Kim, Myoung-Sug;Seo, Jung-Soo;Park, Myoung-Ae;Cho, Ji-Young;Hwang, Jee-Youn;Kwon, Mun-Gyeong;Jung, Sung-Hee
Journal of fish pathology
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v.23
no.1
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pp.37-45
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2010
In this study, we carried out research on the level of single and multi-drug resistance of bacteria isolated from cultured flounder Paralichthys olivaceus. One hundred sixty one bacteria were isolated from cultured olive flounder Paralichthys olivaceus in Korea and the isolates consisted of Edwardsiella tarda (n=32), Vibrio ichthyoenteri (n=37), Vibrio spp. (n=54), Streptococcus parauberis (n=28) and Streptococcus spp. (n=10). These E. tarda isolates were highly resistant in the order of tetracycline (84.4%) and oxolinic acid (71.9%). V. ichthyoenteri and Vibrio spp. showed resistance ampicillin (94.6% and 81.5%) and tetracycline (56.8% and 42.6%). S. parauberis isolates were resistant ampicillin (57.1%), tetracycline (57.1%) and erythromycin (35.7%). Of the isolates, 84.4% of E. tarda, 73.0% of V. ichthyoenteri, 57.4% of Vibrio spp., 42.8% of S. parauberis and 70.0% of Streptococcus spp. isolates exhibited multi-drug resistance against more than two antibiotics.
Using a rotating biological contactor modified with a sequencing bath reactor system (SBRBC) designed and operated to remove phosphate and nitrogen [58], the microbial community structure of the biofilm from the SBRBC system was characterized based on the extracellular polymeric substance (EPS) constituents, electron microscopy, and molecular techniques. Protein and carbohydrate were identified as the major EPS constituents at three different biofilm thicknesses, where the amount of EPS and bacterial cell number were highest in the initial thickness of 0-100${\mu}m$. However, the percent of carbohydrate in the total amount of EPS decreased by about 11.23%, whereas the percent of protein increased by about 11.15% as the biofilm grew. Thus, an abundant quantity of EPS and cell mass, as well as a specific quality of EPS were apparently needed to attach to the substratum in the first step of the biofilm growth. A FISH analysis revealed that the dominant phylogenetic group was $\beta$- and $\gamma$-Proteobacteria, where a significant subclass of Proteobacteria for removing phosphate and/or nitrate was found within a biofilm thickness of 0-250${\mu}m$. In addition, 16S rDNA clone libraries revealed that Klebsiella sp. and Citrobacter sp. were most dominant within the initial biofilm thickness of 0-250${\mu}m$, whereas sulfur-oxidizing bacteria, such as Beggiatoa sp. and Thiothrix sp., were detected in a biofilm thickness over 250${\mu}m$. The results of the bacterial community structure analysis using molecular techniques agreed with the results of the morphological structure based on scanning electron microscopy. Therefore, the overall results indicated that coliform bacteria participated in the nitrate and phosphorus removal when using the SBRBC system. Moreover, the structure of the biofilm was also found to be related to the EPS constituents, as well as the nitrogen and phosphate removal efficiency. Consequently, since this is the first identification of the bacterial community and structure of the biofilm from an RBC simultaneously removing nitrogen and phosphate from domestic wastewater, and it is hoped that the present results may provide a foundation for understanding nitrate and phosphate removal by an RBC system.
Anammox (Anaerobic Ammonium Oxidation) bacteria is recently discovered microorganism which can oxidize ammonium to nitrogen gas in the presence of nitrite under anaerobic conditions. The anammox process can save an energy for nitrification and need not require a carbon source for denitrification, however, the start-up periods takes a long time more than several months due to the long doubling time (approximately 11 days). In order to find the effects of seeding microorganisms, hydrazine, and nitrite concentration on the enhancement of the anammox activity, five kinds of microorganisms were selected. Among the several kinds of seeding microorganisms, the granule from acclimated microorganisms treating high concentration of ammonia nitrogen (A-1) and sludge from piggery wastewater treatment plant (A-2) were found to have a high anammox activity. In the case of A-1, the maximum nitrogen conversion rate represented 0.4 mg N/L-hr, and the amount of nitrite utilization was high compared to those of other seeding microorganisms. The A-4 represented a higher nitrogen conversion rate to 0.7 mg N/L-hr although the ammonium concentration in the serum bottle was high as 200 mg/L. Meanwhile, the anaerobic granule from UASB reactor treating distillery wastewater showed a low anammox activity due to the denitrification by the remained carbon sources in the granule. Hydrazine, intermediate product in anammox reaction, enhanced the anammox activity by representing 1.4 times of nitrogen gas was produced in the test bottle than that of control, when 0.4 mM of $N_2H_4$ was added to serum bottle which contains 5 mM of nitrite. The high concentration of nitrite (10 mM) resulted in the decrease of the anammox activity by showing lower production of nitrogen gas compared to that of 5 mM addition of nitrite concentration. As a result of FISH (Florescence In-Situ Hybridization) experiment, the Amx820 probe showed a more than 13% of anammox bacteria in a granule (A-1).
