• 한국식품영양과학회지
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• 제44권10호
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• pp.1583-1587
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• 2015

본 연구에서는 어린감과 성숙감의 탄닌 함량 및 담즙산과의 결합능력을 비교 조사하였다. 또한 사람의 장내 세포인 Caco-2 cell에 어린감과 성숙감 추출물을 처리한 후 고농도의 DCA로 자극시켜 생성되는 NO의 수준과 TEER의 차이를 확인하였다. 탄닌 함량과 담즙산의 결합능력은 성숙감에 비해 어린감에서 유의적으로 높은 것으로 나타났으며 어린감 산성 에탄올 추출물에서 유의적으로 가장 높은 탄닌 함량 및 담즙산 결합능력을 보였다. NO 생성 억제능으로 확인한 염증반응에서도 어린감 산성 에탄올 추출물이 유의적으로 가장 높은 효과를 보였으며 DCA에 의해 유도된 장세포 간극의 느슨함을 유의하게 막아줄 수 있음이 확인되었다. 본 연구 결과를 토대로 어린감의 산성 에탄올 추출물은 고지방 식사를 통해 고농도로 축적되는 담즙산에 의해 형성된 유해한 장내 환경을 건강하게 유지시켜줄 수 있는 기능성 소재로 개발할 가능성이 있음이 확인되었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제42권1호
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• pp.73-81
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• 2014

본 연구에서는 명아주과 수송나물속 솔장다리(Salsola collina Pall.) 추출물의 항산화 및 항암 활성을 분석하였다. 먼저 솔장다리의 에탄올 추출물의 DPPH radical scavenging activity를 분석한 결과, $IC_{50}$가 $4.82{\mu}g/ml$로 나타나 강한 항산화능을 보유하였음을 확인하였다. 또한 대장암 세포주(HT29), 폐암 세포주(A549), 간암 세포주(HepG2)를 사용하여 솔장다리 추출물의 암세포 사멸효과를 분석한 결과, $IC_{50}$가 각각 43.8, 64.1, $92.5{\mu}g/ml$로 강력한 세포사멸효과를 나타냈으며 특히 HT29에 대한 강한 사멸효과를 보였다. 솔장다리 추출물의 항암 활성 기전 분석을 위해 세포주기를 분석한 결과, 대장암세포인 HT29의 G2/M arrest를 유도하였으며 최고 농도인 $60{\mu}g/ml$까지 S기 세포수가 증가하였다. 세포주기관련 단백질의 발현 분석 결과, 솔장다리 추출물을 처리한 경우, G2기에서 M기로의 전이에 필수적인 단백질인 Cdc25C와 cyclin A의 발현이 감소되었고, 반면 Cdc25C와 Cdc2의 불활성화 형태인 p-Cdc25C, p-Cdc2는 증가하였다. 또한 p21과 Wee1의 발현도 증가되었다. 하지만 p53의 발현량은 변화가 없었다. 이러한 결과는 솔장다리 추출물을 처리한 경우, p53 비의존적으로 p21의 발현이 증가되어 cyclin A/Cdc2 complex의 활성이 조절되고, 이어서 G2/M phase의 check point에 작용하는 Wee1의 발현증가 및 Cdc25C, Cdc2의 인산화에 의한 불활성화를 통하여 G2/M arrest가 유도되는 것을 시사한다. 또한 솔장다리 추출물 처리에 의해 S기 진행을 조절하는 Cdk2의 발현량도 감소하여, cyclin A/Cdk2 complex가 감소되어 S기의 세포수가 증가한 것으로 보인다. 따라서 본 연구 결과를 통해 솔장다리 추출물이 높은 항산화 활성을 지니며 암세포의 세포주기를 조절하여 높은 항암 활성을 보유함을 확인하였다.

