The potential of PCR inquiry will be favorable in the selection of individuals and/or populations for several reproductive- and/or quarantine-connected characters in aquafarming manufacture.
In woody species with a long life span, the studies on inheritance of any trait may be very time consuming and laborious. Chloroplast DNA(cpDNA) has been a valuable tool in such studies since it has several unique features such as limited genome size and cytoplasmic inheritance. In the present study, cpDNAs from five different species of Populus(P. alba, P. glandulosa, P. alba${\times}$P. glandulosa, P. davidiana, and P. nigra), and Nicotiana tabacum were compared with regard to restriction fragment length polymophism. The results showed that cpDNAs among the species were very conserved, although some polymorphisms were observed when the DNAs were digested with restriction enzyme EcoRI or KphI. The other enzymes (Bgl II, and PstI) tested produced identical restriction fragmentation pattern among the species. However, cpDNAs from all the five Populus species showed different restriction fragmentation pattern from that of tobacco with the four restriction enzymes tested. Southern hybridization with tobacco rbcL gene fragment as a probe also produced identical pattern among Populus species. The results indicate that cpDNAs in the genus are very well conserved during evolution.
To reduce the size of 5.0kb HindIII fragment containing $\beta$-xylosidase gene, the 5.0kb insert of pAX278 which was previously cloned was reduced by various deletions and thus 1.4kb EcoRI-Xbal fragment was subcloned into pUC19, and the recombinant plasmid was named pAK208. The $\beta$-xylosidase acnivity of E. coli harboring pAK208 was higher about 1.3times than that of pAX278. For the improvement of $\beta$-xylosidase activity, we cloned and expressed the $\beta$-xylosidase gene in E. coli using vector pKK223-3 containing a potent tac-promoter, and enzyme activity of the transformant harboring pKHR212 was increased about 3.3 and 1.8 times than that of E. coli(pAX278) and Bacillus sp. K-17, respectively. To obtain better expression of $\beta$-xylosidase gene, the whole 5.0kb HineIII fragment was recloned into pC194, and the Bacillus sp. K-17 transformant harbor-ing the recombinant plasmid pCX174 showed higher activity than that of the E. coli (pAX278) and Bacillus sp. K-17, respectively. The characteristics of enzyme purified from transformants were consistent with those front alkalophilic Bacillus sp, K-17.
A comparison of analytical approaches for Levoglucosan ($C_6H_{10}O_5$, commonly formed from the pyrolysis of carbohydrates such as cellulose) and used for a molecular marker in biomass burning is made between the four different analytical systems. 1) Spectrothermography technique as the evaluation of thermograms of carbon using Elemental Carbon & Organic Carbon Analyzer, 2) mass spectrometry technique using Gas Chromatography/mass spectrometer (GC/MS), 3) Aerosol Mass Spectrometer (AMS) for the identification of the particle size distribution and chemical composition, and 4) two dimensional Gas Chromatography with Time of Flight mass spectrometry (GC${\times}$GC-TOFMS) for defining the signature of Levoglucosan in terms of chemical analytical process. First, a Spectrothermography, which is defined as the graphical representation of the carbon, can be measured as a function of temperature during the thermal separation process and spectrothermographic analysis. GC/MS can detect mass fragment ions of Levoglucosan characterized by its base peak at m/z 60, 73 in mass fragment-grams by methylation and m/z 217, 204 by trimethylsilylderivatives (TMS-derivatives). AMS can be used to analyze the base peak at m/z 60.021, 73.029 in mass fragment-grams with a multiple-peak Gaussian curve fit algorithm. In the analysis of TMS derivatives by GC${\times}$GC-TOFMS, it can detect m/z 73 as the base ion for the identification of Levoglucosan. It can also observe m/z 217 and 204 with existence of m/z 333. Although the ratios of m/z 217 and m/z 204 to the base ion (m/z 73) in the mass spectrum of GC${\times}$GC-TOFMS lower than those of GC/MS, Levoglucosan can be separated and characterized from D (-) +Ribose in the mixture of sugar compounds. At last, the environmental significance of Levoglucosan will be discussed with respect to the health effect to offer important opportunities for clinical and potential epidemiological research for reducing incidence of cardiovascular and respiratory diseases.
The effect of phenol on the change of bacterial community in the effluent water from a wastewater treatment plant was analyzed by PCR and terminal restriction fragment length polymorphism (T-RFLP). The fragments of 16S rDNA were amplified by PCR with bacterial primers, where one of the primers was biotinylated at the 5'-end. After digestion with restriction enzymes, HaeIII and AluI, the biotinylated terminal restriction tragments (T-RFs) of the digested products were selectively isolated by using streptavidin paramagnetic particles. The single-stranded DNA of T-RFs was separated by electrophoresis on a polyacrylamide gel and detected by silver staining technique. When 10 standard strains were analyzed by our method, each strain had a unique T-RF which corresponded to the calculated size from the known sequences of RDP database. The T-RFLP fingerprint generated from the effluent water was very complex, and the predominant T-RFs corresponded to members of the genus Acinetobacter, Bacillus and Pseudomonas. In addition, the perturbation of bacterial community was observed when phenol was added to the sample at the final concentration of 250 $l^{-1}$. The number of T-RFs increased and the major bacterial population could be assigned to the genus Acinetobacter, Comamonas, Cytophaga and Pseudomonas. A intense band assigned to the putative genera of Acinetobacter and Cytophaga was eluted, amplified, and sequenced. The nucleotide sequence of the T-RF showed close relationship with the sequence of Acinetobacter junii.
