• 제목/요약/키워드: Drosophila S2 Cells

검색결과 37건 처리시간 0.026초

Expression of Enhanced Green Fluorescent Protein from Stably Transformed Drosophila melanogaster S2 Cells

  • Lee, Jong-Min;Park, Jong-Hwa;Chung, In-Sik
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
    • /
    • 제10권1호
    • /
    • pp.115-118
    • /
    • 2000
  • Recombinant plasmids harboring a heterologous gene coding for the enhanced green fluorescent protein (EGFP) were transfected and expressed in Drosophila melanogaster S2 cells. A stable transformation of polyclonal cell populations expressing EGFP were isolated after 4 weeks of selection with hygromycin B. The recombinant EFGP expressed in transformed S2 cells consisted of a molecular weight of 27 kDa. EGFP expression was also confirmed by fluorometric measurement. The maximum EGFP concentration was about 9.3 mg/I. The present findings demonstrate not only the successful stable expression of EGFP in Drosophuila was about 9.3 mgI. The present findings demonstrate not only the successful stable expression of EGFP in Drosophila S2 cells, but also the use of EGFP as a reporter to analyze gene expression, with its potential of a Drosophila cell expression system for recombinant protein production being an alternative to a baculovirus-insect cell expression system.

  • PDF

Dimethylsulfoxide and Sodium Butyrate Enhance the Production of Recombinant Cyclooxygenase 2 in Stably Transformed Drosophila melanogaster S2 Cells

  • Lee, Jong-Min;Sohn, Bong-Hee;Kim, Yong-Soon;Kang, Pil-Don;Lee, Sang-Uk;Chung, In-Sik
    • 한국잠사학회:학술대회논문집
    • /
    • 한국잠사학회 2003년도 International Symposium of Silkworm/Insect Biotechnology and Annual Meeting of Korea Society of Sericultural Science
    • /
    • pp.149-150
    • /
    • 2003
  • The purpose of this experiment is to optimize the yield of the recombinant Cox2 from the stably transformed Drosophila melanogaster S2 cells, using dimethylsulfoxide and sodium butyrale. Materials and Methods : Materials - Cell line : Drosophila melanogaster Schneider 2 (S2) cells - vector pMT/BiP/V5-His and pCoHygro (Invitrogen) (omitted)

  • PDF

Functional Expression of Recombinant Tumstatin in Stably Transformed Drosophila melanogaster S2 Cells

  • Sohn, Bong-Hee;Kim, Yong-Soon;Kang, Pil-Don;Lee, Sang-Uk;Lee, Jong-Min;Chung, In-Sik
    • 한국잠사학회:학술대회논문집
    • /
    • 한국잠사학회 2003년도 International Symposium of Silkworm/Insect Biotechnology and Annual Meeting of Korea Society of Sericultural Science
    • /
    • pp.147-148
    • /
    • 2003
  • The purpose of this experiment is to confirm whether the recombinant tumstatin revealed from the stably transformed Drosophila melanogaster S2 cells has in vitro capacity. Materials and Methods : Materials - Cell line : Drosophila melanogaster Schneider 2 (S2) cells - vector pMT/BiP/V5-His and pCoHygro (Invitrogen) (omitted)

  • PDF

한국산 야생효모에 관한 연구 2 (Studies on the wild yeasts in Korea (II))

  • 박명삼;라철호
    • 미생물학회지
    • /
    • 제8권3호
    • /
    • pp.95-102
    • /
    • 1970
  • From the crops Drosophila collected in Mt. Sokni and Mt.Kyeryong, 7 strains were isolated and then 6 species of wild yeast were identified. 1) Of these six species of wild yeasts two were to be of genus Saccharomyces(Ascosporgenous), two Torulopsis and two Trichosporon (both genuses of Asporogenous). 2) It was found that the fermentation of the wild yeasts isolated from Drosophila was much better than that of any others ; in particular, S. florentinus and S. cerevisiae were good in fermenting maltose. 3) After being cultivated in malt extract agar medium at $25^{\circ}C$ for 3 days, the vegetative cells were found to be big but Torulopsis cells small. 4) It was also observed that the species of yeasts used fro food by Drosophila largely depends on genus and species of Drophila. 5) Of the yeasts isolated from the Drosophila, Trichosporon capitatum and Torulopsis dattila, which has not previously been recorded, were identified. 6) It is believed, therfore, that S.florentinus, powerful in fermenting maltose, will be extremely useful in terms of industrial application.