• Clinical and Experimental Pediatrics
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• 제46권7호
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• pp.679-686
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• 2003

목 적 : AT는 드물게 발생하는 상염색체성 열성질환으로, 소뇌의 퇴화에 의한 운동장애와, 암 발생의 소인이 증가하는 등 많은 임상적 징후가 보인다. AT 질환을 유발하는 ATM 유전자는 DNA 손상시 세포주기 정지를 유도시키지 못하며, 방사선 조사 후 세포 생존력을 유지시키지 못하여 세포자멸사를 유도하게 된다. 따라서 암세포에 DN-ATM 유전자를 발현시켜 AT 세포의 표현형으로 변화시킨다면, 이러한 암세포는 방사선에 의해 유도되는 세포자멸사가 훨씬 더 증가된다. 그러나 지금까지 ATM 세포에서 방사선에 의해 야기되는 세포자멸사 경로는 밝혀져 있지 않다. 그러므로 본 연구에서는 DN-ATM이 발현되는 CT-26 대장암 세포를 이용하여 방사선 조사 후에 유도되는 세포자 멸사 경로를 구명하고자 하였다. 방 법 : DN-ATM 아데노바이러스(Ad/DN-ATM)와 표식 유전자 GFP만을 함유한 대조 아데노바이러스(Ad/GFP)를 제작하여 CT-26 세포에 감염시켰다. DN-ATM이 발현되는 CT-26세포에서 방사선 조사로 유도되는 세포자멸사 경로는 [$^3H$]-thymidine assay, DNA fragmentation, 및 Western immunoblot analysis으로 실험하였다. 결 과 : 실험 결과에서 방사선 조사 후 세포의 성장이 감소하는 것으로 보아 CT-26 대장암 세포가 AT 환자에서 보여지는 표현형으로 변화되었다는 것을 보여주었고, 방사선 조사에 의한 세포자멸사가 유도되었다. 방사선 조사 후 시간이 지날수록 Bcl-2의 발현이 감소되고, Bax의 발현이 증가하며, caspase 9, caspase 3 및 PARP가 활성화되었다. 결 론: 이러한 실험 결과들은 DN-ATM이 발현되고 있는 CT-26 세포에서 방사선 조사 후 야기되는 세포자멸사 경로는 미토콘드리아를 통하여 caspase 9, caspase 3와 PARP의 활성에 의해 일어나는 세포자멸사임을 시사한다.

• 한국식품과학회지
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• 제43권5호
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• pp.641-647
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• 2011

본 연구에서는 녹차의 주요 생리활성 성분인 PPE와 일반 의약품 성분 AAP, Asp 및 Ibu와의 혼용 시 일어날 수 있는 상호 작용에 의한 세포독성 변화를 장관계 정상세포와 암세포 모델에서 비교하였다. PPE는 정상 장관계 세포 INT 407 및 대장암 세포 HCT 116에 농도의존적인 독성을 나타내었고, $IC_{50}$ 수치는 각각 29.9과 57.4 ${\mu}g/mL$로써 암세포에 더욱 강력한 독성을 보였다. PPE와 200 ${\mu}M$ 이하의 저농도 약물을 HCT 116 세포에 24, 48시간 복합 투여한 결과 전체적으로 현저한 독성의 변화현상은 발생하지 않았다. HCT 116 세포에서 항산화효소 SOD 존재 시에 PPE 독성의 유의적인 감소가 관찰되었으나, 이 조건에서도 약물에 의한 유의적인 변화는 나타나지 않았다. PPE로부터 생성되는 $H_2O_2$의 양은 5 mM 이상의 Asp 또는 Ibu에 의하여 감소하였고, AAP에는 영향을 받지 않았다. INT 407 세포와 HCT 116 세포에서 mM 이상의 고농도 약물과 PPE를 복합 처리하여 세포독성변화를 본 결과 현저한 독성의 변화가 관찰되지 않았으나, INT 407 세포에서 PPE 존재 시 AAP의 독성이 다소 증가하였다. 한편 PPE와 약물을 각각 순서를 달리하여 전후로 처리하였을 때 HCT 116 세포에서의 독성이 단독처리 시 각각의 합보다 20% 이내에서 증가하였다. PPE와 빈번히 복용되는 일반 의약품 AAP, Asp 및 Ibu를 여러 조합에 의해 장관계 세포에 처리하였을 때 이들의 상호작용에 의해 일부 독성의 강화현상이 나타났으나 전체적으로 두드러진 독성발현 빛 활성변화는 발견되지 않았다.

