• 한국미생물·생명공학회지
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• 제14권2호
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• pp.155-160
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• 1986

E. coli-Yeast shuttle vector YEp 13에 B. amyloliquefaciens의 $\alpha$-amylase gene을 cloning하여 얻은 hybrid plasnidlasmid를 E. coli를 숙주세포로 하여 형질을 발현시켰다. 형질전환주의 $\alpha$-amylase 활성 측정 결과, B. amyloliquefaciens에 대해 20-30%의 상대 활성도를 나타내었다. 형질전환주의 경우 생성된 $\alpha$-amylase의 60-65%가 periplasm에 축적되었으며 세포 외부로의 분비는 없었다. Hybrid DNA를 agarose-gel 전기영동으로 조사한 결과 그 크기가 다른 다수의 hybrid DNA가 확인되었으며 pHA28의 plasmid (a)(Fig.3)에서만 $\alpha$-amylase 활성을 나타내는 것으로 밝혀졌다 pHA28의 plasmid(a)의 크기가 YEp 13 plasmid DNA보다 작은 것은 YEp13 plasmid에서 yeast gene부분이 deletion된 결과로 추측되었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제50권3호
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• pp.328-336
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• 2022

Aptamers are short, chemically synthesized, single-stranded DNA or RNA oligonucleotides that fold into unique three-dimensional structures. In this study, we aim to determine the antibiofilm activity and binding specificity of the six polyclonal DNA aptamers (S15K3, S15K4, S15K6, S15K13, S15K15, and S15K20) on Staphylococcus aureus BPA-12 and Escherichia coli EPEC 4. Aptamer S15K6 showed the highest percentage of antibiofilm activity against S. aureus BPA-12 (37.4%) as shown by the lowest OD570 value of 0.313. Aptamer S15K20 showed the highest percentage of antibiofilm activity against E. coli EPEC 4 (15.4%) as shown by the lowest OD570 value of 0.515. Aptamers S15K13 and S15K20 showed antibiofilm activities against both S. aureus BPA-12 and E. coli EPEC4, and thus potentially have broad reactivity. Furthermore, based on the binding capacity and Kd values from our previous study, the binding specificity assay of selected polyclonal DNA aptamers (S15K3 and S15K15) against S. aureus BPA-12, E. coli EPEC 4, S. aureus BPA-6, S. agalactiae, E. coli MHA-6, and Listeria monocytogenes were performed using qPCR. Aptamers S15K3 and S15K15 showed specific binding to S. aureus BPA-12, E. coli EPEC 4, S. aureus BPA-6, and S. agalactiae, but could not bind to E. coli MHA-6 and L. monocytogenes. Therefore, this study showed that the polyclonal DNA aptamers have antibiofilm activity and were able to bind to S. aureus BPA-12 and E. coli EPEC 4 bacteria.

• 한국식품영양과학회지
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• 제37권7호
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• pp.834-840
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• 2008

호박 종실의 이용성을 증대시키기 위하여 호박 종실을 발아시켜 가면서 성장 중 고미성분의 성분분석을 행하고 고미물질을 순수 분리하여 정제하고 구조분석을 행하였다. 정제된 고미물질의 항염증 활성 및 폐암세포에 대한 암세포 성장 억제 활성을 측정한 결과는 다음과 같다. 호박 종실을 발아 시키면 종실에는 존재하지 않던 고미물질이 발아에 의하여 생성되므로 이 물질을 silica gel TLC, HPLC에 의하여 순수 분리한 결과 Rf 0.73, RT 10.3의 것을 모아 LC-MS/MS로 구조 분석을 행하여 분자량 557인 Cucurbitacin E(Cu E)로 확인되었다. 물 살포주기, 광, 온도를 달리하면서 발아시킨 호박씨의 고미성분인 Cu E 함량은 48시간 주기로 물을 살포하면서 $20^{\circ}C$, 암소에서 4일간 발아시켰을 때 224.7 mg/kg로서 최고치에 달하였다. 분리 정제한 Cu E는 in vitro에서 Cu E가 비교적 낮은 농도($1{\sim}100\;nM$)에서 1L-$1{\beta}$에 의한 염증성 COX-2 단백질 발현을 크게 감소시켰고, 비교적 높은 농도($1{\sim}5\;{\mu}M$)에서는 PMA에 의한 COX-2 단백질 발현 억제를 통한 항염증 활성을 보여주었다. 그리고 Cu E에 의한 A549 암세포의 증식 및 생존율에 미치는 영향을 확인한 결과 100 또는 1000 nM Cu E를 24 및 48시간 처리 시 약 $20{\sim}28%$ 및 $56{\sim}58%$의 A549 세포증식 억제 효과가 나타났고, 100 nM Cu E를 24시간 및 48시간 처리 시 약 60% 및 88%의 A549 세포생존율이 감소하였다.

