We previously reported that CDK2/Cyclin A can phosphorylate and activate the transcription factor NF-Y. In this study, we investigated a potential regulatory role for NF-Y in the transcription of Cyclin A and other cell cycle regulatory genes. Gel-shift assays demonstrate that NF-Y binds to CCAAT sequences in the Cyclin A promoter, as well as to those in the promoters of cell cycle G2 regulators such as CDC2, Cyclin B and CDC25C. Furthermore, expression of Cyclin A increases NF-Y's affinity for CCAAT sequences in the CDC2 promoter; however, Cyclin A's induction of CDC2 transcription is antagonized by p21, an inhibitor of CDK2/Cyclin A. These results suggest a model wherein NF-Y binds to and activates transcription from the Cyclin A promoter, increasing cellular levels of Cyclin A/CDK2 and potentiating NF-Y's capacity for transcriptional transactivation, and imply a positive feedback loop between NF-Y and Cyclin A/CDK2. Our findings are additionally indicative of a role for Cyclin A in activating Cyclin B/CDK1 through promoting NF-Y dependent transcription of Cyclin B and CDC2; NF-Y mediated crosstalk may therefore help to orchestrate cell-cycle progression.
Park, Chang-Eun;Kim, Young-Hoon;Jeon, Eun-Hyun;Lee, Suman;Lee, Sook-Hwan;Lee, Kyung-Ah
한국발생생물학회:학술대회논문집
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한국발생생물학회 2003년도 전기 한국발생생물학회 제16차 학술대회논문집
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pp.21-23
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2003
Mechanisms regulate the arrest and growth of the resting primordial follicles are very poorly understood. To elucidate genes involved in the early folliculogenesis, we conducted suppression subtractive hybridization using mRNA from day1 and day5 ovaries and selected weel for further analysis, since it was most frequent gene in the day1-subtracted cDNA library (1). Expression of weel and correlated components of the cell cycle machinery, such as cdc2, cyclin B1, cdc25C, and phosphorylated cdc2 was evaluated by immunohistochemistry. In primordial follicles, expression of weel, cdcw, and cyclin B1 was cytoplasmic in oocytes, but phosphorylated cdc2 was weakly expressed in oocytes. While cdc25C expression was in ovarian somatic and in some theca cells. None of components was expressed in the pre-granulosa cells of the primordial follicles, while weel weakly, and cdc2 and cyclin B1 was strongly expressed in the granulosa cells of the growing follicles. Results from the present study suggest that 1) the mejotic arrest of the oocytes may not due to of cell cycle machinery, and 2) the weel may arrest meiosis by sequestering cdc2 and cyclin B1 in the cytoplasm by protein-protein interactions and/or by inhibitory phosphorylation.
보체의존성 세포독성반응(CDC)을 이용한 DLA class I교차 반응의 실험방법을 정립함으로써 개의 동종 신장이식 후 초기에 발생되는 초급성 거부반응을 억제하는데 응용하고자 븐 실험을 실시하였다. 체중(약 5kg)과 연령(약 1년령)이 유사한 잡종견을 대상으로 적혈구 교차 반응을 실시하여 상호 음성인 7마리를 실험에 사용하였다. 혈액형이 동일한 개체를 대상으로 CDC검사를 실시하였으며, Anti-dog serum, Hank's balanced salt solution (HBSS), 그리고 자가 혈청을 각각 양성 음성 그리고 자가 대조 혈청으로 이용하였다. Class I보체와 반응시킨 후 에오신으로 염색하여 고정한 다음 위상차 현미경 100배율에서 조사하였다. 국제 Cytotoxicity scoring system에 의하려 죽은 세포가 $20\%$ 이상이면 양성으로 평가하였다. CDC 결과 동일 혈액형 군에서 상호 음성이 나온 경우를 대상으로 상호 동종이식을 실시하여 초급성 거부반응의 발생 정도를 평가하였다. 혈액형이 1.2 B인 4두 중 1두는 자가항체를 가지고 있었다. CDC 결과 동일 혈액형 군에서 각각 1쌍이 상호 음성을 나타내었고, 혈액형이 다른 1쌍에서도 상호 음성이 관찰되었다. 혈액형이 동일하고 CDC음성인 2쌍 4두를 대상으로 상호 신장 이식을 한 결과 4마리 모두 초급성 거부반응이 나타나지 않았다. 이 실험에서 확립한 DLA교차 방법은 동종 이식에서 초급성 거부반응을 억제하는데 효과적인 방법이며, 향후 개의 동종 장기 이식에서 조직적합성 평가를 위해 응용될 수 있을 것이라 사료된다.