• 한국환경성돌연변이발암원학회지
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• 제22권2호
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• pp.65-69
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• 2002

To elucidate the effect of microsphere coinjection on the administration of oligodeoxynucleotides (ODN), we have investigated biodistribution of ［S-35］-labeled antisense ODN targeted to cAMP-dependent protein kinase (PKA) RI-$\alpha$ subunit in nude mice xenografted with WiDr (human colon cancer, ATCC CCL218). The strategy of using microsphere has been proposed for cancer treatment as a carrier of therapeutic ODN so that it could offer an advantage with respect to maintaining constant ODN levels in blood and obtaining higher therapeutic ODN concentration at tumor sites. Comparative biodistribution studies were performed in nude mice (female, 20 g of body weight, n = 4-6) xenografted with WiDr cancer cells, when 0.1 $\mu$Ci (specific activity, 2.94 mCi/$\mu$mole) of ［S-35］-labeled RI-$\alpha$ antisense ODN was injected alone or with microsphere (PLG-18, polylactic copolymer with cationic surfactant DDAB18). Peak tumor uptake of ［S-35］-labeled ODN was significantly increased from 17.7% (at 6 h) of injected dose per gram of tissue (ID/g) to 42.5% (at 24 h) ID/g when microsphere was coinjected with ODN. The different biodistribution in the kidney accumulation (e.g., 100.2% ID/g for ODN alone and 54.9%/ID/g for microshpere coinjection) may contribute to higher blood concentration (e.g., 21.5%ID/$m\ell$ for ODN alone and 37.5%ID/$m\ell$ for microsphere coinjection) of radiolabeled ODN. Of importance is the fact that the whole body retention of radioactivity increased with microsphere coinjection from 50.8%ID/g to 68.0%ID/g after 24-h of injection. This decreased kidney accumulation and increased whole body retention of ［S-35］-labeled ODN resulted in a significant improvement of ODN targeting to the tumor site. In conclusion, the coinjection of microsphere appears to be an important carrier system in vehiculation of antisense oligonucleotide to the tumor tissue in vivo.

• 생명과학회지
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• 제25권4호
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• pp.450-455
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• 2015

본 연구에서는 국내에서 주로 소비되는 국내산 및 수입산 참돔의 일반성분과 중금속 함량을 비교 분석하였고 생리활성을 비교하기 위하여 참돔을 용매의 극성에 따라 추출하여 항산화 및 세포독성 효과에 대해 연구하였다. 수입산과 비교했을 때 국내산 참돔은 높은 함량의 수분과 낮은 함량의 조지방, 조단백질 및 회분을 나타내었다. 국내산 및 수입산 참돔의 중금속 함량을 비교한 결과 원산지에 따른 유의적 차이를 보였으며 국내산 참돔의 수은 함량은 0.08 mg/kg으로 수입산 참돔보다 높은 함량을 나타내었으나 납의 경우 원산지에 따른 유의적 차이는 보이지 않았다. 국내산 및 수입산 참돔의 A+M 및 MeOH 추출물을 인체 섬유육종세포(HT-1080)에 처리하였을 때, 세포 내 활성산소종 생성 저해효과를 살펴 본 실험 결과, 국내산 및 수입산 참돔 추출물들에 의한 활성산소종 생성 억제효과를 비교해 보면 수입산 참돔 추출물에 의한 저해효과가 높았으며 두 추출물들 중 MeOH 추출물에 의한 저해효과가 높았음을 알 수 있었다. 인체 암세포들(AGS 및 HT-29)들에 대한 세포독성 활성 결과에서 AGS 암세포의 경우 국내산 참돔 A+M 및 MeOH 추출물들에 의한 세포독성 효과가 수입산 참돔A+M 추출물들보다 높았다. HT-29 암세포에 대해서는 국내산 참돔A+M 추출물에 의한 세포독성 효과가 수입산 참돔 A+M 추출물에 의한 것보다 높았고 MeOH 추출물에 의한 세포독성 효과는 유사했다. 따라서 본 연구 결과를 기초자료로 하여 향후 참돔의 다양한 생리활성 규명이 필요하다고 사료된다.

