Plant regeneration system from leaf and root segments of Lycoris chejuensis via bulblet formation was established. Surface-sterilized leaf and root segments were cultured on the B5 medium containing 2,4-D. After 12 weeks of culture onto B5 medium containing 2,4-D, white globular structures and white calluses were formed on the cut surface of the explants. The highest frequency of globular structures and calluses formation from leaf explants was 32.1% when leaf explants were cultured onto B5 medium supplemented with 1 mg/L of 2,4-D. However, the higher concentration of 2,4-D (over than 3 mg/L) resulted in decrease of the frequency. In comparison to leaf explants, root segments showed the highest frequency at a rate of 36.1% when root explants were cultured onto B5 medium supplemented with 3 mg/L of 2,4-D. These structures and calluses were sub-cultured and proliferated onto the same culture medium. Upon transfer to B5 basal medium, white globular structures were developed into bulblets and normal plantlets. After 4 weeks of incubation in the light, plantlets were successfully rooted over the frequency of approximately 90%. Rooted plantlets were successfully transferred to potting soil and acclimatized in the growth chamber. The plant regeneration system of Lycoris chejuensis established in this study, might be applied to mass proliferation, conservation of genetic resources and genetic transformation for molecular breeding.
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.28
no.3
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pp.171-176
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2008
Efficient plant regeneration system of birdsfoot trefoil (Lotus corniculatus L.) was development. The factors affecting the somatic embryo formation, its proliferation and regeneration capacity of leaf and stem explants of Empire cultivar was investigated. The highest number of somatic embryos was obtained on B5 medium supplemented with 1 mg/L NAA and 1 mg/L BA. Depending on different explants, highest frequency of embryogenic callus and regeneration were observed in Empire with leaf explants. The response from stem explants was slower and callus induction was less than that from leaf explants. Regenerated shoots formed complete plantlets in on 1/2 MS medium supplemented with 1 mg/L IBA. Regenerated plants were morphologically uniform with normal shape and growth pattern.
Kim, Hwa Young;Kang, Sun Pil;Hong, Sae Jin;Eum, Hyang Lan
Journal of Bio-Environment Control
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v.24
no.3
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pp.167-172
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2015
The aim of this study was to develop an effective production system of blueberry plants by using tissue culture technique. Murashige and skoog medium (MS) and woody plant medium (WPM) were compared for shoot formation of highbush blueberries. Also medium supplemented with zeatin/2-isopentenyl adenine (2iP)/benzyl aminopurine (BA) (1, 2/10, 15/4, $6mg{\cdot}L^{-1}$)and zeatin/2iP/BA (0.5/10, 15/$0.05mg{\cdot}L^{-1}$) as plant growth regulators to determine the effect of shoot formation and shoot proliferation, respectively. The shoot explants cultured on WPM showed higher shoot formation rates, more number of nodes, and longer root length than those on MS medium during the primary culture. Shoots were not formed when the explants were cultured on the medium without plant growth regulators or on only BA. The shoot explants cultured on the medium supplemented with 2iP showed low rates of shoot formation. On the other hand, zeatin was the most effective for shoot formation and growth of the explants. Also influence of different cytokinins (zeatin, 2iP) on the shoot proliferation of subcultured shoot explants was studied. There was no significant difference among the different concentrations of zeatin in the rate of shoot formation and number of shoots. However at higher concentration of zeatin, number of nodes was increased, and shoot length was shorted. The proper concentrations of zeatin for shoot propagation in subculture were found to be $0.5mg{\cdot}L^{-1}$ and $1mg{\cdot}L^{-1}$.
Kim, Man Bae;Park, Chun Geun;Yi, Sookyi;Han, Bong Hee
Korean Journal of Plant Resources
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v.27
no.5
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pp.540-545
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2014
The Polygonatum odoratum cv. Gungangbeaksea, bred in Gyeongsangnam-Do Agricutural Research & Extension Service, was cultured in vitro for micropropagate rapidly through the culture of rhizome explants ($5{\times}5mm$). The $7{\times}7mm$ explants of adventitious multi-bud clusters (AMC), obtained through the culture of rhizome explants (MS + 3.0 mg/L BA) were cultured on MS media with BA and TDZ. The shoot multiplication was favorable on the MS medium containing 3.0 mg/L TDZ with 2.8 in shoot number. But the formation of AMC was low in all media tested. The explants of AMC were cultured on MS media containing 1.0~5.0 mg/L TDZ and NAA to multiplicate AMC more. The formation of AMC was a little more stimulated on combined MS media of TDZ and NAA, than that with TDZ alone. The multiplication of shoots and AMC was favorable on MS media with 3.0 mg/L TDZ and 5.0 mg/L NAA, and 5.0 mg/L TDZ and 3.0 mg/L NAA. As the concentration of MS salts increased, the formation of AMC was decreased. But the formation of AMC was more stimulated, as the concentration of sucrose increased to 7%. Therefore, the multiplication of shoots and AMC was suitable on media containing 3.0~5.0 mg/L TDZ and NAA, and 7% of sucrose. The explants of AMC were rooted on media with 3.0 mg/L IBA, or 2.0 mg/L NAA with more than 80% in rooting ratio. The plantlets were treated at $5^{\circ}C$ for 8 weeks, and cultured ex vitro for 8 weeks. The survival ratio of plantlets were 100% in vermiculite, and the mixed soil with perlite 1 volumn and vermiculite 1 volumn.
