The effect of solution temperature and nitrogen form on cucumber (Cucumis sativus L.) growth, photosynthesis and nitrogen metabolism was investigated in hydroponic culture. Cucumber plants were grown for 35 days in a greenhouse at three constant solution temperatures ($15^{\circ}C$, $20^{\circ}C$, and $25^{\circ}C$) within a natural aerial temperature ($15-30^{\circ}C$). Four nitrate:ammonium ($NO{_3}^-:NH{_4}^+$) ratios (10:0, 8:2, 5:5, and 2:8 $mmol{\cdot}L^{-1}$) at constant nitrogen (N) concentration of $10mmol{\cdot}L^{-1}$ were applied within each solution temperature treatment. Results showed an increasing solution temperature enhanced plant growth (height, dry weight, and leaf area) in most N treatments. Dry weight accumulation was greatest at the 10:0 $NO{_3}^-:NH{_4}^+$ ratio in the $15^{\circ}C$ solution, the 5:5 ratio in the $20^{\circ}C$ solution and the 8:2 ratio in the $25^{\circ}C$ solution. Photosynthetic rate (Pn) response to solution temperature and $NO{_3}^-:NH{_4}^+$ ratio was similar to that of plant growth. Probably, the photosynthate shortage played a role in the reduced biomass formation. Increasing solution temperature enhanced the nitrate reductase (NR) activity, and further reduced shoots nitrate content. Our results indicate that the optimal ratio of nitrate to ammonium that promotes growth in hydroponic cucumber varies with solution temperature.
Cryopreservation and in vitro fertilization (IVF) protocols are important in genetic studies and applications to transgenic animals. Various studies about boar sperm cryopreservation have been studied for a long time. Those were about the use of extenders, the choice of sugars, the cooling and warming rates. The factors that influence the boar sperm are the dramatic changes in temperatures, osmotic and toxic stresses, and reactive oxygen species (ROS) generation. Among these factors, ROS generation is the main damage to DNA which is a principal genetic material and the most important for the practical applications. So we wondered whether ROS generation could be reduced. In previous study, monothioglycerol (MTG) was essential for the culture of embryo stem cells. Therefore we added MTG in the freezing extender based on lactose-egg yolk (LEY) with trehalose. For the assessment of the frozen-thawed sperm, we focused onmotility, membrane integrity and DNA damage. First, we used a computer-aided sperm analysis system for overall conditions of sperm such as motility and viability. Then we performed the sperm chromatin structure assay for DNA integrity and hypo-osmotic swelling test for membrane integrity. And our result showed the existence of MTG in the freezing extender caused less damage to DNA and higher motility in frozen-thawed boar sperm. Also we checked a relative antioxidant activity of MTG in modified Modena B extender. We concluded that this reagent can activate sperm mitochondria at MTG $0.2{\mu}M$, contribute to sperm motility and DNA integrity but there was no significant difference on membrane integrity. Also antioxidant activity of MTG in modified Modena B extender was proved.
Microorganisms producing xylanase were screened for the enzymatic production of xylo-oligo saccharides from xylan. One of the bacteria isolated from compost produced an endoxylanase extracellularly. The bacterium was identified as Bacillus sp. according to its taxonomic characteristics examined. Xylanase production reached upto 5 U/ml after 22 h of culture in LB medium at $30^{\circ}C$. The xylanase was purified by ammonium sulfate precipitation and gel filtration. The molecular weight of the xylanase was estimated to be 20,400 by SDS-PAGE. Optimal temperature and pH for the xylanase activity was $60^{\circ}C$ and 6.5, respectively. The enzyme was stable at temperatures upto $40^{\circ}C$ and pH values from 4 to 10. The xylanase was completely inhibited by the addition of 2 mM mercury ion. Apparent $K_m$ and $V_max$ values for oat spelt xylan were 9.2 mg/ml and 1954 U/mg protein, respectively. For birchwood xylan, the values were 6.3 mg/ml and 1009 U/mg protein. The predominant products of the xylan hydrolysis were xylobiose, xylotriose and xylotetraose, indicating that the enzyme is an endoxylanase. Upto $85{\%}$ of the initially added enzyme (2 U/ml) was bound to 50 mg/ml of the insoluble fraction of oat spelt xylan after incubation at $30^{\circ}C$ for 30 min.