• 생명과학회지
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• 제19권11호
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• pp.1598-1604
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• 2009

양파 껍질의 폐기는 생리활성 물질이 손실 될 수 있으므로 양파 껍질을 이용한 연구는 폐자원을 활용한다는 면에서 의미가 있다. 이에 본 연구에서는 양파를 육질과 껍질로 나누어 이들의 총 플라보노이드 함량을 측정하였고 세포 내 활성산소종 제거 및 인체 암세포 증식 억제 효과에 대하여 비교 검토하였다. 양파 껍질은 육질과 비교했을 때 48배의 플라보이드 함량을 나타내어 양파 껍질에 플라보노이드 성분이 다량 함유되어 있음을 확인하였다. 양파 껍질의 A+M과 MeOH 추출물을 0.05 mg/ml의 농도로 HT-1080 세포에 처리하였을 때 지질 과산화물의 생성을 크게 억제시켰다. 이들 두 추출물들은 $500{\mu}M$ $H_2O_2$만을 처리한 control군과 비교하였을 때 측정 시간 120분 동안 계속적으로 높은 세포 내 지질 과산화물 생성 억제능력을 나타내었고 특히 양파 껍질에 의한 저해 효과가 양파 육질보다 높았다. 양파 육질과 껍질의 추출물로부터 얻어진 분획물들 중에서는 양파 껍질의 85% aq. MeOH 및 BuOH 분획물에 의한 저해효과가 우수하였고 양파 육질의 경우에는 85% aq. MeOH 분획물에 의한 항산화효과가 높았다. 암세포증식 억제 실험에서 양파 껍질의 A+M 추출물의 $IC_{50}$은 AGS 및 HT-29 세포에서 각각 0.07 및 0.05 mg/ml로 양파 육질보다 저해효과가 높았고 껍질 MeOH 추출물의 $IC_{50}$은 두 세포에서 각각 0.75 및 3.31 mg/ml로 AGS 세포에 대한 증식 억제효과가 우수하였음을 관찰 할 수가 있었다. 분획물들 중에서는 양파 육질 및 껍질의 85% aq. MeOH 분획물의 AGS 세포에 대한 $IC_{50}$이 각각 0.04 및 0.03 mg/ml로 가장 높은 활성을 나타내었고. 이들 분획물들도 HT-29 세포보다는 AGS 세포에 대한 증식 억제효과가 높았음을 살펴 볼 수가 있었다. 대체로 water 분획물에 의한 활성산소종 저해 및 암세포 증식 억제효과는 분획물들 중 가장 낮았다. 이상의 결과로부터 양파 부산물인 껍질에도 생리활성 물질이 함유되어 있는 것으로 판단되므로 이를 활용한 양파가공품 개발이 필요하다고 여겨진다.

• Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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• 제27권6호
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• pp.483-490
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• 2001

There were many controversies in the cause and progress of tumorigenesis. Recently, studies on the mutation of genes related to the tumor have extensively been performed due to development of molecular biology. Structural and morphological changes of chromosomes, which are related to the abnormal activation of oncogenes or inactivation of tumor suppression genes, transform the normal cells into the tumor cells. p53 and Rb are well known tumor suppressor genes, while oncogenes include c-myc, bcl-2 and ras, etc. When exposed to cell damaging agents, p53 inhibits cell growth by inducing transcription of p21. Especially p73, which is homo-logy of p53, frequently deleted in melanoma, neuroblastoma, colon cancer, and breast cancer, when over produced, p73 activates the transcription of p21, bax-1 and inhibits cell growth by inducing apoptosis. For study on mRNA expression of p21 and p73, normal oral keratinocytes, and cell lines of primary and metastatic oral squamous cell carcinoma were cultured and then electrophoresis and RT-PCR(reverse transcription-polymerase chain reaction) were performed. 1. The mRNA of p21 and p73 in normal oral keratinocyte expressed lower than that of primary squamous cell carcinoma. 2. The mRNA of p21 in metastatic oral squamous carcinoma cell lines was expressed as various patterns compared with that of normal oral keratinocyte. 3. In the metastatic oral squamous cell lines, the mRNA of HN8 expressed higher than that of HN12 or HN19. 4. The mRNA of p73 in primary oral squamous cell lines expressed 4-5 times higher than that of normal keratinocyte. 5. In metastatic oral squamous cell lines, there was no significant expression of p73 mRNA compared with that of normal oral keratinocyte. From the results obtained in this study, mRNA expression of p73 in primary oral squamous cell lines was remarkable, while mRNA expression of p21 and p73 in metastatic oral squamous cell lines were statistically insignificant.