Schisandra nigra Max., a dioecious plant native to Jeju Island in Korea, is cultivated on a small scale for fruit production. As fruit-producing female individuals are generally considered to be more valuable than male, early identification of plant sex at the seedling stage is important. In this study, a sequence-characterized amplified region (SCAR) marker associated with a female-specific region in the genome of S. nigra was investigated. Of 120 randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) primers, one primer (OPB-03) consistently amplified a 749 bp band in female plants. The female-specific PCR product was isolated and cloned, and the nucleotide sequences were then determined. Southern hybridization performed using the female-specific fragment as a probe produced positive signals only in genomic DNA from the female plants. This result revealed that the 749 bp segment of DNA was present in the genome of female plants but absent in the genome of male plants. A SCAR primer pair was designed based on the RAPD marker to amplify a 436 bp fragment in the genomic DNA of female plants. This primer pair amplified the expected size of DNA fragment in female plants and four monoecious individuals collected from a natural population. The SCAR marker identified in this study can be used to distinguish female-flowering individuals at the seedling stage.
To discriminate between the genetically modified soybean processed foods which were Korean traditional foods as Beansprout, doenjang, Beancurd (Tofu) and the unmodified one. we had analyzed comparatively that the loss degree of inner DNA about denaturalization factors in process step as heat or pressure and decision of suitable PCR primer by size. As a result of having compared about ${\beta}$-actin was 160bp, 335 promotor was 130 bp and NOS terminator was 132 bp effective. As a result of having checked a loss degree of a gene, as for the bean curd, DNA was mostly preserved well, and the loss of DNA along the processing process was hardly observed by a processing process. Most DNA of beansprout have moved to trunk after germination stage, and the appropriate analysis part was judged as the trunk. And the doenjang showed a detection difference of DNA by an operation of an enzye among self-life periods. Besides, after 50days, insertion gene was destoryed entrely so that detection was not possible.
Park, Se-Jin;Jeong, Hwa-Jae;Shin, Hun-Kyu;Seo, Dong-Seok;Choi, Young-Min;Kim, Eugene
Journal of Korean Foot and Ankle Society
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v.18
no.1
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pp.29-35
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2014
Purpose: The purpose of this study is to compare the radiologic and clinical results of syndesmotic screw fixation and posterior malleolar fixation for syndesmotic injury in Lauge-Hansen classification pronation-external rotation (PER) stage IV ankle fractures with posterior malleolus fracture. Materials and Methods: We designed a retrospective study that included patients with Lauge-Hansen classification PER stage IV ankle fracture with posterior malleolus fracture. Of 723 patients who underwent ankle fracture surgery from March 2005 to November 2012, 29 were included in this study. In this study, syndesmotic injury was treated with syndesmotic screw fixation or posterior malleolus fixation. There were 15 cases of syndesmotic screw fixation and 14 cases of posterior malleolar fixation. We compared the radiologic and clinical results at one year postoperatively. Posterior malleolus fragment size on a pre-operative computed tomographic image, and tibiofibular overlap, medial clear space, articular step-off, Kellgren-Lawrence grade, and Takakura classification on a postoperative one year followup radiograph were used for comparison of the radiologic results. The clinical results were assessed using the American Orthopaedic Foot and Ankle Society score, visual analogue scale score, and patient subjective satisfaction score. Results: Posterior malleolar fragment size was $12.62%{\pm}3.01%$ of the joint space in the syndesmotic screw fixation group and $27.04%{\pm}4.34%$ in the posterior malleolar fixation group. A statistical difference was observed between the two groups. However, other results, including tibiofibular overlap, medial clear space, articular step-off, Kellgren-Lawrence grade, Takakura classification, and clinical scores showed no statistical difference. Conclusion: In the Lauge-Hansen classification PER stage IV ankle fracture with posterior malleolus fracture, if the posterior malleolus fracture can be reduced anatomically and fixated rigidly, syndesmotic screw fixation, which can cause several complications, is usually not required for achievement of a satisfactory syndesmotic stability; this would be a recommendable option for treatment of syndesmotic injury.
Aster altaicus var. uchiyamae is on the list of endangered species in Korea. Using amplified fragment length polymorphism (AFLP) markers, we investigated the genetic diversity within and among four populations (Guram, Dori Island, Samhap, and Danyang) of A. altaicus var. uchiyamae. We also present the collecting strategies that most efficiently capture the genetic diversity of A. altaicus var. uchiyamae. Four AFLP primer combinations produced a total of 936 bands, of which 934 (99.8%) were polymorphic. A high level of genetic diversity (PPB = 45.3%, h = 0.104, I = 0.168, hs = 0.108) was recognized within the populations of A. altaicus var. uchiyamae. A low degree of genetic differentiation ($G_{ST}$ = 0.075, ${\theta}^B$ = 0.079) was detected among the populations. In addition, analysis of molecular variance (AMOVA) showed that genetic variation was greater within populations (91%) than among populations (9%). These results indicate that the high rate of gene flow has played an important role in forming the present populations of A. altaicus var. uchiyamae. According to maximization strategy, 17, 16, and 11 individuals captured all of the genetic variation in Dori Island, Samhap, and Guram population, respectively. The determination the minimum population size of A. altaicus var. uchiyamae in terms of the genetic information is critical and thereby gain reliable decision support for ex situ conservation of the endangered species, A. altaicus var. uchiyamae.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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