Copper has been widely used to control algae and pathogens in fish culture ponds. However, its toxic effects on fish depend not only on its concentration in the water but also on the water quality. A laboratory experiment was conducted to assess copper toxicity in the black rockfish Sebastes schlegeli using a panel of antioxidant enzymes, including glutathione (GSH), glutathione S-transferase (GST), glutathione peroxidase (GPx), glutathione reductase (GR) and superoxide dismutase (SOD), at different levels of copper at three water temperatures (WT, 18, 23, $28^{\circ}C$) for 4 days. After exposure to two copper concentrations (100 and $200{\mu}g/L$), GSH levels and GST activities increased significantly, depending on WT (P < 0.05) in the liver, gill, and kidney of the black rockfish. GPx and SOD activities decreased significantly with both increasing WT and copper treatment in the organs of black rockfish (P < 0.05). These changes can be seen as initial responses to temperature stress and as a sustained response to copper exposure. This also indicates that GSH and related enzymes activities were sensitive indexes to stress by toxicants such as copper. The present findings suggest that simultaneous stress due to temperature change and copper exposure can accelerate changes in enzymes activities in the black rockfish. This provides another example of synergism between environmental temperature and pollutants, which may have important implications for the survival of fish in polluted environments during seasonal warming and/or global climate change.
Nevatalo, Laura M.;Bijmans, Martijn F. M.;Lens, Piet N. L.;Kaksonen, Anna H.;Puhakka, Jaakko A.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제20권3호
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pp.615-621
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2010
The viability of low-temperature sulfate reduction with hydrogen as electron donor was studied with a bench-scale gas-lift bioreactor (GLB) operated at $9^{\circ}C$. Prior to the GLB experiment, the temperature range of sulfate reduction of the inoculum was assayed. The results of the temperature gradient assay indicated that the inoculum was a psychrotolerant mesophilic enrichment culture that had an optimal temperature for sulfate reduction of $31^{\circ}C$, and minimum and maximum temperatures of $7^{\circ}C$ and $41^{\circ}C$, respectively. In the GLB experiment at $9^{\circ}C$, a sulfate reduction rate of 500-600 mg $l^{-1}d^{-1}$, corresponding to a specific activity of 173 mg ${SO_4}^{2-}g\;VSS^{-1}d^{-1}$, was obtained. The electron flow from the consumed $H_2$-gas to sulfate reduction varied between 27% and 52%, whereas the electron flow to acetate production decreased steadily from 15% to 5%. No methane was produced. Acetate was produced from $CO_2$ and $H_2$ by homoacetogenic bacteria. Acetate supported the growth of some heterotrophic sulfate-reducing bacteria. The sulfate reduction rate in the GLB was limited by the slow biomass growth rate at $9^{\circ}C$ and low biomass retention in the reactor. Nevertheless, this study demonstrated the potential sulfate reduction rate of psychrotolerant sulfate-reducing mesophiles at suboptimal temperature.
Iris 속 식물인 꽃창포의 번식 특성에서 종자의 잡종성과 적은 분얼로 인한 분주 번식의 어려움을 해결하고 고유한 품종의 특성을 유지하기 위해서는 조직배양을 통한 대량 번식의 구명이 필요하므로 Iris 속 식물의 화기부위 별 절편체를 이용하여 기내 번식에 의한 대량 증식방법을 정립하고자 본 실험을 수행하였다. 자생꽃창포의 화피기부조직, 자방, 소화경, 화경을 치상하여 기내배양환경에 적절한 환경을 구명하고자 조도 2000 Lux에서 일장 (0~24시간), 온도 (10~3$0^{\circ}C$), sucrose (l~9%)의 조건에서 배양하였다. 자생꽃창포의 화기 절편체로부터 유식물체 재분화에 적합한 일장은 16시간의 장일조건이, 온도 조건은 $25^{\circ}C$에서, sucrose 농도는 3%에서 가장 적합한 것으로 나타났으며 특히 화기 부위 중 화피기부조직과 자방 배양에서 높은 신초 형성을 보였다. 화기조직 치상절편체로부터 부정근의 분화는 암상태에서 촉진되어지고 sucrose는 6%에서 뿌리를 생장시키며 1$0^{\circ}C$, 15$^{\circ}C$의 저온에서는 신초,뿌리의 분화가 저조하였다.
In the present study, observations were made on the life-history of Lymnaea viridis under laboratory conditions, involving incubation period of the eggs and their hatching rate, shell length of the newly hatched snails, sexual maturity, size of the snails when the snail produced the first egg-mass, the number of eggs in each egg-mass, egg-laying, ovipostion, growth rate of the snails, and longevity of the snail. At temperatures between $19.8^{\circ}C$ to $22.5^{\circ}C$, incubation period of the eggs occupied 10~12 days, and after beginning of hatching, all young snails emerged completely from the egg-mass within 5 days. The hatching rate was 88%. The average shell length of the newly hatched snails was about 0.064cm. The rate of growth was extraordinarily rapid under good laboratory conditions. When two snails were reared in one culture vessel($20{\times}15{\times}5cm$) with blue-green algae at about $22^{\circ}C$, snail growth was optimal, taking 37 days to reach 1.2cm in shell length. Sexual maturity reached in about 19 days. The size of the snails at sexual maturity was $0.78{\pm}0.05cm$ in length and $0.47{\pm}0.04cm$ in width. The first egg-masses produced were $0.59{\pm}0.22cm$ in length and $0.34{\pm}0.08cm$ in width, and contained 7~38 eggs. The eggs are usually laid in water. The egg-laying was affected by food and temperature. Snails fed with blue-green algae at about $22^{\circ}C$ produced larger egg-masses than the snails fed with fish food at about $26^{\circ}C$. Under conditions of continuous activity and growth, the maximum expectation of life appears to be 109~350(mean 230) days. And the shell length of snails at death were 1.39~1.64cm.
