오동나무잎, 열매, 내수피, 외수피 그리고 목질부를 채취하여 건조시킨 후 분말로 제조하여 각 시료 약 5.0 kg을 아세톤-물(7:3. v/v) 혼합용액으로 추출하고 유기용매를 제거한 후 헥산, 메틸렌클로라이드, 에틸아세테이트 및 물 등 네 개의 분획으로 분리하였다. 오동나무 각 부위별 추출물 수율은 내수피(11.35%)가 가장 높았고 잎(7.87%), 열매(6.94%), 외수피(4.24%)의 순 이었으며 목질부가 4.10%로 가장 낮게 나타났다. 오동나무 각 부위별 조추출물, 고형분과 분획물을 가지고 DPPH radical 소거법을 이용하여 기초적인 항산화 실험을 실시하였다. 기준물질로는 천연 항산화제인 ${\alpha}$-tocopherol과 합성항산화제인 BHT를 사용하여 항산화효능을 비교하였다. 그 중에서는 모든 EtOAc용성 분획이 기준물질 보다 더 우수한 항산화 활성을 나타내었다.
옻나무 목질부를 열수 추출하고, 얻어진 추출물을 $CHCl_3$, EtOAc, H-BuOH 및 $H_2O$로 용매 분획하였다. 이중 EtOAc와 n-BuOH분획으로부터 silica gel, ODS 및 Sephadex LH-20 column chromatography로 정제하여 4개의 화합물을 분리하였다. 각 화합물의 화학구조는 NMR 스펙트럼 데이터를 해석하여, sinapyl aldehyde (1), 2,4-dihydroxybenzaldehyde (2), 2,4-dihydroxybenzoic acid (3) 및 2,4-dihydroxyphenyl-glyoxylic acid (4)으로 동정하였다. 이 화합물들 중 2-4은 옻나무목질부에서 처음 분리된 화합물이다. 이들 화합물 중 sinapyl aldehyde (1)와 2,4-dihydroxyphenylglyoxylic acid (4)의 DPPH radical 소거작용이 $34.7{\pm}0.6%$와 $43.8{\pm}0.9%$로 나타나 합성항산화제인 $BHT(14.4{\pm}0.3%)$보다 높게 나타났다.
Kohlrabi 새싹을 100% MeOH을 이용하여 추출하였고, 그 추출물을 EtOAc, n-BuOH 및 $H_2O$을 이용하여 분획을 나누고 감압농축 하였다. EtOAc에 대한 silica gel과 ODS column chromatography를 반복 수행하여 3개의 sterol 화합물을 분리하였다. 분리한 물질의 물리적, 화학적, 및 NMR, MS, IR과 같은 분광학적 데이터를 측정하였고, 그것을 해석하여 sterol 화합물인 ${\beta}$-sitosterol(1), brassicasterol(2) 및 7-ketobrassicasterol (3)로 구조동정 하였다. 화합물 1은 대부분 식물에서 발견되는 물질이다. 화합물 2는 배추과 식물에서 발견되는 물질이며, 화합물 3은 식물에서 드물게 발견되는 물질이다.
This study was focused on the evaluation of radical scavenging effect and the protective activity against oxidative stress of the extract and fractions from Petasites japonicus. P. japonicus was extracted with methanol and then fractionated into 4 fractions [n-butanol, ethyl acetate (EtOAc), methylene chloride, and n-hexane]. The extract and fractions showed strong 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical scavenging activity. Among all the fractions, particularly, the EtOAc fraction showed the strongest effect with the $IC_{50}$ value of $0.02{\mu}g/ml$. In addition, the fractions also showed strong hydroxyl radical scavenging activity and nitric oxide scavenging activity as well. Furthermore, cell viability generated by the P. japonicus extract and 4 fractions were examined under C6 glial cellular model. The C6 glial cells showed high generation of reactive oxygen species (ROS) and decrease in cell viability by the treatment generator of hydrogen peroxide. However, the production of ROS formation was decreased by the treatment of the fractions of P. japonicus and also founded that the EtOAc fraction led to significant increase in the cell viability at concentration $100{\mu}g/ml$. Results from this work indicated that P. japonicus showed protective effects against oxidative stress and its EtOAc fraction may be served as a useful natural antioxidant.