To investigate optimal conditions for plant regeneration in Platycodon grandiflorum (Jacq. A. DC.).Both leaf and hypocotyl explants were cultured on Murashige& Skoog's (MS) medium supplemented with combinations of 0.1, 0.5, 1.0, or 2.0 mg/L cytokinins (BA and kinetin) and 1.0 mg/L 2,4-D for 6 weeks, respectively. According to the type of explant, the total shoot organogenesis (56.38%) in leaf explants was higher than in hypocotyls (28.20%). In comparison with kinetin and BA for the plant regeneration, the frequency (70.38%) of leaf explants was higher in combination with kinetin and 2,4-D than of BA with 2,4-D (42.38%), whereas the frequency (35.56%) of hypocotyls explants was higher in BA combination than kinetin combination (20.83%). Thehighest frequency (94.20%) was observed from the cultures of leaf explants on the MS medium supplemented with 1.0 mg/L kinetin and 1.0 mg/L 2,4-D. Upon transfer onto 1/2 MS basal medium containing 3% sucrose, shoots developed into plantlets with roots, and were well grown in soil in the greenhouse. These results lead us to speculate that the optimization of culture conditions was responsible for the mass propagation from in vitro cultures of Platycodon grandiflorum (Jacq. A. DC.).
Kim, Mi Young;Cho, Kang Hee;Chun, Jae An;Park, Seo Jun;Kim, Se Hee;Lee, Han Chan
Journal of Plant Biotechnology
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v.44
no.4
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pp.401-408
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2017
Herein, we report the meristem-tip culture from dormant buds of grape 'Kyoho' single-infected with Grapevine fleck virus (GFkV), which is phloem-limited and transmitted by graft inoculation. We produced GFkV-free shoots without thermo- or chemotherapy using meristem-tip explants approximately 0.3 mm (73 explants) and 0.8 mm long (five explants) including shoot apical meristem, 2-5 leaf primordia, and 1-4 uncommitted primordia from dormant buds of the infected woody cuttings (stored at $4^{\circ}C$). Explants were cultured on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 3% sucrose, 3.0 mg/L benzyladenine (BA) and 0.1 mg/L indole-3-butyric acid (IBA). After 16 weeks of culture, shoot (10-mm long) regeneration frequency achieved from 0.3-mm explants was 4.1% and that obtained from 0.8-mm explants was 40.0%. Virus-free efficiency (expressed as the percentage of RT-PCR negative shoots regenerated) from 0.3- and 0.8-mm explants was 100% and 50%, respectively. Following in vitro multiplication, RT-PCR assays revealed identical results to assays of the first regenerated shoots. Our new methodological approach could be applied for eliminating other viruses in grapevines, as well as for producing virus-free plants in many other deciduous tree species, including fruit trees.
An efficient method of shoot regeneration of peanut is described. In vitro shoot organogenesis from the callus of cotyledon explants of Arachis hypogaea L. was stimulated by addition of Adenine sulphate (Ads) along with 6 - benzylaminopurine (BAP) and - napthalene acetic acid (NAA). Ads (13 ${\mu}{\textrm}{m}$) had a stimulatory effect on shoot bud differentiation when combined with BAP (13 ${\mu}{\textrm}{m}$) and NAA (2 ${\mu}{\textrm}{m}$). Shoot organogenesis was markedly higher (92%) from callus induced on Ads, BAP and NAA combined media than from those formed by the individual supplementation of Ads or BAP with NAA. The shoots elongated on the media with GA$_3$ (1 ${\mu}{\textrm}{m}$). Elongated plantlets rooted with MS media containing IBA (9 ${\mu}{\textrm}{m}$).
An Efficient in vitro regeneration system and an optimized Agrobacterium mediated transformation protocol are described, based on the use of young seedling cotyledons of Capsicum annuum L. Optimal regeneration efficiency can be obtained by cultivating cotyledon explants on media containing 4 mg/L benzyladenine and 0.1 mg/L indolacetic acid. The effect of antibiotics used to eliminate Agrobacteria, as well as the toxic level of some generally used selection agents (kanamycin, geneticin, hygromycin, phosphinotricin and methotrexate) in regenerating pepper tissues were determined. To enable the comparison of different selection markers in identical vector background, a set of binary vectors containing the marker genes for NPTII, HPT, DHFR and BAR respectively, as well as the CaMV 35S promoter/enhancer-GUS chimaeric gene was constructed and introduced into four different Agrobacterium host strains.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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