• Journal of Oral Medicine and Pain
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• 제24권2호
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• pp.145-161
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• 1999

The proto-oncogene bcl-2 confers a survival advantage to cells by blocking programmed cell death (apoptosis). Overexpression of bcl-2 probably plays a role in tumorigenesis, and the expression of the bcl-2 protein has been investigated in many kinds of tumors. An increased expression of nitric oxide synthetase(NOS) has been observed in human colon cancer cell lines as well as in human gynecological, breast, and CNS tumors. However there have been only a few reports on the expression of bcl-2 and $NOS_2$ in oral white lesions and cancer. The aim of this study was to investigate the relationship between the expression of Bcl-2 and $NOS_2$ and several pathological parameters such as histological types and layers. We reported desregulation of bcl-2 and $NOS_2$ expression during progression from oral white lesion, lichen planus and leukoplakia to squamous cell carcinoma. The obtained results were as follows: 1. Immunohistochemical analysis with monoclonal antibodies to bcl-2 oncoprotein and $NOS_2$ in formalin-fixed paraffin-embedded tissue sections revealed that bcl-2 expression is restricted to the basal cell layer and $NOS_2$ was mild expressed only in subepithelial inflammatory cells in normal human mucosa. There wasn't specific finding of those in lichen planus and leukoplakia. 2. Bcl-2 immunoreactivity in severe epithelial dysplasia or CIS occurs throughout the epithelium, $NOS_2$ reactivity in most superficial layer were noted. 3. In well-differentiated squamous cell carcinomas, mostly bcl-2 was overexpressed. In moderated and poor squamous cell carcinomas, the expression of $NOS_2$ was increased and that of bcl-2 was decreased. 4. The immunoreactivity of bcl-2 was 12.5% of normal mucosa, 30% of leukoplakia, 44% of lichen planus and 67% of carcinoma in situ. In carcinoma, those were 43%, 50% and 67% according to differentiation, respectively. 5. The immunoreactivity of $NOS_2$ was 25% of normal mucosa, 70% of leukoplakia, 78% of lichen planus and 100% of carcinoma in situ and epithelial dysplasia. In carcinoma, those were higher in moderated(100%) and poor(83%) squamous cell carcinomas than in well differentiated type(71%). 6. The expression of bcl-2 and $NOS_2$ by Western blot was increased highly in lichen planus and leukoplakia. Therefore, the expression of bcl-2 was increased in the white and precancerous lesions and that was decreased by differentiation of carcinoma. However, $NOS_2$ immunoreactivity in carcinoma in situ was lower than those in moderated and poor squamous cell. These findings suggest that the interaction of bcl-2 and $NOS_2$ may be roled importantly in growth and development of carcinoma.

• 생명과학회지
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• 제29권8호
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• pp.871-878
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• 2019

본 연구에서는 Rhododendron brachycarpum (RB, 홍만병초)의 80% 메탄올 추출물 및 분획물의 항암 활성을 규명하고자 하였다. RB n-hexane 분획물은 HT-29 세포에서 가장 높은 활성 저해를 보였다($IC_{50}=20.2{\pm}1.2{\mu}g/ml$). 더욱이, 콜로니와 구형 형성은 수와 크기는 유의적으로 감소시켰다. RB의 n-hexane 분획물에서($0.22{\pm}0.02$ fold change) TOP / FOP 플래시 리포터 억제 활성은 추출물 및 다른 분획물 보다 낮게 나타났다. n-hexane 및 ethyl acetate 분획물은 세포 내 ${\beta}-catenin$의 발현을 조절하였다. 2 차 대사 산물이 ${\beta}-catenin$ 분해를 감소시킬 수 있는지 여부를 조사하기 위해 Western blot을 실시한 결과 n-hexane 분획물에서 $p-GSK3{\beta}$를 조절하였으며, 세포내 ${\beta}-catenin$은 핵에서 정량적인 변화를 가져왔다. 이러한 결과는 RB의 n-hexane 분획물로부터 천연 항암 물질을 포함하고 있음을 보여줍니다.