본 연구에서는 명아주과 수송나물속 솔장다리(Salsola collina Pall.) 추출물의 항산화 및 항암 활성을 분석하였다. 먼저 솔장다리의 에탄올 추출물의 DPPH radical scavenging activity를 분석한 결과, $IC_{50}$가 $4.82{\mu}g/ml$로 나타나 강한 항산화능을 보유하였음을 확인하였다. 또한 대장암 세포주(HT29), 폐암 세포주(A549), 간암 세포주(HepG2)를 사용하여 솔장다리 추출물의 암세포 사멸효과를 분석한 결과, $IC_{50}$가 각각 43.8, 64.1, $92.5{\mu}g/ml$로 강력한 세포사멸효과를 나타냈으며 특히 HT29에 대한 강한 사멸효과를 보였다. 솔장다리 추출물의 항암 활성 기전 분석을 위해 세포주기를 분석한 결과, 대장암세포인 HT29의 G2/M arrest를 유도하였으며 최고 농도인 $60{\mu}g/ml$까지 S기 세포수가 증가하였다. 세포주기관련 단백질의 발현 분석 결과, 솔장다리 추출물을 처리한 경우, G2기에서 M기로의 전이에 필수적인 단백질인 Cdc25C와 cyclin A의 발현이 감소되었고, 반면 Cdc25C와 Cdc2의 불활성화 형태인 p-Cdc25C, p-Cdc2는 증가하였다. 또한 p21과 Wee1의 발현도 증가되었다. 하지만 p53의 발현량은 변화가 없었다. 이러한 결과는 솔장다리 추출물을 처리한 경우, p53 비의존적으로 p21의 발현이 증가되어 cyclin A/Cdc2 complex의 활성이 조절되고, 이어서 G2/M phase의 check point에 작용하는 Wee1의 발현증가 및 Cdc25C, Cdc2의 인산화에 의한 불활성화를 통하여 G2/M arrest가 유도되는 것을 시사한다. 또한 솔장다리 추출물 처리에 의해 S기 진행을 조절하는 Cdk2의 발현량도 감소하여, cyclin A/Cdk2 complex가 감소되어 S기의 세포수가 증가한 것으로 보인다. 따라서 본 연구 결과를 통해 솔장다리 추출물이 높은 항산화 활성을 지니며 암세포의 세포주기를 조절하여 높은 항암 활성을 보유함을 확인하였다.
In this paper, an energy-efficient 11.49-bit successive approximation register (SAR) capacitance-to-digital converter (CDC) for capacitive sensors with a figure of merit (FoM) of 31.6 pJ/conversion-step is presented. The CDC employs a SAR algorithm to obtain low power consumption and a simplified structure. The proposed circuit uses a capacitive sensing amplifier (CSA) and a dynamic latch comparator to achieve parasitic capacitance-insensitive operation. The CSA adopts a correlated double sampling (CDS) technique to reduce flicker (1/f) noise to achieve low-noise characteristics. The SAR algorithm is implemented in dual operating mode, using an 8-bit coarse programmable capacitor array in the capacitance-domain and an 8-bit R-2R digital-to-analog converter (DAC) in the charge-domain. The proposed CDC achieves a wide input capacitance range of 29.4 pF and a high resolution of 0.449 fF. The CDC is fabricated in a $0.18-{\mu}m$ 1P6M complementary metal-oxide-semiconductor (CMOS) process with an active area of 0.55 mm2. The total power consumption of the CDC is $86.4{\mu}W$ with a 1.8-V supply. The SAR CDC achieves a measured 11.49-bit resolution within a conversion time of 1.025 ms and an energy-efficiency FoM of 31.6 pJ/step.
현재 무선단말기를 비롯한 많은 내장형 기기에서 자바 플랫폼을 채택하고 있다. 내장형 기기는 제공되는 메모리 용량의 제약으로 인하여 J2ME 플랫폼을 주로 사용하고 있다. J2ME 플랫폼은 CDC와 CLDC 컨피큐레이션으로 나뉘며. CDC는 JAVA 어플리케이션의 수행에 있어서 JVM보다 적은 동적 수행 메모리를 요구하는 CVM을 채택하고 있다. CDC는 CLDC에 비하여 메모리의 제약이 상대적으로 적은 셋탑박스 등과 같은 내장형 기기에서 주로 사용된다. 본 논문에서는 J2ME 플랫폼의 VM중에 하나인 CVM상에서 어플리케이션 수행에 따른 Generational GC의 특성에 대하여 알아본다. 특히 오브젝트의 life time, 가비지 컬렉션 주기 pause time 및 young generation의 크기에 따른 동작 특성을 중점적으로 고찰한다.