  • PDF

초파리 S2 세포 시스템에서 녹색형광단백질 생산을 위한 재조합 배큘로바이러스의 감염조건들의 영향 (Effects of Recombinant Baculovirus Infection Conditions on Production of Green Fluorescent Protein in Drosophila S2 Cells)

  • 조혜숙;김연규;김경로;차형준
    • Korean Chemical Engineering Research
    • /
    • 제44권1호
    • /
    • pp.40-45
    • /
    • 2006
  • 원하는 유전자를 배큘로바이러스의 감염에 의하여 초파리 Drosophila melanogaster S2 세포에 도입하는 배큘로바이러스/S2 세포 발현 시스템은 강력하고 안전한 배큘로바이러스의 장점과 세포가 파괴되지 않는 S2 세포의 장점을 접목한 시스템이다. 본 연구에서는 외래 목적 단백질로 발현 모니터링이 손쉬운 녹색형광단백질(green fluorescent protein)을 발현시키는 재조합 배큘로바이러스를 이용하여 S2 세포에의 감염조건들에 대한 영향 연구를 수행하였다. 재조합 배큘로바이러스의 S2 세포에의 감염조건으로는 multiplicity of infection(MOI), 초기 세포 수, 배큘로바이러스 용액이 세포를 적시는 최소 부피, 배큘로바이러스를 첨가한 후 제거하기까지의 배양시간 그리고 배큘로바이러스 제거 후 S2 세포를 혈청이 존재하는 배지에서 키우는 배양시간을 선정하였다. MOI는 일반적으로 크게 하는 것이 높은 발현 수율을 위하여 좋은 결과를 보였으나 세포배양이 길어지는 경우 세포독성의 문제가 심각해 질 수 있고 실제적인 배양에서는 높은 MOI를 유지하는 것이 불가능하므로 사용하는 100 mm 배양접시에서 배큘로바이러스와 S2 세포가 접촉하는 동안의 변수들인 MOI를 적정의 값인 30으로, 배큘로바이러스 배양 시간을 1.5 시간으로 고정함으로써 배큘로바이러스가 숙주 세포인 S2에 대해 미치는 세포독성을 낮출 수 있었다. 또한, 배큘로바이러스 최소 부피는 배양접시에서 사용부피의 2.4%에서 가장 좋은 결과를 보였으며 배큘로바이러스 용액을 10배 농축시킴으로써 이 부피를 맞추기 위해 첨가시키는 새로운 배지의 비율을 높임으로써 결과적으로 배큘로바이러스에 의한 세포독성을 줄일 수 있었다. 이를 통하여 세포 파쇄 및 배양접시 표면에서 탈착되는 것을 막고 높은 생장 상태를 유지해서 감염 효율도 높일 수 있었다. 배큘로바이러스의 감염이 끝난 후의 관여하는 변수들인 감염 후 배양시간은 24시간에서 최대의 녹색형광단백질의 발현을 나타내었다.

Production of Recombinant Rotavirus Capsid Protein VP7 from Stably Transformed Drosophila melanogaster S2 Cells

  • Park, Jong-Hwa;Chang, Kyung-Hwa;Lee, Youn-Hyung;Kim, Hae-Yeong;Yang, Jai-Myung;Chung, In-Sik
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
    • /
    • 제12권4호
    • /
    • pp.563-568
    • /
    • 2002
  • Stably transformed Drosophila melanogaster 52 cells producing recombinant VP7 were obtained, and recombinant VP7 expression was confirmed by Western blot analysis. The molecular weight of recombinant VP7 expressed in 52 cells was approximately 35.5 kDa, and 75% of the total VP7 produced was present in the medium. Recombinant VP7 contained N-linked glycosylated oligosaccharides. Aprotinin, leupeptin, and polyvinylpyrrolidone did not have any noticeable effect on recombinant VP7 production; however, DMSO and sodium butyrate increased its production by 120% and 60%, respectively.