• 한국식품조리과학회지
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• 제13권2호
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• pp.106-112
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• 1997

향신료인 allspice(Pimenta dioica L.)를 액체배지에 첨가하여 2종류의 식중독세균(Escherichia coli 0157:H7과 Staphylococcus aureus 196E)의 증식과 저온저장중 생존에 미치는 항균효과를 조사하였다 저농도(0~2%, w/v)의 allspice를 함유한 tryptic soy broth(TSB)에 E. coli와 S. aureus를 $10^{5}$~$10^{6}$ cells/$m\ell$가 되게 접종하여 35$^{\circ}C$에서의 증식과 냉장(5$^{\circ}C$)및 냉동(-2$0^{\circ}C$)저장중 생존억제효과를 생균수의 변화로서 조사하였다. 35$^{\circ}C$에서의 E. coli 증식은 1%이내의 향신료 농도에서는 증식이 저해되지 않았으나, 2%의 allspice 존재하에서는 긴 유도기를 거친 후에 증식이 시작되었다. 35$^{\circ}C$에서의 S. aureus의 증식은 0.1%와 0.3%의 allspice 존재하에서는 긴 유도기를 거친 후에 증식이 시작되었으나 0.5~2%에서는 세균의 증식이 억제되어 사멸하였다. 5$^{\circ}C$에서 냉장한 경우에는 E. coli와 S aureus 모두 0.3%의 allspice에 의해 생존이 크게 억제되었으며 0.5%이상의 농도에서는 저장말기에 사멸하였다. -2$0^{\circ}C$에 동결저장하였을 때 E. coli는 저장기간이 길어질수록, 첨가한 향신료의 농도가 높을수록 생존 억제효과가 증대되었다. 동결저장중 S. aureus의 생균수는 저장초기에 급격히 감소한 후 거의 일정수준을 유지하였으며 첨가한 향신료의 농도에 따른 생균수의 차이는 나타나지 않았다. 동결저장에서 0.1%의 향신료를 첨가했을 때 E. coli와 S. aureus는 대조구의 생균수에 비해 1/100이하로 생균수가 감소하여 allspice는 우수한 항균효과를 나타내었다.다.

• Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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• 제34권2호
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• pp.135-140
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• 2008

Loss of E-cadherin (E-cad) expression has been found in multiple cancers and is postulated to facilitate tumor cell dissociation and metastais. Promotor methylation may provides an alternative pathway for loss of gene function. This study evaluated the role of hypermethylation in the down-regulation of E-cad in oral squamous cell carcinoma (OSCC). We examined the E-cad expression by immunohistochemical staining and detected methylation status by methylation-specific polymerase chain reaction (MSP) in 20 OSCC tissues. Overally, 12 (60%) cases of hypermethylation of E-cad were detected and we found there were no correlation between methylation and age, histologic grade, lympn node metastasis, tumor size and clinical stage. However, Eleven (73.3%) of 15 samples which was negative for E-cad staining showed hypermethylation of E-cad promotor region. On the other hand, only one (20%) of 5 E-cad positive sample was observed with methylated status. The underexpression of E-cad was found to be related to promotor hypermethylation (p=0.035). In conclusion, we suggest that hypermethylation play a role in inactivation of E-cad gene and may be a appreciable biomarker for diagnosis and treatment of OSCC.