효모의 mating pheromone에 의한 세포내 Slgnal을 전달하는 물질을 coding 하거나 조절할 수 있는 유전자에 대한 정보를 얻기 위해서 효모에서 G-protein의 ${\alpha}-subunit$를 coding 하는 유전자 CDC70에 돌연변이가 얼어난 균주 $A14-3(MAT{\alpha},\;cdc70-5)$에 UV를 조사하여 돌연변이 cdc70-5를 억제할수 있는 또 다른 돌연변이를 획득하였다 . 돌연변이 cdc70-5의 표현형은 온도 감수성 (temperature sensitivity)이며, $38^{\circ}C$에서 배양하면 세포주기가 G1에서 정지되고 shmoo모양을 보인다 . 균주 A14-3에서 UV를 조사하였을 때 $38^{\circ}C$에서 colony를 형성할 수 있고 세포분열이 정상적으로 진행되어 출아를 하고 있다는 것은 새로운 돌연변이가 cdc70-5 의 표현형을 억제 한다는 사실을 의미한다 . 이러한 억제돌연변이 중 signal transducer와 직접적으로 관련이 없는 유전자들인 $sir^-$ 및 $mat{\alpha}2^-$ 돌연변이를 배제한 다음 선택된 15개의 돌연변이들를 중심으로 분석을 행하였다 . 어느 유전자에서 유발 되었는지 그리고 유전자 종류는 몇 가지나 되는지를 암기 위하여 tetrad analysis를 통해 연관여부를 조사하여 분리된 15개의 돌연변이중 12개는 4개의 연관군(sga1, sga2, sga3, sga4)에 속함을 알았다.
Purpose: To examine the prevalence of $Clostridium$$difficile$ ($C.$$difficile$) colonization (CDC) and potential neonatal determinants of CDC in hospitalized preterm infants. Methods: Fecal samples were serially collected within 72 h after birth and at 1, 2, and 4-6 weeks of age from preterm infants in the neonatal intensive care units (NICUs) of two different university hospitals. Total bacterial DNA was extracted from each fecal sample from 49 infants, and polymerase chain reaction (PCR) was performed with primers for the 16S gene of $C.$$difficile$ and the toxin A and toxin B genes. The correlation between the results of $C.$$difficile$ PCR assays and the clinical characteristics of the infants was analyzed. Results: The prevalence rates of CDC were 34.7, 37.2, 41.3, and 53.1% within 72 h after birth and at 1, 2, and 4.6 weeks of age, respectively. The toxin positivity rate was significantly higher in the infants with persistent CDC than in those with transient CDC (8/12 [66.7%] vs. 6/25 [24.5%] ($p$=0.001). Among the various neonatal factors, only the feeding method during the first week after birth was significantly associated with persistent CDC. Exclusive breast-milk feeding (EBMF) significantly decreased the risk of persistent CDC compared to formula or mixed feeding (adjusted odds ratio: 0.133, 95% confidence interval: 0.02-0.898, $p$=0.038). Conclusion: The prevalence of CDC increased with the duration of hospitalization in preterm infants in the NICU. EBMF during the first week after birth in hospitalized preterm infants may protect against persistent CDC.
The sense and antisense digoxigenin-labeled RNA probes of four genes, Cdc25A, Cdc25B, Sox2 and Mnb, were produced by using SP6 and T7 RNA polymerases, respectively, and in vitro transcription. Expression patterns of the four genes were detected by in situ hybridization in HH (Hamburger and Hamilton) stage 10 chick embryos. In general, expression patterns of the four genes were similar. mRNA of the four genes was mostly restricted to the entire CNS (central nervous system). All were confined to an identical region, neural tube, neural groove and caudal neural plate, corresponding to the notochord or spinal cord, but there was some distinction in specific region or in concentration, for example in somites. The overlap in expression at the same developmental stage in the CNS suggests that the four genes may be functional similar or related in CNS development. Expression patterns of the four genes support specific roles of these regulators in the developing CNS.
All of four genes are cloned and DNA sequence analysis have now revealed that these four genes encode a family of proteins with similar amino acid sequence. These proteins show no extensive similarities to any known proteins (Haarer et al., 1991). Among them, CDC3 gene is fused with E. coli lacZ and trpE genes and antibodies against the CDC3 gene product are produced. These antibodies are used to check the localization of this product to the vicinity of the 10 -nm filaments in the mother-bud neck.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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