능소화를 80% MeOH 용액으로 추출하고, 추출물을 EtOAc, n-BuOH 및 물로 분배, 추출하였다. 이 중 EtOAc 분획을 silica gel 및 octadecylsilica gel(ODS) column chromatography로 정제하여 4종의 화합물을 분리하였다. 각 화합물의 화학구조는 NMR, MS 및 IR 등의 스펙트럼 데이터를 해석하여, linoleic acid의 methyl ester, linolenic acid의 methyl ester, ${\beta}-sitosterol$ 및 daucosterol로 동정하였다. Daucosterol은 $14{\pm}0.04\;{\mu}M$의 $IC_{50}$ 값으로 FPTase의 활성을 저해하였다.
개망초의 꽃을 80% MeOH 용액으로 추출하고, 추출물을 EtOAc, n-BuOH 및 물로 분배, 추출하였다. 이 중 EtOAc 분획을 silica gel, octadecylsilica gel(ODS) column chromatography 및 high performance liquid chromatography(HPLC)로 정제하여 3종의 화합물을 분리하였다. 각 화합물의 화학구조는 NMR, MS 및 IR 등의 스펙트럼 데이터를 해석하여, ${\alpha}-amyrenone(1),\;{\alpha}-amyrin(2)$ 및 ${\beta}-amyrin(3)$으로 동정하였다. 이들 3종의 triterpenoid는 개망초에서는 처음 분리되었다.
In this study, we investigate anti-allergic and anti-inflammatory effects of Leonurus sibiricus seed (LSS) extract in basophilic leukemia RBL-2H3 cells. To identify anti-allergic actions of LSS, the degranulation was evaluated in IgE and DNP-BSA stimulated RBL-2H3 cells. At the concentration of $100{\mu}g/ml$ of methanol (MeOH) extract and Methylene chloride (MC) and Ethyl acetate (EtOAc) fractions, the degranulation was significantly inhibited 16.7%, 16.7% and 27.9% respectively. And then, to assess anti-inflammatory effects of LSS, IL-4 and IL-13 mRNA level were detected in PMA/ionomycin (PI)-induced RBL-2H3 cells and cell proliferation and IL-4 mRNA level in isolated splenocytes from Balb/c mice. LSS MeOH extract and MC and EtOAc fractions significantly decreased the level of IL-4 and IL-13 mRNA in PI-induced RBL-2H3 cells and showed inhibitory effects on cell proliferation and expression of IL-4 mRNA level in mouse splenocytes. Taken together, these results suggest that LSS has potential anti-allergic and anti-inflammatory effects and EtOAc fraction is the most effective in regulating immune responses.
신선한 산양삼 잎을 EtOH로 침지 추출하여 얻어진 추출물을 n-hexane, EtOAc, n-BuOH 로 용매 분획하였다. 이중 pancreatic lipase 저해활성이 상대적으로 높은 EtOAc 분획에 대해 silica 및 $C_{18}$ column chromatography를 이용하여 3개의 flavonoid 화합물을 분리하였다. 각 화합물의 화학구조는 NMR 스펙트럼 데이터 해석 및 표품과의 HPLC 직접 비교를 통하여 kaempferol-3-O-sophoroside (I), astragalin (II), kaempferol (III)로 동정하였다. 이들 화합물중 kaempferol (III)는 $IC_{50}$ 값이 $9.1{\pm}1.5$ mM로 가장 강한 효능을 나타내었으며, 다음으로 C-3 번 위치에 1개의 glucose가 결합한 astragalin (II)의 $IC_{50}$ 값이 $17.4{\pm}2.7$${\mu}M$, C-3 번 위치에 2개의 glucose가 결합한 kaempferol-3-O-sophoroside (I)의 $IC_{50}$ 값이 $20.3{\pm}2.2$${\mu}M$의 저해능을 나타내었다. 산양삼 잎의 EtOAc 가용부에에 존재하는 flavonoid계 pancreatic lipase 저해활성 물질을 동정하였으며, 이들 활성은 kaempferol 타입의 화합물은 C-3위치에 당 결합에 의한 hydrophobicity와 관련됨을 시사하였다. 향후 이들 활성물질의 활성 기작에 대한 연구가 필요하며 본 연구결과는 보다 우수한 pancreatic lipase 저해능을 가지는 새로운 선도화합물 발굴을 위한 기초자료로 이용될 수 있을 뿐만 아니라 산양삼잎의 식물 화학적 성분에 대한 기초자료로 이용될 수 있을 것으로 사료된다.