Shin, Yun Kyung;Kim, Won-Jin;Jun, Je-Cheon;Cha, Bong-Jin;Kim, Myoung-Sug;Park, Jung Jun
Korean Journal of Ichthyology
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v.29
no.1
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pp.41-51
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2017
To understand the application in farm for the fish aquaculture, we investigated biological and pathological traits on red sea bream Pagrus major which were reared in each copper-alloy net cage and the synthetic fiber net cage for 9 months. Two groups of cage were made and set in Yokji-eup, Tongyoung, Gyeongsangnam-do in size of 25 m in diameter and 10 m of depth. Survival rate of the red sea bream in the rearing copper-alloy net cage and synthetic fiber cage showed 99.75% and 99.70% respectively, there was no significant difference. Daily weight growth rate in each net was shown to 2.13 g/day and 1.65 g/day. Health analysis by blood composition analysis showed a favorable result in the copper-alloy net cage rather than in the synthetic fiber net. Bioaccumulation of heavy metal such as Cu and Zn especially in gonad was higher than other organ. Bioaccumulation of Cu and Zn in the muscle was lower compared to the permitted standard for food safety. Pathogenic infection test discovered Microcotyle tai for parasite, V. alginolyticus and other five species for bacteria. But there was a little bit difference of bacteria infection in copper-alloy net cage and copper-alloy net cage is expected to be has antibacterial effect. Thus, copper-alloy net cage can be applied to farm considering its system stability, recycling, antibiosis and food safety.
The performance and removal efficiencies of a pilot scale biofilter were estimated by using ammonia and hydrogen sulfide as the odorous gases. Expanded polyurethane foam coated with powdered activated carbon and zeolite was used as a biofilm supporting medium in the biofilter. Odorous gases from the sludge thickener of a municipal wastewater treatment plant were treated in the biofilter for 10 months and the inlet ammonia and hydrogen sulfide concentrations were 0.1-1.5 and 2-20 ppmv, respectively. The removal efficiencies reached about 100% at the empty bed retention time (EBRT) of 3.6-5 seconds except for the adaptation periods. The pressure drop of the biofilter caused by the gas flow was also low that the maximum attained was 31 mm $H_2O$ during the operation. Its stability was confirmed in the long term due to the fact that the biofilter and the polyurethane medium had a minimum plugging and compression. The microbial community on the medium is critical for the performance of the biofilter especially the distribution of ammonia oxidizing bacteria (AOB) and sulfur oxidizing bacteria (SOB). The distribution of Nitrosomonas sp. (AOB) and Thiobacillus ferroxidans (SOB) was confirmed by FISH (fluorescence in situ hybridization) analysis. The longer the operation time, the more microbial population observed. Also, the medium close to the gas inlet had more microbial population than the medium at the gas outlet of the biofilter.
This study was attempted to investigate variation of the bacterial flora in waste water treatment of fish meat paste plant by batch and continuous culture. The results of the experiment are as follows : 1. The removal rate of BOD in waste water treatment by activated sludge of continuous culture was above $90\%$. 2. In the process of nitric acidification of protein waste water, $NH_4-N\;and\;NO_2-N$ increased untill the lapse of 48 hours from culture, but $NO_3-N$ showed little change. 3. In activated sludge obtained from acclimation by batch culture for 10 days, bacteria good in capacity of nitric acidification were not appeared. 4. Among 120 strains of isolated bacteria, the most predominantly appeared bacterial flora were Enterobacteriaceae ($28\%$) and Pseudomonas spp. ($25\%$), In the latter term of aeration during which ammonia originates in abundance, Pseudomonas spp. was decreased but Enterobarteriaceae was increased. 5. Fifty percent of the isolated strains were able to grow in $0\%,\;3\%$ NaCl and $75\%$ artificial sea water, Therefore, it is suggested that sea water can be used as dilution water instead of tap water during the treatment of waste water.