Suspension culture of Stably Transformed Drosophila melanogaster S2 Cells expressing EGFP and EPO

  • Sohn, Bong-Hee;Lee, Jong-Min;Kim, Yong-Soon;Kang, Pil-Don;Lee, Sang-Uk;Chung, In-Sik
    • 한국잠사학회:학술대회논문집
    • /
    • 한국잠사학회 2003년도 제46회 춘계 학술연구 발표회
    • /
    • pp.40-40
    • /
    • 2003
  • Recombinant plasmids harboring heterologous genes coding enhanced green fluorescent protein (EGFP) and erythropoietin (EPO) were transfected and expressed in Drosophila melanogaster S2 cells. Stably transformed cell populations expressing EGFP or monkey EPO were isolated after 4 weeks of selection with hygromycin B. (omitted)

  • PDF

Dimethyl sulfoxide에 의한 세포내 칼슘이온 농도 증가가 안정적으로 형질 전환된 초파리 S2 세포에서 재조합 사람 cyclooxygenase 1의 발현에 미치는 영향 (An Increased Intracellular Calcium Ion Concentration in Response to Dimethyl Sulfoxide Correlates with Enhanced Expression of Recombinant Human Cyclooxygenase 1 in Stably Transfected Drosophila melanogaster S2 Cells)

  • 장경화;박종화;김도형;정하영;황보전;이현호;이희영;손동화;김원용;정인식
    • KSBB Journal
    • /
    • 제27권5호
    • /
    • pp.313-318
    • /
    • 2012
  • Dimethyl sulfoxide (DMSO) increased the intracellular calcium ion concentration in stably transfected Drosophila melanogaster S2 cells expressing recombinant cyclooxygenase 1 (COX-1). DMSO did not increase the Drosophila NOS (dNOS) transcript level in calcium chelator-treated cells. Expression of recombinant COX-1 due to DMSO was diminished in cells treated with calcium chelators or channel blockers. Our results indicate that an increased intracellular calcium ion concentration due to DMSO is associated with up-regulation of the dNOS gene, leading to enhanced expression of COX-1.

Analysis of Two Promoters that Control the Expression of the GTP cyclohydrolase I Gene in Drosophila melanogaster

  • Byun, Jaegoo;Yoon, Jaeseung;Baek, Kwanghee
    • Molecules and Cells
    • /
    • 제27권5호
    • /
    • pp.583-589
    • /
    • 2009
  • GTP cyclohydrolase I (GTPCH) is a key enzyme in the de novo synthesis of tetrahydrobiopterin. Previously, the Drosophila melanogaster GTPCH gene has been shown to be expressed from two different promoters (P1 and P2). In our study, the 5'-flanking DNA regions required for P1 and P2 promoter activities were characterized using transient expression assay. The DNA regions between -98 and +31, and between -73 and +35 are required for efficient P1 and P2 promoter activities, respectively. The regions between -98 and -56 and between -73 and -41 may contain critical elements required for the expression of GTPCH in Drosophila. By aligning the nucleotide sequences in the P1 and P2 promoter regions of the Drosophila melanogaster and Drosophila virilrs GTPCH genes, several conserved elements including palindromic sequences in the regions critical for P1 and P2 promoter activities were identified. Western blot analysis of transgenic flies transformed using P1 or P2 promoter-lacZ fusion plasmids further revealed that P1 promoter expression is restricted to the late pupae and adult developmental stages but that the P2 promoter driven expression of GTPCH is constitutive throughout fly development. In addition, X-gal staining of the embryos and imaginal discs of transgenic flies suggests that the P2 promoter is active from stage 13 of embryo and is generally active in most regions of the imaginal discs at the larval stages.

야생 초파리 수종의 염색체에 관한 연구 (Chromosome Studies on Several Wild Sepcies of Drosophilidae)