• Molecules and Cells
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• 제20권3호
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• pp.378-384
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• 2005

Estrogen metabolites are carcinogenic. The comparative mitogenic activities of $17{\beta}$-estradiol (E2) and four metabolites, 2-hydroxyestradiol (2-OHE2), 4-hydroxyestradiol (4-OHE2), $16{\alpha}$-hydroxyestrone ($16{\alpha}$-OHE1) and 2-methoxyestradiol (2-ME), were determined in estrogen receptor(ER)-positive MCF-7 human breast cancer cells. Each of the E2 metabolites caused proliferation of the MCF-7 cells, but only E2 and $16{\alpha}$-OHE1 induced a greater than 20-fold increases in transcripts of the progesterone receptor (PR) gene, a classical ER-mediated gene. This suggests that the mitogenic action of E2 and $16{\alpha}$-OHE1 could result from their effects on gene expression via the ER. E2 metabolites altered the expression of E2-regulated proteins including heat shock proteins (Hsps). $16{\alpha}$-OHE1 and 2-ME as well as E2 increased levels of Hsp56, Hsp60, $Hsp90{\alpha}$ and Hsp110 transcripts, and the patterns of these inductions resembled that of PR. Hsp56 and Hsp60 protein levels were increased by all the E2 metabolites. Levels of the transcripts of 3 E2-upregulated proteins (XTP3-transactivated protein A, protein disulfide isomerase-associated 4 protein and stathmin 1) and an E2-downregulated protein (aminoacylase 1) were also affected by the E2 metabolites. These results suggest that the altered expression of Hsps (especially Hsp56 and Hsp60) by E2 metabolites such as E2, $16{\alpha}$-OHE1 and 2-ME could be closely linked to their mitogenic action.

• 디자인학연구
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• 제19권2호
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• pp.53-62
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• 2006

빠른 '통신수단 '정도로만 여겨왔던 이메일이 온라인 마케팅의 핵심으로 떠오르고 있다. 이로 인해 기업들은 고객과의 Communication을 통해 지속적인 고객관리를 해야 하는 시점에서 이메일 마케팅은 강력한 의사교환 수단이며 고객의 성향과 구매습관, 취향 등을 분석하여 개인화된 일대일(One To One) 마케팅1)을 가능케 해준다. 정확한 타겟팅이 무엇보다 중요한 패션 산업에 있어서 일대일 마케팅 도구로서 또는 고객과의 커뮤니케이션 할 수 있는 가장 효과적인 방법으로서 이메일 마케팅은 매우 중요한 전략중 하나이다. 이에 본 연구에서는 일대일(One To One) 마케팅 도구로 부각되고 있는 이메일을 대상으로 인터넷 패션쇼핑몰에서 2005년 6월 12일부터 7월 30일까지 발송한 이메일을 대상으로 실제 사례분석을 통해 이메일 발송 후 매출 신장 효과를 살펴보고 이메일 반응에 미치는 영향을 오픈율을 기준으로 세부 반응을 분석하였다. 연령대별, 성별 오픈율은 20대 후반 여성이 평균 21.66%로 가장 높게 나타났고, 평균 3.5%의 매출 신장 효과가 있었다. 매출 현황에서도 20대 후반의 매출액이 28.10%로 가장 높게 나타나 오픈율이 많은 그룹에서 매출도 많이 일어나는 것을 알 수 있었다. 이메일 제목에 따른 반응은 [케주얼] 이라는 상품 카테고리를 표시한 이메일 제목이 가장 높게 나타났고, 요일에 따른 반응은 화요일 발송 메일이 가장 높게 나타났다. 정기 메일과 섹션 메일의 연관성은 섹션 메일에서 오픈율이 더 높게 나타났고, 시간대별 오픈율은 14시(오후2시)에 20대 후반 여성에게 발송한 메일의 오픈율이 20.93%로 가장 높게 나타났다. 실용적 정보와 흥미로운 요소들로 수신자들의 관심을 끌어 사이트의 방문을 유도하는 형태로 가는 것이 바람직하다고 볼 수 있다. 결론적으로, 이메일 발송이 매출 신장에 효과적인 수단임을 알 수 있었다. 또한, 효과를 더욱 높이기 위해서는 기존 메일 발송 결과를 분석한 데이터를 차기 메일 발송에 꾸준히 적용함으로써 성공적인 이메일 마케팅 결과를 얻을 수 있을 것으로 기대된다.