잡곡은 대사성 질환의 예방과 치료에 우수한 기능성 식품소재로 인식되고 있다. 국내산 잡곡들(기장, 황금찰수수, 노랑차조, 율무 및 식용피)을 대상으로 항염증 활성을 비교조사하고자, 이들 잡곡의 80% 에탄올 추출물을 이용하여 마우스 대식세포주 RAW264.7을 지질다당류(LPS)로 자극할 때 생성되는 염증 매개인자인 산화질소(NO)의 생성에 미치는 저해능을 조사하였다. 그 결과, 식용피(Echinochloa crus-galli var. frumentacea) 유래의 에탄올 추출물이 LPS에 의해 유도되는 NO의 생성을 저해하는 항염증 활성에 있어서 가장 우수함을 확인하였다. 식용피의 에탄올 추출물로부터 항염증 관련 성분을 규명하기 위해, 80%에탄올 추출물을 물에 녹인 후 n-hexane, methylene chloride (MC), ethyl acetate (EtOAc), n-butanol (BuOH)과 물 분획들로 단계별 분획하고, 각 분획의 항염증 활성을 조사하였다. RAW264.7 세포에 MC 분획($100{\mu}g/ml$)을 전처리하였을 때, LPS처리에 의해 유도되는 iNOS, COX-2, 그리고 친염증성 사이토카인들(IL-$1{\beta}$, IL-6, 및 TNF-${\alpha}$)의 발현이 현저하게 저해되는 것으로 나타났다. 또한, LPS처리에 의해 유도되는 p38MAPK, JNK 및 ERK의 활성화의 경우도 MC 분획에 의해 농도-의존적으로 저해되는 것으로 나타났다. HPLC분석을 통해, 식용피 유래 MC 분획의 항염증 활성은 식용피의 MC 분획 속의 주요성분인 kaempferol과 biochanin A에 기인함을 확인하였다. 이상의 연구 결과는 식용피 및 식용피의 MC 분획이 염증성 질환과 이와 관련된 대사성 질환의 예방과 예후개선에 유리한 기능성 식품소재 개발에 활용될 수 있음을 시사한다
산뽕나무의 생리활성 기능을 탐색하기 위하여 메탄올, 에탄올, 클로로포름, 80% 메탄올, 80% 에탄올 및 추출물을 조제하였고, 산뽕나무 뿌리의 80% 에탄올 추출물로부터 n-Hexane, $CHCl_3$, EtOAc. n-BuOH 및 water 분획물을 제조하였다. 얻어진 추출물과 분획물에 대하여 DPPH 자유라디칼 소거법에 의한 항산화성 효과와 UVB 및 UVA 영역에서의 자외선 흡수 효과를 검토하였다. 산뽕나무 추출물의 수소전자공여능$(IC_{50})$을 측정한 결과 추출물에서는 80% 메탄올 줄기 추출물, 80% 열매 추출물, 80% 뿌리 추출물, 80% 메탄올 및 추출물에서 높은 항산화 활성을 나타내었다. 자외선 차단효과에서는 80% 에탄올 뿌리 추출물 및 80% 메탄올 추출물에서 매우 높은 자외선 흡수력이 높게 측정되었다. 항산화 효과 및 자외선 차단효능이 탁월한 산뽕나무 뿌리의 80% 에탄올 추출물을 대상으로 용매 분획물을 제조하였다. 에틸아세테이트 분획물$(IC_{50}\;:\;15.0\;{\mu}g/ml)$이 가장 우수한 항산화 효과를 나타내었으며, 자외선 차단효과에서도 에틸아세테이트 분획물(E%cm: 223.4)이 자외선 B영역에서 매우 높은 흡수력을 나타내었다. 현재 산뽕나무 부리의 에틸아세테이트 분획물을 대상으로 활성물질의 분리 및 구조규명에 관한 연구를 진행중에 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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