Ray, Durga;Kim, Yeon Ha;Choe, unjeong;Kang, Ho Young
Journal of Life Science
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v.31
no.1
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pp.28-36
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2021
Edwardsiella piscicida is a significant cause of hemorrhagic septicemia in fish and gastrointestinal infections in humans. Survival bacteria require specialized mechanisms to adapt to environmental fluctuations. Hence, to understand the mechanism through which E. piscicida senses and responds to environmental osmolarity changes, we determined the protein expression profile and physiological properties under various salinity conditions in this study. The OmpR protein is a part of the Env-ZOmpR two-component system that has been implicated in sensing salt stress in bacteria. However, the physiological role played by this protein in E. piscicida remains to be elucidated. Therefore, in this work, the function of the OmpR protein in response to salt stress was investigated. Phenotypic analysis revealed that, in the mutant, three of the biochemical phenotypes were different from the wild type, including, citrate utilization, hydrogen sulfide, and indole production. Introduction of the plasmid containing the entire ompR gene to the mutant strain returned it to its parental phenotype. The retarded growth rate also partially recovered. Furthermore, in our studies, OmpR was not found to be related to cell motility. Taken together, our results from the mutational analysis, the growth assay, MALDI-TOF MS, qRT-PCR, and the phenotype studies suggest that the OmpR of E. piscicida is implicated in osmoregulation, growth, expression of porins (ETAE_1826), virulence-related genes (EseC, EseD and EvpC), and certain genes of unknown function (ETAE_1540 and ETAE_2706).
Metallothionein is an important and essential protein to control the intracellular concentration of heavy metals, which exist in all organisms from bacteria to vertebrates. Although the detailed functions and induction mechanisms of metallothionein gene have not been clearly characterized until yet, the structure of several metallothionein genes has been revealed. Especially, piscine metallothionein is regarded as an important protein because it is induced by several heavy metal pollutants and environmental stress and it could be determined the comparative amount of heavy metals and the extent of environmental stress by assaying the RNA transcript of metallothionein gene in the method of the quantitative RT-PCR(Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction). In this study I have characterized the 450 bp PCR fragment of metallothionein gene amplified by using the mixture of internal specific primers and universal 3' end primer. The nucleotide sequence analysis of 450 bp PCR fragment amplified in cDNA library of channel catfish did not show strong homology to other piscine metallothionein genes.
We have investigated lysozyme activity and protectivity of starry flounder, Platichthys stellatus against olive flounder pathogenic bacteria, Edwardsiella tarda, Vibrio ichthyoenteri and Streptococcus iniae in varying salinities, water temperatures and stocking density. Starry flounders were susceptible to E. tarda but not V. ichthyoenteri and S. iniae. Under low salinity condition, the lysozyme activity was decreased a little compared to the control but not significant. The physiological and immune activities were normal up to 26 ℃ culture temperature and 100% stocking density; they were compromised from 29℃ and 200%, respectively.
New sixteen heat shock proteins (Hsps) and ten ethanol shock proteins were appeared on the analysis with SDS-PAGE when cultivation temperature for the Vibrio vulnifrcus ATCC 27562 strain was shifted-up to $42^{\circ}C$ from $30^{\circ}C$ for 20 mins and treated with of 6% ethanol for 10 mins, respectively. Even the induction of thermotolerance in V. vulnificus was coincided with the induction of Hsps if the pre-shock was adjusted to thermal temperature. Outer membrane proteins (OMPs) that were purified from the membrane of cells after heat shock showed more immunodominant pattern to the immunized rabbit anti-V. vulnificus O serum in enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). On the western immunoblot analysis it was confirmed that both 62 kDa IMP and 69 kDa OMP in the Hsps and 48 kDa IMP a major OMP in the ethanol shock proteins were reacted with rabbit anti-V. vulnificus O sera. Agglutination titer of the heat shocked V. vulnificus with rabbit anti-V. vulnificus O serum was higher than that of the untreated bacteria.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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