A potent protein degrading bacterium was isolated from soil samples of different environments. Polyphasic taxonomic studies and phylogenetic 16S rRNA sequence analyses led to identify the isolate IB No. 11 as a strain of Bacillus subtilis. The isolated strain was recognized to produce protease constitutively, and the maximum production (1.64 units/ml) was attained in a shake flask culture when the isolate was grown at $40^{\circ}C$, for 32 h in basal medium supplemented with starch (0.25%) and gelatin (1.25%) as sole carbon and nitrogen source, respectively. The optimum pH and temperature for the protease activity were determined to be pH 7.0 and $50^{\circ}C$, respectively. $Ca^{2+}$ and $Mn^{2+}$ enhanced remarkably the protease activity but neither showed positive effect on the protease's thermal stability. In addition, it was observed that the protease was fairly stable in the pH range of 6.5-8.0 and at temperatures below $50^{\circ}C$, and it could be a good candidate for an animal feed additive. The inhibition profile of the protease by various inhibitors indicated that the enzyme is a member of serine-proteases. A combination of UV irradiation and NTG mutagenesis allowed to develop a protease hyper-producing mutant strain coded as IB No. 11-4. This mutant strain produced approximately 3.23-fold higher protease activity (6.74 units/mg) than the parent strain IB No. 11 when grown at $40^{\circ}C$ for 32h in the production medium. The protease production profile of the selected mutants was also confirmed by the zymography analysis.
Ginseng contained many different kinds of saponin which was the most valuable for people, but its yield cannot satisfy the demand using traditional extract methods. Enzyme transformation is a conformable and highly performed method which was fit for today. A ${\beta}$-glucosidase producing bacterium ($DCY51^T$) was isolated from Korean fermented-vegetable food kimchi. The 16S rRNA gene sequence analysis revealed that the strain $DCY51^T$ belongs to the genus Lactobacillus. The highest sequence similarity was found with Lactobacillus paracollinoides LMG $22473^T$ and Lactobacillus collinoides LMG $9194^T$ with levels of 16S rDNA similarity of 97.4% and 97.3%, respectively. Based on the above results the strain $DCY51^T$ placed in the genus Lactobacillus and proposed a new species, Lactobacillus kimchicus sp. nov. $DCY51^T$ (= KCTC $12976^T$ = JCM $15530^T$). It was culture solution reacted with Red Ginseng extract and $Rb_1$, respectively. The medium of bacteria was the liquid of MRS, the temperatures of growing and reacting between bacteria liquid and saponin were samely $37^{\circ}C$, there spective reacting time were 12 hours and 48 hours. Thus we got different saponins, and TLC and HPLC analysis showed that: enzyme respectively reacted with $Rb_1$ and Red Ginseng extract got the transformed saponin, respectively. The polarity position in TLC was a little higher than Rd; and the polarity position was the same as that of Compound K's, the saponin obtained from HPLC and other experimental results was not Compound K. The constitution of its saponin was hoped to be further confirmed.
지황과 현삼을 대상으로 저장 온도와 기간이 직접 체세포배 발생에 미치는 영향을 조사하였다. 지황은 $4^{\circ}C$에서 저장한 후 배양한 경우보다 $8^{\circ}C$에서 저장하여 배양한 경우 직접 체세포배 생성율이 높았으며, 저장 조직 간에 차이가 있어, 잎이 12주간 저장 후에도 거의 일정한 체세포배 발생율을 보여 줄기나 엽병보다 장기 저장에 적합한 것으로 나타났다. 현삼의 각 조직을 전배양 없이 바로 $4^{\circ}C$와 $8^{\circ}C$에서 저장하였을 때, 줄기와 엽병 조직이 저장기간의 경과와 무관하게 신초의 발생율이 유지되었는데 경제적인 면으로 볼 때 $4^{\circ}C$ 조건보다는 $8^{\circ}C$ 조건이 적절할 것으로 판단되었다. 한편 현삼의 각 조직을 $25^{\circ}C$에서 10일 동안 전배양한 후에 저장하기 위해서는 줄기와 잎 조직은 $8^{\circ}C$에서, 엽병 조직은 $4^{\circ}C$ 조건에서 저장하는 것이 유리한 것으로 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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