• 한국수산과학회지
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• 제40권3호
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• pp.153-159
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• 2007

We studied oocyte steroidogenesis in relation to oocyte development in the greenling, Hexagrammos otakii, a marine multiple spawner. Vitellogenic and mature oocytes were incubated in vitro in the presence or absence of $[^3H]-17\;{\alpha}-hydroxyprogesterone$ as a precursor. The major metabolites were androgens [androstenedione $(A)_4)$ and testosterone (T)] and estrogens [$17\;{\beta}-estradiol\;(E_2)$ and estrone ($E_1$)] in vitellogenic oocytes. The metabolic rate of T was lower in 1.08 to 12-mm oocytes, while that of $E_2$ increased with oocyte size. The endogenous productions of T, $E_2$ and 17 ${\alpha}-hydroxy$, 20 ${\beta}-dihydroprogesterone\;(17{\alpha}20{\beta}OHP)$ were quantified using a radioimmunoassay in the non-precursor group. The endogenous levels of T and $E_2$ were highest in 1.08 to 12-mm oocytes and $17{\alpha}20{\beta}OHP$ was produced only in 1.90 to 95-mm oocytes. The relationship between oocyte size and steroidogenesis showed that 1.08 to 12-mm oocytes are full vitellogenic following induction of the maturation process. Moreover, $17{\alpha}20{\beta}OHP$ acts as a maturation inducing hormone in H. otakii.

• Genomics & Informatics
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• 제8권1호
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• pp.50-57
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• 2010

Mercuric chloride, a model nephrotoxicant was used to elucidate time- and dose- dependent global gene expression changes associated with proximal tubular toxicity. Rat kidney cell lines NRK-52E cells were exposed for 2, 6 and 12 hours and with 3 different doses of mercuric chloride. Cell viability assay showed that mercuric chloride had toxic effects on NRK-52E cells causing 20% cell death (IC20) at $40{\mu}M$ concentration. We set this IC20 as high dose concentration and 1/5 and 1/25 concentration of LC20 were used as mid and low concentration, respectively. Analyses of microarray data revealed that 738 genes were differentially expressed (more than two-fold change and p<0.05) by low concentration of mercuric chloride at least one time point in NRK-52E cells. 317 and 2,499 genes were differentially expressed at mid and high concentration of mercuric chloride, respectively. These deregulated genes showed a primary involvement with protein trafficking (CAV2, CANX, CORO1B), detoxification (GSTs) and immunity and defense (HMOX1, NQO1). Several of these genes were previously reported to be up-regulated in proximal tubule cells treated with nephrotoxicants and might be aid in promoting the predictive biomarkers for nephrotoxicity.

• Restorative Dentistry and Endodontics
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• 제28권5호
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• pp.363-368
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• 2003

The purpose of this study is to evaluate the effect of additional enamel etching with phosphoric acid on the microleakage of the adhesion of self-etching primer system. Class V cavity($4mm{\times}3mm{\times}1.5mm$) preparations with all margins in enamel were prepared on buccal surface of 42 extracted human upper central incisor teeth. Prepared teeth were randomly divided into 3 groups. Group 1：no additional pretreatment with 37% phosphoric acid (NE). Group 2：additional pretreatment with 37% phosphoric acid for 10 seconds (E10s). Group 3：additional pretreatment with 37% phosphoric acid for 20 seconds (E20s). The adhesives(Clearfil SE $Bond^{\circledR}$, Kuraray, Osaka, Japan) and composite resins(Clearfil $AP-X^{\circledR}$, Osaka, Kuraray, Japan) were applied following the manufacturer's instructions. All the specimens were finished with the polishing disc(3M dental product, St Paul, MN, USA), thermocycled for 500 cycles between $5^{\circ}C$ and $55^{\circ}C$ and resected apical 3-mm root. 0.028 stainless steel wire was inserted apically into the pulp chamber of each tooth and sealed into position with sticky wax. Surrounding tooth surface was covered with a nail varnish 2 times except areas 1mm far from all the margins. After drying for one day, soaked the samples in the distilled water. Microleakage was assessed by electrochemical method(System 6514, $Electrometer^{\circledR}$), Keithley, USA) in the distilled water. In this study, the microleakage was the lowest in group 1 (NE) and the highest in group 3(E20s)(NE