  • 강영선;김영진;방규환
    • 한국동물학회지
    • /
    • 제7권2호
    • /
    • pp.13-18
    • /
    • 1964
  • 저자(著者)들은 경기도(京畿道) 광릉(光陵)에서 채집(採集)한 야생(野生)인 초파리 13종(種)을 aceto-lactic orcein squash 방법(方法)으로 염색체수(染色體數)와 형태(形態)를 관찰(觀察)하여 다음과 같은 결과(結果)를 얻었다. 염색체(染色體)의 형태(形態)는 centromere의 위치(位置)를 기준(基準)으로 하여 V 형(型)(median or submedian), R 형(型)(terminal), D 형(型)(do-like)의 3종류로 분류(分類)했다. 염색체수(染色體數)는 diploid로, 핵형표시(核型表示)는 haploid로 나타냈다. 1) Leucophengo maculata의 염색체수(染色體數)는 12이고 핵형(核型)은 5V's+1D's이고 X염색체(染色體)는 V 형(型), Y도 같은 모양을 한다. 2) Scaplomyza pallida의 염색체수(染色體數)는 8이며 핵형(核型)은 2V's+1R's+1D's이고 X염색체(染色體)는 R 형(型), Y도 R형(型)이다. 3) Mycodrosophila poecilogastra의 염색체수(染色體數)는 12이며 핵형(核型)은 5R's+1D's이고 X염색체(染色體)는 R형(型), Y도 R(型)이다. 4) Mycodrosophila sp.의 염색체수(染色體數)는 8이며 핵형(核型)은 2V's+1R's+1D's이고 X염색체(染色體)는 V형(型), Y도 V형(型)이다. 5) Drosophila coracina의 염색체수(染色體數)는 8이며 핵형(核型)은 2V's+1R's+1D's이고 X염색체(染色體)는 R형(型), Y염색체(染色體)도 같은 모양을 한다. 6) Drosophila histrioides의 염색체수(染色體數)는 10이며 핵형(核型)은 1V's+3R's+1D's이고 성염색체(性染色體)는 밝히지 못하였다. 7) Drosophila malanogaster의 염색체수(染色體數)는 8이고 핵형(核型)은 2V's+1R's+1D's이고 X염색체(染色體)는 R형(型), Y는 J형(型)이다. 8) Drosophila auraria의 염색체수(染色體數)는 8이며 핵형(核型)은 2V's+1R's+1D's이고 X염색체(染色體)는 R형(型), Y도 R형(型)이다. 저자(著者)들은 경기도(京畿道) 광릉(光陵)에서 채집(採集)한 야생(野生)인 초파리 13종(種)을 aceto-lactic orcein squash 방법(方法)으로 염색체수(染色體數)와 형태(形態)를 관찰(觀察)하여 다음과 같은 결과(結果)를 얻었다. 염색체(染色體)의 형태(形態)는 centromere의 위치(位置)를 기준(基準)으로 하여 V 형(型)(median or submedian), R 형(型)(terminal), D 형(型)(do-like)의 3종류로 분류(分類)했다. 염색체수(染色體數)는 diploid로, 核型表示(핵형표시)는 haploid로 나타 냈다. 1) Leucophengo maculata의 염색체수(染色體數)는 12이고 핵형(核型)은 5V's+1D's이고 X염색체(染色體)는 V 형(型), Y도 같은 모양을 한다. 2) Scaplomyza pallida의 염색체수(染色體數)는 8이며 핵형(核型)은 2V's+1R's+1D's이고 X염색체(染色體)는 R 형(型), Y도 R형(型)이다. 3) Mycodrosophila poecilogastra의 염색체수(染色體數)는 12이며 핵형(核型)은 5R's+1D's이고 X염색체(染色體)는 R형(型), Y도 R(型)이다. 4) Mycodrosophila sp.의 염색체수(染色體數)는 8이며 핵형(核型)은 2V's+1R's+1D's이고 X염색체(染色體)는 V형(型), Y도 V형(型)이다. 5) Drosophila coracina의 염색체수(染色體數)는 8이며 핵형(核型)은 2V's+1R's+1D's이고 X염색체(染色體)는 R형(型), Y염색체(染色體)도 같은 모양을 한다. 6) Drosophila histrioides의 염색체수(染色體數)는 10이며 핵형(核型)은 1V's+3R's+1D's이고 성염색체(性染色體)는 밝히지 못하였다. 7) Drosophila malanogaster의 염색체수(染色體數)는 8이고 핵형(核型)은 2V's+1R's+1D's이고 X염색체(染色體)는 R형(型), Y는 J형(型)이다. 8) Drosophila auraria의 염색체수(染色體數)는 8이며 핵형(核型)은 2V's+1R's+1D's이고 X염색체(染色體)는 R형(型), Y도 R형(型)이다. 9) Drosophila unispina의 염색체수(染色體數)는 12이며 핵형(核型)은 5R's+1D's이고 X염색체(染色體)는 R형(型), Y도 R형(型)이다. 10) Drosophila bizonata의 염색체수(染色體數)는 8이며 핵형(核型)은 3V's+1D's이고 X염색체(染色體)는 V형(型), Y는 보다 크기가 작은 V형(型)이다. 11) Drosophila virilis의 염색체수(染色體數)는 12이며 핵형(核型)은 5R's+1D's이고 X염색체(染色體)는 R형(型), Y도 R형(型)이다. 12) Drosophila sordidula의 염색체수(染色體數)는 10이고 핵형(核型)은 2V's+2R's+1D's이고 X염색체(染色體)는 V형(型), Y도 V형(型)이다. 13) Drosophila tenuicanda의 염색체수(染色體數)는 12이며 핵형(核型)은 1V's+4R's+1D's이고 성염색체(性染色體)는 밝히지 못하였다.

  • PDF